海参肽的提取分离及其体外抗氧化活性

以水解度为指标,试验研究了复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、水产蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶对海参蛋白的水解能力,确定以复合蛋白酶为最佳用酶。以料液比、加酶量、酶解时间为试验因素,水解度为响应值,通过响应面法对提取工艺进行优化,结果表明该酶最佳酶解条件为:加酶量0.79%、料液比1︰5.35 (g/mL)、酶解时间3.93 h。在此条件下,海参蛋白水解度为21.38%。分别用截留分子量3 kDa和1 kDa超滤膜对海参肽进行分级分离,得到分子量大于3 kDa, 1～3 kDa和小于1 kDa 3种海参肽,将不同分子量海参肽分别在ABTS+·清除活性、还原力、DPPH·清除活性、O_2~-·清除活性4种体系下比较三者体外抗氧化能力。结果显示:分子量小于1 kDa海参肽对ABTS+·、O_2~-·清除活性最强, 1～3 kDa海参肽次之,大于3 kDa海参肽最弱;分子量大于3 kDa海参肽还原力以及对DPPH清除活性最强。     

鲤鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

通过测定鲤鱼肉酶解物对Fenton体系产生的·OH的清除效果,从木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶和复合风味蛋白酶中,筛选出复合蛋白酶作为酶解鲤鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的水解酶.用响应面分析法(RSM)对该酶的水解条件进行优化,得到最佳酶解条件为:温度55℃、酶解时间1.5 h、pH=6.5、酶加量为250 U/g底物、底物质量分数为25%,在此条件下酶解物的水解度为4.5%.利用Sephadex G-15凝胶层析测定酶解物分子量分布,结果显示,活性肤分子量为477 u～1 058 u.     

胰酶水解猪血蛋白工艺条件的优化

为拓展猪血蛋白利用途径,提高猪血蛋白的水解率,得到更丰富的Maillard反应底物——小分子肽及氨基酸,采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶7种酶,在固定条件下分别对猪血进行水解,以水解度为指标筛选出水解度最高的酶,然后再对该酶进行从单因素试验到正交试验的水解工艺参数优化。结果显示:胰酶的水解效果最好,其最佳的水解条件是酶加量0.5%、水解时间5h、温度55℃、初始pH8.5、底物蛋白质量分数7%,通过一次水解,可使水解度达到38.72%。     

复合酶水解猪血液工艺条件的研究

为了探索出经济实用的酶解猪血的方法,对两种不同来源的蛋白酶其采用单一和复合酶水解鲜猪血的酶解效果进行了比较。结果表明:复合法酶解鲜猪血水解效果最好。复合酶最适水解工艺条件为最初pH7～8、温度50℃、酶底物浓度比(E/S)为6000U/g、底物浓度8%、水解时间8h。     

猪血红蛋白酶解制备ACE抑制肽的研究

本实验选用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶等六种商业蛋白酶在各自最适反应条件下分别水解猪血红蛋白12h,研究其水解产物对血管紧张素转换酶抑制率和蛋白水解度的影响。结果显示:采用胃蛋白酶酶解获得的产物ACE抑制率最高。胃蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),酶与底物浓度比E:S=3%,温度37℃,pH2.0,水解4h后其ACE抑制率为81.10%,水解度为6.64%。     

碱性蛋白酶酶解绿豆蛋白制备低聚肽工艺优化

采用碱性蛋白酶酶解绿豆蛋白,通过单因素试验方法优化酶解条件,经测定水解度考察了酶解过程中p H、温度、底物浓度[S]、酶用量[E/S]、酶解时间等因素对绿豆蛋白酶解效果的影响。通过L_9(3~4)正交试验设计,确定碱性蛋白酶酶水解的最适反应条件为:pH 8.5,温度65℃,底物浓度9%,酶用量5%,水解时间240 min。该条件下绿豆蛋白的水解度可达31.55%。     

猪血血红蛋白酶解的优化研究

采用两种不同来源的蛋白酶进行对猪血血红蛋白的复合水解,以水解率为考察指标,研究底物浓度、加酶比例、pH、水解温度、酶解时间、加酶量等因素对水解率的影响。通过正交实验,确定复合酶水解的最佳工艺条件为底物浓度10%、加酶比例3∶7、pH7.5、水解温度50℃、酶浓度8000U/g、水解10h,在此条件下获得的水解率为19.1%。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白水解工艺

采用碱性蛋白酶制备高水解度的玉米蛋白酶解物,以水解度为考察指标,设计单因素及响应面实验,优化其水解工艺条件。实验结果表明:最佳水解工艺条件为底物浓度23 g/L,加酶量(E/S)3.5%,酶解温度49.7℃,酶解时间4 h,p H为9.0,在此条件下,水解度可达到27.18%。      

