乳制品中低温腐败菌的分离鉴定

为了解在冷藏过程中乳制品腐致变质的原因,对酸奶、活性乳酸菌饮料、液态奶3种乳制品进行低温菌的分离、鉴定,并探讨了分离菌的最佳培养温度、时间以及营养条件.结果表明①从乳制品中分离得到3株可疑菌株,利用API试剂盒,鉴定出其中2株菌为变异玫瑰库克氏菌(Variation Kocuria roseus)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens),两者均为低温腐败菌;另外1株被鉴定为洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia),其不属于低温菌,但能够分解脂肪;②变异玫瑰库克氏菌及荧光假单胞菌的较佳培养条件分别为15℃48 h和20℃48 h.     

低温熏煮香肠中腐败菌的分离及鉴定

研究低温熏煮香肠中腐败菌相,分离出一株主要腐败菌,命名为NO.1A。利用生理生化检验和16SrDNA序列分析对该菌进行鉴定,结合生理生化检验结果和系统进化树分析结果,确定该菌为枯草芽孢杆菌。      

低温贮藏过程中鱿鱼细菌组成的变化及优势腐败菌鉴定

将鱿鱼在0、5、10、15℃有氧贮藏过程中的细菌菌相进行定性和定量分析。研究表明,鱿鱼贮藏初期其细菌组成较复杂,其中91.48%是革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌仅占4.26%,优势菌为气单胞菌(Aeromonas spp.)、浅黄金色单胞菌(Chryseomonas luteola)和假单胞菌(Stenotrophomonas spp.),比例分别为27.66%、23.40%和17.02%。此外,还检测出一定量的洛菲氏不动杆菌(Pantoea agglomerans)、成团泛菌(Acinetobacter lwoffii)。0、5、10、15℃贮藏过程中,细菌菌相逐渐变得单一,假单胞菌上升趋势明显,达到高品质期终点分别为360、239、96、47 h,货架期终点分别为525、286、147、86 h。0、5、10、15℃贮藏较好品质期时,TVBN均值为(17.15±0.29)mg/100g,菌落总数为(5.89±0.40)Lg CFU/g,假单胞菌比例分别为84.09%、72.09%、65.52%和76.36%,平均比例为75.92%;货架期终点时TVBN均值为(30.05±0.92)mg/100 g,菌落总数为(8.33±0.30)Lg CFU/g,假单胞菌比例达到93.24%、90.53%、88.57%和81.95%,平均比例为87.63%。由此得出鱿鱼0~15℃贮藏过程中的优势腐败菌是假单胞菌。     

热压结合处理对低温火腿中耐压腐败菌的抑制作用

本文主要探究热压结合处理(50 ℃,350 MPa保压10 min)对低温火腿中绿色魏斯菌和肠膜明串珠菌的抑制作用。通过薄层平板计数法对热压结合处理的杀菌效果进行判断,使用流式细胞技术判断细胞的生理状态,通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察细胞形态结构的变化,利用紫外分光光度法测定热压结合处理对细菌细胞膜通透性的影响。结果表明:经热压结合处理后,绿色魏斯菌和肠膜明串珠菌的存活率分别为-4.74和-6.61lg(CFU/mL),其生长变得迟缓,对数期生长速率降低。扫描电镜结果显示热压结合处理对两种菌的形态造成明显的变形,透射电镜结果显示细胞内部出现团状聚集和透电子区。热压结合处理对细胞膜产生损伤,细胞膜通透性变大,导致细胞外紫外吸收物质也极显著增加(p<0.001),细胞处于亚致死状态。热压结合处理会对细胞膜产生一定的形变及损坏,使得细胞内核酸和蛋白质流出,同时细胞内部也会发生蛋白变性和细胞质皱缩,达到抑制耐压菌生长繁殖的目的。     

真空包装冷藏鲟鱼中优势腐败菌的分离、鉴定及生长预测

为监测真空包装鲟鱼在冷藏过程中的优势腐败菌动态变化,通过感官评价和传统选择性培养的方法,对真空包装冷藏鲟鱼中的优势腐败菌进行了分析;同时选择性分离筛选出代表性菌株Q-1和C-1,并基于16S rRNA基因进行了鉴定。结果表明:气单胞菌和肠科菌是真空包装鲟鱼在冷藏过程中的优势腐败菌;菌株Q-1可能为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)新亚种,菌株C-1为路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii);同时与菌株C-1相比,菌株Q-1的生长延滞期较长,但生长较快,修正的Gompertz模型能够可靠地分别预测菌株C-1和菌株Q-1在真空包装鲟鱼在冷藏过程中生长动态。     

