高效液相色谱-蒸发光散射检测法快速测定益生菌粉中低聚果糖含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,快速洗脱分离出蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖,测定益生菌粉中低聚果糖的含量。方法样品经过前处理,以乙腈和水为流动相,等度洗脱,经XAmide(4.6 mm×250 mm,5μm)中性酰胺色谱柱分离,采用蒸发激光检测器检测。结果蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖线性范围分别在0.2671~3.168 mg/m L、0.2429~2.8215 mg/m L、0.1617~3.544 mg/m L,线性相关系数r0.99。3种主要组成的回收率在97.0%~105.0%之间。结论该方法可有效分离出蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖,推广性高、快速、简便、准确,可用于益生菌粉中低聚果糖含量的测定。     

利用蒸发光散射检测器测定食品中的低聚果糖

采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器在同一色谱条件下对不同种类食品中低聚果糖含量的测定。结果表明,在该检测条件下,食品中低聚果糖组分的能够得到有效的分离,基线平稳。蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的检测范围在0.67mg/m L~14.0 mg/m L之间,线性相关系数在99.95%以上。不同种类的食品样品中,低聚果糖3种组分的回收率在95.20%~100.15%之间。该方法灵敏度高,准确,快捷,适合于食品中低聚果糖含量的测定。     

食品中低聚果糖高效液相色谱检测方法研究

针对乳制品、糕点、酒类、饮料、糖果等食品中添加的功能活性成分低聚果糖,包括蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)的检测,建立了水和乙腈为流动相,梯度洗脱,氨基色谱柱分离,蒸发光散射检测器(evaporativelight-scattering detector,ELSD)检测食品中添加的低聚果糖含量的高效液相色谱方法。蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的线性工作范围分别为0·04~0·45、0·05~0·50、0·04~0·45mg/mL,线性相关系数R2分别为0·9999、0·9999、1。对不同类型的食品,三种低聚果糖的回收率在90·0%~110·0%之间,方法准确度高。室内重复性变异系数一般都低于10%,室间再现性变异系数一般都低于15%,说明方法的重复性和再现性良好。该方法简单、易于掌握,测定结果准确,适于复杂食品基质中低聚果糖含量的测定。     

高效液相色谱串联质谱法测定乳粉中低聚果糖

建立了测定乳粉中低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖)的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。乳粉样品用乙醇-水提取,上清液稀释后,采用XBridge TM Amide(3.5μm,4.6 mm×150 mm)柱,以乙腈-氨水溶液为流动相进行洗脱,电喷雾质谱负离子(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。该方法在0.5~20 mg/L范围线性良好(r0.9990,检出限最低为0.022 mg/kg)。分别在样品中添加标准物质1、5、10 mg/kg进行回收率实验,方法的回收率范围为90.8%~95.8%,相对标准偏差为3.6%~9.0%(n=6)。该方法样品前处理简单、快速,分析时间短,灵敏度、准确度和精密度均满足乳粉中低聚果糖的检测要求。     

超滤离心净化-高效液相色谱法同时测定 配方乳粉中的单糖、双糖和低聚果糖

目的采用超滤离心截留技术快速除杂,结合高效液相色谱仪,建立一种同时检测配方乳粉中7种糖类化合物(果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖)的分析方法。方法经实验优化,选用截留分子量3000的超滤离心管高速离心去除样品溶液中的蛋白质、核酸和多糖等大分子物质,以乙腈-水为流动相(75:25,v:v)等度洗脱,Luna氨基色谱柱分离,示差折光检测器检测。结果 7种目标分析物在0.15~10.0mg/m L范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,方法检出限在0.039~0.087 g/100 g之间;当添加水平为0.50~2.0 g/100 g时,回收率在81.2%~105%之间,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.1%~6.2%。结论该方法与国标方法的检测结果一致,且前处理简单、结果准确、回收率高,适合配方乳粉中7种单糖、双糖和低聚果糖的测定。     