豌豆蛋白深度酶解制备咸味肽的研究

以水解度、蛋白回收率和感官评价为指标,探究不同蛋白酶、酶解温度、pH及时间对豌豆蛋白酶解效率的影响,并对其酶解工艺进行优化,同时对最优酶解条件下获得的豌豆蛋白酶解产物的肽分子量分布和氨基酸组成进行分析。结果表明:豌豆蛋白最优酶解条件为采用风味蛋白酶酶解,温度50℃,pH 7.0,酶解时间24 h,在此条件下,豌豆蛋白水解度为22.63%,蛋白回收率为58.08%,且该酶解产物中小分子肽(1 kDa)约为65.60%。豌豆蛋白酶解产物中必需氨基酸含量为39.16%,鲜味氨基酸含量为36.79%,甜味氨基酸含量为15.03%。     

大豆球蛋白酶解物清除DPPH自由基活性的研究

以7S和11S大豆球蛋白为原料,用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶制备大豆球蛋白酶解产物,分别测定其DPPH(1,1-二苯基苦酰基苯肼)自由基清除活力和水解度,从5种蛋白酶中筛选出碱性内切蛋白酶酶解物的清除活力最高,且相同水解时间的水解度最大.选择碱性蛋白酶为最佳水解酶,利用正交试验优化了其最佳水解条件,碱性内切蛋白酶水解7S和11S大豆球蛋白的最佳条件为:温度55℃,pH 8.0,酶用量5%,底物浓度4%.结果表明:在最佳水解条件下,7S大豆球蛋白酶解物的DPPH自由基清除活力比11S大豆球蛋白酶解物的高.     

响应面法优化紫贻贝蛋白酶解工艺条件

分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶7种蛋白酶对紫贻贝蛋白的酶解工艺条件进行研究。根据水解度和感官评定的结果,确定中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶可以作为紫贻贝蛋白酶解的外加蛋白酶。将上述4种蛋白酶进行两两复配,通过试验确定复合蛋白酶与中性蛋白酶按1:1进行复配,可作为紫贻贝蛋白酶解的最适复配酶。采用响应面优化分析得出复配蛋白酶最佳酶解条件为酶解时间2h、pH7、酶解温度50℃、酶添加量0.4%,在此条件进行实验,测得水解度为70.25%,游离氨基酸总量增加了388.46%。     

血红蛋白酶法脱色技术研究

为充分改善血红蛋白的感官质量并扩大其应用范围,本实验以猪血为原料,以猪血红蛋白为研究对象,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L,胰蛋白酶,Flavourzyme,AS1398中性蛋白酶,木瓜蛋白酶及胃蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白480min,以产物色泽为评价指标,筛选出木瓜蛋白酶为最佳水解用酶。其酶解液接近无色,透明、清澈,感官质量得到了很大提升。其酶解条件为底物浓度5%,酶与底物比100U/g,温度37℃,pH值6.5。各蛋白酶水解液的色泽由浅至深依次为:木瓜蛋白酶,Flavourzyme,AS1398中性蛋白酶,胰蛋白酶,胃蛋白酶和Alcalase 2.4L。     

响应面法优化龙须菜蛋白酶解工艺及酶解液的抗氧化活性

为获得高抗氧化活性的龙须菜蛋白酶酶解液,运用响应面(RSM)分析方法对龙须菜蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,在单因素实验基础上,以亚铁离子螯合率和DPPH自由基清除率为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、p H、酶解温度、底物质量浓度、加酶量对龙须菜蛋白酶解液抗氧化活性和水解度的影响。结果表明:在所选的5种蛋白酶中,复合蛋白酶是龙须菜蛋白酶解的最适用酶;酶解液抗氧化活性的最优酶解条件为酶解时间8.1 h、酶解温度50.1℃、p H7.0、底物浓度10 g/L、加酶量0.1%(0.15 AU/g)。在此条件下,酶解液的亚铁离子螯合率为74.61%,DPPH自由基清除率为47.66%,水解度为17.58%。对比常用抗氧化剂,酶解液在亚铁离子螯合能力方面显著高于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05),而在DPPH自由基清除能力和还原能力方面,酶解液低于0.01%维生素C和0.01%BHA(p<0.05)。优化后的龙须菜蛋白酶酶解液具有一定的抗氧化活性。      