真空包装烟熏火腿切片主要腐败菌的分离及分子快速鉴定

利用微生物分离纯化与16S rDNA分子鉴定方法相结合,对真空包装烟熏火腿切片贮藏过程中主要腐败微生物菌相进行分离鉴定.产品在4℃贮藏,于不同时间取样,对其中微生物菌落进行分离和纯化、形态观察和部分生理生化鉴定,对最终得到的细菌纯培养物直接提取DNA,进行16S rDNA V3可变区扩增,PCR产物经测序后于NCBI与已知序列进行相似性比对.结果表明:从PCA和MRS培养基上共挑选出107株纯菌株.经形态学和生理生化鉴定,最后得到17株具有典型特征的纯菌株,经16S rDNA分子鉴定归纳为:Leuconostoc mesenteroides spp.、Lactobacillus sakei subsp.Sakei、Lactobacillus curvatus subsp.Melibiosus、Weissella viridescens、Dietzia sp.和Plantibacter aurantiacus.等6个属/种的细菌.     

胀袋烤鸡中腐败菌的分离与鉴定

通过胀袋烤鸡中的腐败菌相研究,分离出5株腐败菌,分别编号为A、B、C、D、E。利用生理生化结合16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定。综合生理生化检验结果和系统进化树分析结果,确定5个菌株分别为:A是生孢梭状杆菌(Clostridium sporgenes),B、E是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),C、D是短小芽孢杆菌(B.pumilu)。这将为烤鸡中腐败菌溯源分析及加工与保鲜过程中工艺控制提供借鉴。     

紫薯腐败菌的分离与鉴定

目的 从自然腐败的紫薯上分离纯化紫薯腐败菌, 通过反接种确定其致腐性, 并将其鉴定到属。方法 通过多次稀释平板涂布培养, 进行单菌落形态学观察, 将菌种反接种到新鲜紫薯上, 筛选出腐败菌, 以真菌ITS序列、细菌16S rDNA序列构建发育树, 鉴定到属, 再将鉴定结果与分离的菌种的形态学鉴定结果对比, 验证菌种鉴定结果。结果 从样品中分离出6种典型腐败菌, 有4种属, 分别为枝孢霉属、青霉属、曲霉属、芽孢杆菌属。结论 确定紫薯的腐败菌为哥氏枝孢霉(Cladosporium gossypiicola)、Penicillium christenseniae、热带青霉(Penicillium tropicum)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)和阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。     

真空包装烧鸡中腐败细菌的分离、初步鉴定与菌相变化分析

以真空包装的烧鸡为原料,观察了低温(4℃)和常温(25℃)下贮藏过程中细菌总数的变化,对其中的腐败细菌进行了分离和初步鉴定,并对主要腐败细菌菌相的变化规律进行了分析。结果表明,从细菌总数平板上挑取的13个特殊菌落中,芽孢菌属、乳酸菌属、微球菌属、热死环丝菌各1株,假单胞菌属、气单胞菌属各2株,肠杆菌科5株。贮藏温度(4℃和25℃)对主要腐败菌菌相构成的变化影响不大,乳酸菌在整个贮藏过程中一直为优势菌,假单胞菌次之,肠杆菌在室温条件下比初始菌相增加了近两倍,而在低温条件下变化不大,葡萄球菌和热死环丝菌则均有不同程度的下降。      

真空包装熟肉制品中的特定腐败微生物及其控制

真空包装低温熟肉制品的腐败变质主要是由乳酸菌引起的,腐败突出表现在出汁、产酸、产气、发粘4种感官腐败.主导腐败的微生物由清酒乳杆菌、弯曲乳杆菌、异型发酵的肠膜明串珠菌以及绿色魏斯菌等乳酸菌组成.在蒸煮阶段能够杀灭绝大多数微生物,腐败菌污染主要是在于后续的冷却、切片和真空包装阶段.采用超高压处理以及应用生物保护培养物,可以有效控制该类肉制品中的腐败微生物及部分致病微生物.     

