乳铁蛋白对卵清白蛋白过敏小鼠外周血中Th1/Th2细胞平衡的影响

利用卵清白蛋白(OVA)建立BALB/C小鼠食物过敏模型,观察乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)对该食物过敏机体的免疫调节作用。小鼠分别接受预防性乳铁蛋白处理和胃肠道刺激期间灌胃乳铁蛋白,最后一次处理1h后检测其外周血中IFN-γ、IL-4、TGF-β、IL-6、IL-10、IL-12p40和IgE的变化。结果表明:2mg/(kg.d)(以体质量计)的Lf在胃肠道刺激期间显著提高了IFN-γ和IL-12p40水平而降低了IL-4和IL-6水平,但20mg/(kg.d)的Lf降低了所有这些细胞因子。同时,Lf明显降低了血清中IgE浓度而提高了IFN-γ/IL-4比值,20mg/(kg.d)的Lf对IgE影响较大,2mg/kg的Lf对IFN-γ/IL-4比值影响较大。此外,预防性处理中的Lf均显著降低了IL-4、IL-6、IL-10、IL-12p40、IFN-γ、TGF-β和IgE水平,并且20mg/(kg.d)的Lf效果较好,且该剂量明显提高了IFN-γ/IL-4比值。因此,Lf能够改善OVA诱导的食物过敏小鼠Th1/Th2细胞的平衡,具有重要的免疫调节作用。     

乳铁蛋白与纳米脂质体的相互作用及对磷脂膜结构的影响

为探明纳米脂质体(N-lip)与食品蛋白的相互作用，采用薄膜分散法制备N-lip。以乳铁蛋白(Lf)为模型蛋白，评价不同蛋白浓度和滴加方式下形成的纳米脂质体/乳铁蛋白(N-lip/Lf)复合物的粒径、Zeta-电位和多分散系数，并用隐形率(Fs)来估计N-lip与Lf的结合程度。利用透射电子显微镜比较乳铁蛋白作用前、后的形貌变化，采用光谱法和X射线衍射分析Lf与N-lip的相互作用。结果表明:在磷脂质量浓度为10.0 mg/mL、磷脂与胆固醇质量比为10 ∶ 1、磷脂与Tween-80的质量比为4 ∶ 1、蛋白质量浓度为0.1 mg/mL时，形成的N-lip/Lf复合物平均粒径为(100.80±0.141) nm，电位为(-54.9±2.276) mV，具有较好的分散度。透射电子显微镜观察可见，Lf在N-lip边缘形成浅色包裹层。Lf与N-lip的相互作用促进了Lf中色氨酸和酪氨酸残基所处环境的疏水性增强，Lf的α-螺旋结构含量增加；Lf可以通过氢键、范德华力和疏水作用与N-lip磷脂双分子层膜发生相互作用，吸附到磷脂膜表面。研究结果可为脂质体与食品蛋白的互作及脂质体在食品工业中的潜在应用提供理论依据。     

蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白条件的优化研究

目的优选并确定蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)的检测条件。方法利用蛋白质芯片技术,采用双抗夹心的方式,通过点样探针选择试验、点样一致性试验、棋盘滴定试验、浓度倍比试验、生物检测限试验及检测下限试验最终优化出针对目标蛋白的最佳检测条件。结果最终确定以Lf鼠单抗75#为点样探针,预点样46点,46点至90点为点样一致性区段;点样探针浓度为0.5 mg/ml,检测抗体效价为1∶2 000,在0.6~612ng/ml之间剂量-反应关系呈现S型曲线,其线性范围在9.56~306 ng/ml之间;检测下限为1.68 ng/ml,生物检测限为3.59 ng/ml;建立了对Lf具有最佳回归系数(r=0.998)的回归方程与标准曲线。结论此研究优化了利用蛋白质芯片技术检测Lf的试验条件,为建立定量检测Lf的蛋白质芯片平台奠定了基础。     

离子交换树脂吸附脂肪球膜蛋白及其影响因素的研究

脂肪球膜蛋白是乳脂肪球的组成部分,对婴幼儿的生长和发育十分重要,因此获得脂肪球膜蛋白的技术,可以促进脂肪球膜蛋白在婴幼儿配方乳粉开发利用。脂肪球膜蛋白提取的传统工艺存在提取率低、工艺复杂、蛋白纯度低等问题。为了解决以上问题,以酪乳乳清为原料,研究离子交换树脂吸附脂肪球膜蛋白的吸附作用,以期通过吸附解析的方法得到脂肪球膜蛋白。结果表明,732型阳离子交换树脂和大孔弱碱性阴离子交换树脂(Cat#M0048)对脂肪球膜蛋白表现出较好的吸附效果,其中腺嘌呤氧化还原酶蛋白(Xanthine dehydrogenase/oxidase,XO/XDH)和乳凝集素(Periodic acid Schiff 6/7,PAS6/7)2种蛋白吸附率可达到95%以上。对2种树脂进一步研究发现,732型阳离子树脂在中性或碱性条件下对脂肪球膜蛋白并没有吸附能力;大孔弱碱性阴离子交换树脂(Cat#M0048)在碱性条件下对脂肪球膜蛋白具有一定的吸附能力,并且其吸附率随pH增大而升高。     