运动饮料中糖分的检测

建立一种用高效液相色谱-蒸发光检测法测定运动饮料中常用的木糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖等10种糖分的检测方法。样品经乙腈-水提取,过滤膜后上机检测。采用ZORBAX糖分析色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈-水梯度洗脱作为流动相,用蒸发光检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,10种糖组分在0.01 g/100 m L~0.50 g/100 m L浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.996~0.999,检出限为0.02 mg/m L~0.1 mg/m L,定量限为0.06 mg/m L~0.3 mg/m L,加标回收率达到90.2%~98.5%。     

高效阴离子交换色谱法同时测定菊粉酶解产物中的单糖、双糖和低聚果糖

建立了低聚果糖样品中的葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖的高效阴离子交换色谱-脉冲安培法的定量分析方法。采用阴离子交换柱CarboaPacTM PA10（250 mm×2 mm）脉冲安培法进行检测,以氢氧化钠和醋酸钠为淋洗液进行梯度洗脱,柱温30 ℃,流速0.3 mL/min。结果表明,葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖在质量浓度0.1～10 mg/L范围内的线性关系良好,相关系数r2大于0.996 1,各组分的相对标准偏差均在2.69%～7.21%之间。将此方法应用于菊粉酶解后反应产物的检测,结果表明该方法快速简便且灵敏度高,能满足反应样品中低聚果糖的检测要求。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定乳粉中的低聚果糖和低聚半乳糖

目的建立一种检测乳粉中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五塘、低聚半乳糖的高效液相色谱-蒸发光散射法(high performance liquid chromatography coupled with evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)。方法以水和乙腈为流动相梯度洗脱,利用糖柱分离,蒸发光散射检测器检测。考察了沉淀剂、酶解pH、温度和时间的影响。结果经过优化,得到以乙腈为沉淀剂,酶解pH为6.0、酶解温度为25℃、酶解时间为50min的最佳实验条件。该方法的线性范围均为0.05~2.0 mg/m L,半乳糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖检出限分别为0.02、0.02、0.01、0.02、0.02 mg/m L(S/N=3),回收率为92.52%~106.00%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)低于5.12%(n=6)。结论该方法能准确可靠地检测乳粉中低聚果糖和低聚半乳糖的含量。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器分析配方乳粉中的低聚果糖

建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测配方乳粉中低聚果糖的方法,采用水和乙腈二元梯度淋洗,在28min内梯度洗脱,低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖)分离效果好,蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的平均回收率分别为84.4%、74.3%、69.5%,方法简便快速,结果准确可靠,可以用于配方乳粉中低聚果糖的检测。     

高效离子色谱法分离、检测低聚果糖

采用CarboPac PA20柱和脉冲安培检测器的高效阴离子交换色谱建立一种低聚果糖的分析方法,该法可有效分离蔗果型和果果型低聚糖组分,并由此推测出低聚果糖的来源。结果表明,在优化条件下,蔗果低聚糖中蔗果三糖、新蔗果三塘、蔗果四糖和蔗果五糖的回收率分别为98.27%～99.72%、97.32%～102.56%、99.33%～101.81%和97.38%～102.12%。该法的相对标准偏差在0.55%～2.15%。蔗果三糖、新蔗果三塘、蔗果四糖和蔗果五糖的方法检出限分别为0.13、0.19、0.20 μg/g和0.41 μg/g。蔗果三糖在0.3～18 μg/mL、新蔗果三糖和蔗果四糖在0.5～20 μg/mL、蔗果五糖在0.8～23 μg/mL的范围内,其质量浓度与峰面积线性关系良好,相关系数在0.999 6～0.999 9之间。本方法简单、易于掌握,测定结果准确,适合低聚果糖产品及蛋白粉和奶粉等功能性食品中低聚果糖成分的检测分析。     

奶粉中低聚果糖质量浓度的测定

为检测奶粉中低聚果糖的质量浓度,建立起奶粉中低聚果糖的正相高效液相色谱法.样品经质量浓度为100g/L硫酸铜和40g/L氢氧化钠去除蛋白,氨基色谱柱分离,示差折光检测器,柱温30℃,流速1 mL/min,流动相为乙腈:水=70∶30(体积比),标准曲线法定量.蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖在质量浓度范围内线性关系良好,添加回收率分别是99.1％,99.7％,95.3％,方法的精密度的相对标准偏差为0.3％,1.1％和0.3％,检出限为2,2,4mg/kg.该方法快速灵敏,简便准确,适用于奶粉中低聚果糖质量浓度的检测.     