真空包装酱牛肉中腐败细菌的分离、初步鉴定与菌相变化分析

将真空包装后的酱牛肉在低温和常温条件下贮藏,对其中的腐败细菌进行分离和初步鉴定,并对主要腐败细菌菌相的变化规律进行分析。结果表明：从细菌总数平板上挑取的28 个特殊菌落中,包括不动杆菌属7 株,葡萄球菌属6 株,肠杆菌科5 株,热死环丝菌和微球菌属各3 株,乳酸菌2 株,假单胞菌属和芽孢杆菌属各1 株。贮藏温度对真空包装酱牛肉主要腐败菌相构成变化的影响不大,乳酸菌和假单胞菌属为主要腐败菌。     

草鸡煲中腐败菌的分离鉴定

为了采取针对性措施控制草鸡煲中的微生物污染,采用平板划线分离方法对草鸡煲中的主要微生物菌群进行分离,再根据菌落形态、菌体形态、生理生化实验以及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定。结果表明,引起草鸡煲腐败变质的主要菌群有产气肠杆菌、成团泛生菌、假单胞菌、荧光假单胞菌、蜡状芽孢杆菌、类芽孢杆菌。     

桃罐头中腐败微生物的分离纯化及鉴定研究

通过对桃罐头中分离出的微生物进行分离培养、生理生化指标和反证试验进行鉴定和特性研究,初步断定其主要污染菌为凝结芽孢杆菌、黄色丝衣霉、蜡状芽孢杆菌等兼性厌氧菌,并依据实验数据绘制出了三种微生物的生长曲线,建立了一条检验桃罐头中微生物的技术路线。     

冷却猪肉优势腐败菌分离鉴定及致腐能力测定

分离鉴定冷却猪肉中的优势腐败菌并测定其致腐能力,以研究冷却肉腐败机理。利用选择性培养基和感官评定方法,从变质冷却猪肉中分离筛选出优势腐败菌并鉴定到种。再将各优势腐败菌接种到灭菌肉块上,4℃贮藏下定期测定各腐败菌的菌落数和挥发性盐基氮(TVB-N),并以TVB-N产量因子(YTVB-N)衡量各腐败菌的致腐能力。结果表明:经选择性培养基分离和肉样感官评定共筛选得到5株优势腐败菌即P3、PS1、J4、P5和S5,分别鉴定为Acinetobacter guillouiae、Pseudomonas koreensis、Bacillus fusiformis、Enterobacter cloacae和Brochothrixthermosphacta。进一步研究其腐败特性发现,4℃贮藏时接种优势腐败菌的肉样在第7天已明显腐败。PS1的TVB-N和YTVB-N明显高于其他菌株。研究表明,从冷却猪肉分离鉴定出的优势腐败菌中,PS1导致冷却猪肉腐败能力较强。     

淡水养殖罗非鱼中病原菌和腐败菌的分离与鉴定初探

本实验分析了刚捕获淡水养殖罗非鱼的体表黏液、腮、肠道、腐败肉和养殖池水的细菌菌相,结果表明,以上样品的菌落总数分别为1.0×103CFU/cm2、2.2×103CFU/g、1.4×105CFU/g、5.4×107CFU/g和2.6×104CFU/ml;共分离出353株菌,以革兰氏阴性菌为主.池水和新鲜鱼体的优势菌为芽孢杆菌、肠杆菌科、弧菌科,其主导地位随样品不同而有所差异,还有少量假单胞菌属、肠球菌属、葡萄球菌属等.腐败肉中的菌相较单一,优势菌为洋葱假单胞菌、嗜水气单胞菌和短芽孢杆菌,迟钝爱德华菌和克吕沃尔菌属少量.同时参照GB和SN标准对刚捕获罗非鱼的体表黏液、腮、肠道中病原菌进行分析,结果表明,在鱼体中检出大肠埃希氏菌、粪链球菌和铜绿假单胞菌,未检出单核增生李斯特氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和溶血性链球菌等病原菌.     