活性炭的制备及吸附甲基橙的研究

制备了玉米秸秆基活性炭,探讨了活性炭与超声技术对模拟甲基橙工业废水中甲基橙吸附效果,在实验条件下,考察了活性炭用量、体系温度、超声吸附时间、超声功率等因素对吸附效果的影响。结果表明:对于50mg/L的甲基橙溶液,体系温度为50℃左右,活性炭加入量约为200g(活性炭)/g(甲基橙),超声功率为80W下超声吸附20min时吸附率较高。     

乳铁蛋白对三唑酮诱导骨髓间充质干细胞损伤的修复作用

为研究乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)对三唑酮所致的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)损伤的影响,通过构建三唑酮诱导BMSCs损伤模型,采用CCK-8法检测Lf对BMSCs损伤的修复作用;酶联免疫吸附测定法分析成骨过程中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达情况;同时使用茜素红染色进行成骨分化能力检测,使用油红O染色进行成脂分化能力的检测;反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析成骨和成脂基因表达变化情况。结果表明,与空白对照组相比,不同质量浓度的Lf均可显著促进细胞增殖(P0.05)。与损伤模型组相比,Lf能提高损伤BMSCs的细胞存活率,增加细胞ALP、OCN质量浓度,增加细胞矿化结节的生成,减少脂滴的生成,上调成骨分化相关基因的相对表达,下调成脂分化相关基因的相对表达。Lf对三唑酮所致损伤的BMSCs有促进增殖作用,能够使BMSCs向成骨方向进行分化,更好地促进新骨形成,从而修复损伤。     

沙棘籽生物炭对苯酚的吸附特性研究

为促进沙棘籽的资源化利用,以沙棘籽为原材料,采用慢速热解技术分别于300、400、500℃条件下制备生物炭吸附剂(BC300、BC400、BC500),研究其去除水中苯酚的效果。吸附实验结果表明,生物炭的制备温度明显影响其对苯酚的吸附效果,3种温度制备的生物炭对苯酚的吸附能力表现为BC500BC400BC300。苯酚的初始浓度、吸附温度、时间等因素均影响吸附效果。45℃下苯酚初始浓度为20mg/L时,BC500对苯酚的去除率最高,达92.1%,生物炭对苯酚的等温吸附线符合Langmuir模式和Freundlich模式。探明了沙棘籽制备生物炭吸附剂及其去除苯酚的最适条件,可为沙棘籽应用于苯酚等有机污染物的去除提供理论依据。     

沙棘籽渣生物炭对尼泊金乙酯的吸附特性研究

目的研究沙棘籽渣生物炭对尼泊金乙酯的吸附特性。方法以沙棘籽渣为材料,采用慢速热解技术于300、400、500℃条件下制备生物炭吸附剂(BC300、BC400、BC500),研究热解温度、尼泊金乙酯初始浓度、吸附温度和吸附时间对吸附效率的影响。结果生物炭的制备温度显著影响其对尼泊金乙酯的吸附效果,3种温度制备的生物炭对尼泊金乙酯的吸附能力表现为BC500BC400BC300。此外,尼泊金乙酯的初始浓度、吸附温度和时间等因素均能影响吸附效果。35℃下尼泊金乙酯初始浓度为20 mg/L时,BC500对尼泊金乙酯的去除率最高,达84.46%,生物炭对尼泊金乙酯的等温吸附线符合Langmuir模式和Freundlich模式。结论探明了沙棘籽渣制备生物炭吸附剂去除尼泊金乙酯的最适条件,为沙棘籽渣应用于尼泊金乙酯等有机污染物的去除提供了理论依据。     

一种快速检测婴幼儿配方奶粉中阪崎克罗诺杆菌的方法

对磁珠吸附过程中三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸(Tris-EDTA,TE)缓冲液的p H值、蛋白酶K添加量、吸附时间和吸附温度等参数进行了优化。在优化条件下氨基磁珠可以非特异性地直接吸附婴幼儿配方奶粉中存在的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA),并结合聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术特异性扩增阪崎克罗诺杆菌DNA,检测灵敏度达到102CFU/mL。此外,经特异性试验验证,此方法用于检测常见食源性致病菌及克罗诺菌属中的非阪崎克罗诺杆菌均无交叉反应。同时,经干扰性试验验证,体系中存在的其他干扰菌株DNA并不会影响阪崎克罗诺杆菌的检测。该方法避免了抗体的使用,解决了抗体制备难度大、成本高等问题,同时克服了传统方法 3～5 d前增菌时间过长的弊端,实现了对婴幼儿配方奶粉中阪崎克罗诺杆菌的快速检测。     