离子色谱-脉冲安培检测器分析奶粉中低聚果糖

建立了离子色谱-脉冲安培检测分析奶粉中低聚果糖的方法。采用CarboPacPA200分离柱对分离条件进行了优化,确定柱温为30℃、淋洗液梯度洗脱,在10．0～50．0mg·L^-1范围内低聚果糖呈良好线性,回收率蔗果三糖（GF3）73．1％-82．6％、蔗果四糖（GF4）76．4％-82．9％、蔗果五糖（GF5）73．8％-77．6％,检出限分别为蔗果三糖10mg·kg^-1、蔗果四糖20mg·kg^-1、蔗果五糖24mg·kg～,精密度分别为蔗果三糖3．22％～4．61％、蔗果四糖4．60％-4．94％、蔗果五糖1．82％-3．26％。检测了乳粉中的低聚果糖．效果良好。     

HPLC-ELSD法测定微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖含量

建立高效液相色谱-蒸发光散射法(High performance liquid chromatography with evaporative light-scattering detection,HPLC-ELSD)同时测定微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖含量的高效液相色谱方法。样品经乙腈水超声波浸取,采用Waters Amide色谱柱(4.6×250mm3.5μm)分离,以1%氨水和乙腈为流动相,使用蒸发光散射检测器进行检测。结果表明,阿拉伯糖:0.44~7.06mg/mL、果糖:0.30~4.74mg/mL、葡萄糖:0.40~6.45mg/mL、蔗糖:0.32~5.04mg/mL、麦芽糖:0.40~6.47mg/mL及乳糖:0.41~6.61mg/mL范围内线性关系良好;方法检出限为0.02~0.03mg/mL;回收率为95.31%~105.33%,6种糖含量相对标准偏差在2.30%~3.50%之间。该方法前处理简单、灵敏度高和检测速度快,适用于微胶囊中阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的定量检测。     

HPLC-ELSD同时分离检测食品中十种单糖、双糖和低聚果糖

为实现食品中木糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖等十种糖的同时分离检测,建立了以乙腈-水为流动相,NH2色谱柱分离,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测的分离检测方法;十种糖均在0.1～5mg/mL内具有良好的线性,线性相关系数在0.9901～0.9996之间;检出限均在0.1mg/mL以下,精密度RSD在1.71％～7.21％之间,回收率在97.91％ ～ 103.35％之间,结果较理想.本法高效、简单快速,可作为食品中以上十种糖同时分离检测的分析方法.     

不同产地雪莲果中低聚果糖含量和组成的测定

测定不同产地雪莲果中低聚果糖的含量和组成。超声提取雪莲果中低聚果糖,采用HPLC-ELSD测定。色谱柱:XAmide 5μm(4.6 mm×250 mm);流动相:乙腈-水(75∶25,V/V);流速:1 m L/min;柱温:30℃;检测器:ELSD;漂移管温度:70℃。方法学考察结果表明,蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖在0.406~2.030,0.420~2.100和0.456~2.280mg/m L范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为101.4%,99.7%和98.6%,RSD分别为1.53%,1.29%和2.81%。河北承德产雪莲果低聚果糖GF_2占14.26%,GF_3占16.52%,GF_4占7.87%;四川内江产雪莲果低聚果糖GF_2占16.65%,GF_3占17.72%,GF_4占9.35%。雪莲果中3种低聚果糖的含量差别较大,产地四川内江(南方)的雪莲果中低聚果糖含量均高于产地河北承德(北方)的。     