Bacteria and Volatile Compounds Associated with Ground Beef Spoilage

Ground beef (GB) samples were maintained in atmospheres of 2 or 18% oxygen. Similar putrid spoilage occurred at both concentrations, although the microflora differed. Two of 10 isolates from fresh and spoiled GB, nonfluorescent pseudomonads, produced putrid aromas but only 4 volatile compounds in common when inoculated into sterile GB. A Moraxella isolate produced a pronounced estery, decayed vegetable odor while others produced a decayed straw, ammoniacal or sour aroma. Differences in spoilage aromas apparently were not characterized by individual compounds but rather by the concentration of sulfur compounds and their ratio to other compound classes. Acetone, methyl ethyl ketone, dimethyl sulfide and dimethyl disulfide were indexes of microbial spoilage.     

酱牛肉中腐败细菌的分离与鉴定

本文研究了非真空包装的酱牛肉在0～4℃条件下贮存时细菌总数的变化,并对酱牛肉中主要的腐败细菌进行了分离与鉴定.研究表明,当初始菌数达到103cfu/g时,细菌总数可在3～5d内达到106cfu/g.导致酱牛肉腐败的主要细菌包括葡萄球菌属、肠杆菌科及热死环丝茵,假单胞菌所占比例较小.     

Evaluation of Natural Antimicrobials on Typical Meat Spoilage Bacteria In Vitro and in Vacuum-Packed Pork Meat

ABSTRACT: The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of natural antimicrobials on the growth of typical spoilage bacteria from marinated pork. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of thymol, cinnamaldehyde, allyl isothiocyanate, citric acid, ascorbic acid, a rosemary extract, and a grapefruit seed extract against Lactobacillus algidus, Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc carnosum, Carnobacterium maltaromaticum, Carnobacterium divergens, Brochothrix thermosphacta, and Serratia proteamaculans were determined in a microplate assay. Combinations of antimicrobials were tested and several combinations showed synergistic effects in inhibiting bacterial growth. Single and combined antimicrobials were added to vacuum-packed pork meat to evaluate preserving effects. Antimicrobial concentrations of up to 10 times the MIC values showed no effect on total bacterial growth in vacuum packed pork meaning that although most antimicrobials inhibited the growth of spoilage bacteria in vitro, results from the microplate assay could not be transferred to the meat system. Most natural antimicrobials possess strong odor and flavor that limit their use as a food preservative. In conclusion, this study showed that the use of natural antimicrobials in meat products is limited and that bacterial quality and shelf life was not enhanced under the chosen conditions.     

冷藏卵形鲳优势腐败菌的分离鉴定及致腐能力分析

为研究卵形鲳鲹冷藏末期的优势腐败菌及其致腐能力,采用传统选择性培养结合16S rDNA序列分析法,对卵形鲳鲹4℃贮藏期间腐败菌分别进行分离纯化、菌相分析及菌属确定,并以腐败物质的产量因子Y_TVB-N/CFU为评价标准,定量分析了贮藏末期优势菌的致腐能力。结果得出,卵形鲳鲹4℃贮藏过程中共分离纯化出16株细菌,其中革兰氏阴性菌10株,革兰氏阳性菌6株,其分属6个菌属。贮藏初期（0 d）时菌相丰富,希瓦氏菌属（Shewanella sp.）、假单胞菌属（Pseudomonas sp.）、葡萄球菌属（Staphylococcus sp.）、芽孢杆菌属（Bacillus sp.）、乳酸杆菌属（Lactobacillus sp.）与肠杆菌属（Enterobacter sp.）等均有出现;中期（3 d）菌群种类有所减少,以希瓦氏菌属（Shewanella sp.）与假单胞菌属（Pseudomonas sp.）所占比例较高,后期（6 d）种类进一步减少,只有3株菌占较高,分别是2号腐败希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens 48%）、5号奥奈达希瓦氏菌（Shewanella oneidensis 26.6%）与16号霍氏肠杆菌（Enterobacter hormaechei 19.4%）;致腐能力由高至低依次为腐败希瓦氏菌 > 奥奈达希瓦氏菌 > 霍氏肠杆菌,其中腐败希瓦式菌致腐能力显著强于另两株菌;综合贮藏末期所占比例及致腐能力结果,最终确定腐败希瓦氏菌为4℃贮藏下卵形鲳鲹的优势腐败菌。