球形纤维素吸附剂对亚甲基蓝的吸附热力学研究

以离子液体(BMIMCl)为反应介质,选用丙烯酸为单体,在均相条件下对纤维素进行接枝改性,后经反相悬浮技术制得球形纤维素吸附剂。通过静态吸附方法研究该吸附剂对阳离子型染料亚甲基蓝的吸附性能,探讨了影响吸附效果的各种因素(溶液pH值,染料初始浓度,吸附时间及温度),并研究了吸附的热力学特征以及吸附剂的再生性能。结果表明,在一定范围内提高pH值,增加染料初始浓度以及延长吸附时间都可以提高吸附效果;吸附剂对亚甲基蓝的吸附符合Langmuir吸附等温式;吸附过程是自发的放热过程;该球形纤维素对亚甲基蓝的吸附具有可循环利用性,再生性能良好。     

阴离子交换树脂分离酪蛋白糖巨肽工艺条件优化

采用离子交换树脂从乳清粉中分离酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP),筛选适于分离CGMP的离子交换树脂并考察静态吸附过程中吸附pH值、吸附时间、缓冲液浓度等因素对CGMP分离效果的影响。乳清粉溶液在pH5.1时离心除杂后与201×4树脂混合,吸附条件为吸附pH3.9、吸附时间1h、缓冲液浓度0.02mol/L、洗脱液为0.5mol/L pH4.0的氯化钠溶液、洗脱时间4h;100g乳清粉利用此工艺条件可得1.45g唾液酸含量10.4%(以蛋白质计)的CGMP。该工艺方法分离过程简单、纯化效果好、唾液酸含量高,适用于工业化生产。     

大孔树脂分离啤酒废酵母中谷胱甘肽的研究

对大孔树脂D001分离啤酒废酵母中的还原型谷胱甘肽进行了研究.其最佳试验条件为:pH 4.5的0.02 mol/L磷酸缓冲液平衡,pH 7.5的0.02 mol/L磷酸缓冲液洗脱,洗脱流速为2.0 mL/min.在最佳分离条件下,大孔树脂D001分离GSH的平均收得率为20.03%,产品中GSH的含量为28.47%,产品颜色为白色.     

SD3 离子交换树脂分离提取ATP 的研究

通过对SD3 离子交换树脂对ATP 动态吸附、洗杂和洗脱条件的考察,确定最适吸附条件为：样品溶液H 2.0,浓度8.25g/L,离子交换柱的高径比为10(装柱湿树脂80g),流速1.0ml/min;最优洗杂液为pH1.5 HC1＋ 0.05mol/L NaCl 的溶液;ATP 的最优洗脱液为pH12.0 NaOH+0.1mol/L NaCl 溶液,优洗脱速度为0.5ml/min。     

膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素

采用膜分离与大孔树脂联用技术纯化茶皂素。粗茶皂素经陶瓷膜和360Da纳滤膜初步分离浓缩,得率为62.1%,纯度为79%;根据静态和动态吸附筛选试验,选择大孔树脂AmberliteXAD7HP对茶皂素进一步纯化,通过单因素试验,确定最佳工艺参数为:上样流速0.5 mL/min、上样液浓度30mg/mL;以10%,40%,70%的乙醇溶液进行梯度洗脱,洗脱剂流速1mL/min,洗脱液体积为3BV,该条件下纯化,茶皂素最终得率为55.3%,纯度可达95%。该试验表明膜分离与大孔树脂联用技术可得到高纯度的茶皂素,是一种可工业化推广的方法。     

DEAE-琼脂凝胶微球的制备及在R-PE和C-PC提取分离中的应用

为了降低天然大分子功能蛋白的分离纯化成本,以琼脂为原料自制弱阴离子交换层析介质DEAE-琼脂凝胶微球。将DEAE-琼脂凝胶微球应用于坛紫菜R-藻红蛋白（R-PE）和螺旋藻C-藻蓝蛋白（C-PC）的提取分离,最佳洗脱条件为:层析柱规格h=35.0 cm,φ=1.0 cm,V=27.5 m L;流速v=0.33 m L/min;洗脱缓冲液为0.01 mol/L磷酸盐溶液（含有0.05⁰.5 mol/L Na Cl溶液）;0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（含0.1 mol/L Na Cl）洗脱出纯度为5.0的坛紫菜R-PE;0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（含0.2 mol/L Na Cl）洗脱出纯度为4.4的螺旋藻C-PC。自制层析介质成本低廉、耗能少、可大量制备、分离效果好,可用于坛紫菜R-PE、螺旋藻C-PC的产业化制备。      