具有金属螯合活性的蚕豆蛋白酶解物的制备

目的探究蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性,研究其金属螯合活性与其抗氧化活性的关系。方法分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蚕豆蛋白进行酶解,并测定其水解物的抗氧化活性与金属螯合活性,选用碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白制取金属螯合肽的最适酶,以酶解产物的水解度、抗氧化活性及金属螯合活性为测定指标获得合适的水解条件。结果 3种蛋白酶的蚕豆蛋白酶解产物都有金属螯合活性和抗氧化活性,碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白的最适酶,最适酶解时间为4 h时,得到的酶解产物金属离子螯合率为88.22%,抑制羟自由基能力为220.70 U/mg,总还原力为0.03 U/mg。结论蚕豆蛋白酶解物具有一定的金属离子螯合活性与抗氧化活性,水解度对蚕豆蛋白酶解物的金属离子螯合活性及抗氧化活性有明显的影响,蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性与总还原力及抑制羟自由基能力呈现显著的正相关性,相关系数分别为0.925、0.968(P0.01)。     

复合酶水解猪血液工艺条件的研究

为了探索出经济实用的酶解猪血的方法，对两种不同来源的蛋白酶其采用单一和复合酶水解鲜猪血的酶解效果进行了比较。结果表明：复合法酶解鲜猪血水解效果最好。复合酶最适水解工艺条件为：最初pH为7-8，温度为50～55℃，酶底物浓度比(E／S)为6000-8000μ/g，底物浓度为8％，水解时间为8h。     

微波辅助酶解提取硫酸软骨素下脚料中胶原蛋白肽的工艺研究

以生产硫酸软骨素的下脚料为原料,采用微波辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度、相对分子量分布为指标确定最佳水解条件。通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及风味蛋白酶进行筛选,确定风味蛋白酶水解产物的水解度最高;研究了加酶量、底物浓度、反应温度、pH对酶解反应的影响,确定酶解的最优工艺条件为:加酶量6%,底物浓度10%,反应温度50℃,pH7.0。此外,与单独的酶解相比,微波辅助酶解缩短了酶解时间近50%,分子量小于1 000的胶原蛋白肽比例占91.2%。     

火麻仁粗蛋白酶解工艺的优化及应用

文章以火麻仁粗蛋白为原料,分别研究碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对火麻仁蛋白的酶解效果,将水解度和产品风味作为评价酶解效果指标,通过单因素及响应面法确定最佳酶解条件,并将火麻仁蛋白酶解液制备成火麻仁蛋白沙棘果饮,为开发火麻仁蛋白水解物相关产品提供思路。当火麻仁粗蛋白底物浓度为20.5%、中性蛋白酶添加量0.5%、酶解时间6.7 h,此时酶解产物的水解度为16.18%,火麻仁粗蛋白酶解液中的低分子质量蛋白质含量由0.24g/100 g提高到2.21 g/100 g,提高了蛋白的消化吸收特性。火麻仁蛋白沙棘果饮的最佳组方为：火麻仁蛋白酶解液量20%、沙棘汁量为3%、蔗糖量为7%、柠檬酸量为0.4%,此时综合评分最高,离心沉淀率最低,产品具有一定抗氧化能力。     

方格星虫蛋白酶解工艺优化

以水解度为指标,比较7种蛋白酶对方格星虫的水解效果。在单因素试验考察的基础上,采用Box-Behnken模型响应面设计,建立方格星虫蛋白酶解的二次回归模型,确定最佳的水解条件。结果表明,复合蛋白酶对方格星虫蛋白的水解效果最佳,最佳水解条件为:酶与底物比为7.8%,酶解时间为4 h,酶解温度为50℃。该条件下,方格星虫蛋白的水解度达到24.81%。     

酶法制备云芝菌丝体肽的研究

通过分析三种蛋白酶对云芝菌丝体的酶解情况,确定以中性蛋白酶作为水解酶用酶,用单因素实验考察了其相应的酶解条件,正交实验得出最佳水解条件为:pH8.0,温度50℃,底物浓度10%,酶浓度0.6mg/g,水解时间2h,在此条件下的水解度为33.28%。将酶解液通过10、5、3kDa截流分子量的超滤膜,测定不同分子量段肽溶液的肽得率和清除羟基自由基的IC50值,结果表明:分子量在3kDa以下的肽得率最高,清除羟基自由基的能力最强。      

酶法制备云芝菌丝体肽的研究

通过分析三种蛋白酶对云芝菌丝体的酶解情况,确定以中性蛋白酶作为水解酶用酶,用单因素实验考察了其相应的酶解条件,正交实验得出最佳水解条件为:pH8.0,温度50℃,底物浓度10%,酶浓度0.6mg/g,水解时间2h,在此条件下的水解度为33.28%.将酶解液通过10、5、3kDa截流分子量的超滤膜,测定不同分子量段肽溶液的肽得率和清除羟基自由基的IC50值,结果表明:分子量在3kDa以下的肽得率最高,清除羟基自由基的能力最强.