红枣低聚糖的HPLC分析

采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)鉴定红枣低聚糖成分,建立一种测定多种糖分的HPLC分析方法,测定不同品种红枣低聚糖含量。样品经70%(体积分数)乙醇提取,Ca柱HPLC分离分析,采用阳离子检测模式的LC-MS进行定性分析,峰面积外标法进行定量分析。通过HPLC保留值和LC-MS法鉴定出红枣中含有蔗果三糖和蔗果四糖。建立的HPLC分析方法可使红枣的5种主要糖分实现很好的分离,在0.30 mg/mL~10.0 mg/mL之内线性关系良好,r=0.999 6(n=5),RSD为0.53%~0.83%,加标回收率为97%~108%,对32种红枣的低聚糖进行含量测定,结果显示5种糖分总含量为223 mg/g F.W~395 mg/g F.W,其中金丝新1号含量最高。两种低聚糖含量范围为3.1 mg/g F.W~14.8 mg/g F.W,其中阜平大枣含量最高。蔗果三糖和蔗果四糖是红枣中代表性低聚糖,在成熟期果实中其含量在1%(鲜重)数量级。     

高效离子色谱法检测婴幼儿配方奶粉中的功能性低聚糖

建立一种同时测定蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖、蔗果七糖、棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖的高效离子色谱检测技术,采用CarboPac PA20色谱柱分离,以氢氧化钠-乙酸钠为流动相,梯度洗脱,使用脉冲安培检测器进行检测。结果表明,在本实验条件下8种功能性低聚糖得到了很好分离,回收率为80.0%~103%,相对标准偏差小于3%(n=6)。该方法能快速、准确、可靠地检测婴幼儿配方奶粉中功能性低聚糖的含量。     

唾液乳杆菌利用低聚果糖的代谢过程研究

对唾液乳杆菌代谢低聚果糖的代谢过程进行探讨,采用阴离子交换色谱检测唾液乳杆菌代谢低聚果糖时各组分的变化规律,采用高效液相色谱方法检测其代谢产物。结果表明:唾液乳杆菌能够代谢低聚果糖,发酵液OD600值达到0.303时,总糖质量浓度从最初的10.00g/L降至8.82g/L,pH值从7.00降至6.12。在与低聚果糖组分同时存在的情况下,唾液乳杆菌优先利用葡萄糖、果糖和蔗糖;低聚果糖组分中能快速利用蔗果三糖,蔗果四糖代谢效率不高,不能代谢蔗果五糖。代谢产物HPLC分析结果显示,唾液乳杆菌代谢低聚果糖的代谢产物主要有乳酸和乙酸。     

高效液相色谱- 蒸发光散射检测法同时测定单糖、双糖及低聚果糖

建立一种高效液相色谱- 蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)同时对葡萄糖、果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖进行测定的方法。采用氨基柱分离,乙腈- 水为流动相,梯度洗脱,流速1.0ml/min,ELSD 漂移管温度85℃,载气为空气,流速2.0L/min。结果表明,在该条件下六种糖的组分都能够得到较好的分离,线性良好,回收率为97.62%～99.55%,相对标准偏差(RSD)小于3%(n=5)。该方法稳定、准确,适合于单糖、双单及低聚糖的检测及含量测定。     

蔗果三糖标准样品的研制

根据GB/T15000-2008《标准样品工作导则》的要求,建立蔗果三糖标准样品的研制方法。采用P-2凝胶色谱法结合制备高效液相色谱法从低聚果糖产品中制备得到蔗果三糖,然后通过红外光谱、质谱、核磁共振谱(1HNMR、13CNMR、HMBC、NMQC、COSY)对样品的结构进行鉴定并对核磁信号进行归属。将样品分装成130瓶后,采用高效液相-蒸发光散射法进行均匀性和稳定性检验,通过对8家具有资质的实验室联合测定结果的数据分析,评定出定值结果和不确定度。结果表明:蔗果三糖标准样品的稳定性和均匀性良好,定值结果为99.87%,置信度为95%的不确定度是0.36%。研制出的蔗果三糖标准样品符合国家标准样品研制工作导则的技术要求,可用于有关蔗果三糖和低聚果糖产品的检测和质量控制。