阴离子交换层析法分离纯化γ-PGA

采用阴离子交换层析法,对γ-PGA进行分离纯化。通过阴离子树脂的静态吸附、动态实验,得出了上样的最佳pH8.0,上样量27.3mg/g树脂,洗脱液为0.7mol/L NaCl溶液,洗脱流速1.0mL/min,洗脱温度20℃。最终γ-PGA的纯度由86.7%提高到96.2%。     

树脂柱层析法分离纯化籽瓜中L-瓜氨酸

目的:研究适合分离纯化籽瓜L-瓜氨酸的树脂柱层析方法。方法:选择001×7、D001和D061三种阳离子交换树脂进行L-瓜氨酸静态吸附解析和动态平衡实验,优化分离提纯籽瓜L-瓜氨酸工艺。通过考察温度、p H、浓度、吸附穿透曲线及洗脱液浓度、流速因素,进一步研究001×7树脂层析柱分离纯化籽瓜L-瓜氨酸的条件。测定三种不同极性大孔吸附树脂和活性炭对籽瓜提取液的脱色率和吸附率,优化脱色工艺。结果:分离提纯籽瓜L-瓜氨酸工艺用001×7型阳离子交换树脂较适合,最佳工艺条件:上柱温度为40⁵0℃,上柱液的p H为3,洗脱液选择0.5 mol/L的氨水,洗脱流速为0.5 m L/min,洗脱液的用量为6倍树脂体积。脱色工艺使用HZ-801大孔吸附树脂较合适,脱色精制后可得到纯度为96.6%的L-瓜氨酸产品。结论:001×7型阳离子交换树脂层析柱和HZ-801大孔吸附树脂相结合,可以有效分离纯化籽瓜中的L-瓜氨酸,对充分利用籽瓜资源和改变我国L-瓜氨酸成本较高现状具有十分重要的意义。      

大孔树脂富集酸枣仁总黄酮工艺及其体外抗氧化性研究

研究大孔吸附树脂富集纯化酸枣仁总黄酮的最佳条件,并进行了总黄酮体外抗氧化能力的测定。利用静态吸附和动态吸附实验对5种不同极性的大孔吸附树脂进行筛选,并对上样液质量浓度、上样量、洗脱剂体积分数、洗脱剂体积以及洗脱剂流速等条件分别进行考察。采用DPPH自由基和ABTS+自由基的清除率以及铁氰化钾的还原能力作为指标考察纯化后总黄酮的体外抗氧化能力。结果表明AB-8大孔吸附树脂为纯化酸枣仁总黄酮的最佳树脂,纯化工艺为上样液质量浓度1.99 mg/m L,上样量50 m L,洗脱剂体积分数50%乙醇,洗脱剂体积50 m L,洗脱剂流速1 m L/min。抗氧化结果显示总黄酮对DPPH和ABTS+自由基具有明显的清除能力（IC50值为0.70 mg/m L和0.15 mg/m L）,并对铁氰化钾表现出了较强的还原能力。      

大孔吸附树脂分离纯化茶叶籽饼粕中的茶皂素研究

目的对采用大孔吸附树脂法分离纯化茶叶籽饼粕中茶皂素的工艺进行优化,为进一步开发利用茶叶籽资源提供依据。方法以茶皂素吸附率与解吸率为指标,通过静态吸附与解吸实验筛选最优树脂。通过单因素实验、正交实验及验证性实验,优化最优树脂动态吸附与解吸茶皂素的工艺参数。结果D101树脂的静态吸附量与解吸率分别为142.974 mg/g和98.02%,为分离纯化料液中茶皂素的最优树脂;当主要考虑茶皂素得率时,其最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积6 BV、乙醇洗脱体积浓度80%、洗脱流速3 BV/h、洗脱剂体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素得率为74.25%,纯度为84.30%;当主要考虑茶皂素纯度时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速4 BV/h、上样体积7 BV、乙醇洗脱体积浓度70%、洗脱流速3 BV/h、洗脱体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素纯度为97.7%,得率为72.04%。结论 D101大孔吸附树脂是一种可应用于茶叶籽饼粕中茶皂素分离纯化的较好树脂。     

巴戟天多糖亲和柱层析纯化的研究

通过静态吸附的方法探讨了巴戟天粗多糖在Con A Sephorose4B亲和填料上静态吸附和脱附情况。结果表明,吸附过程中的pH值和离子强度对平衡吸附量有明显影响,得到的最佳吸附条件是pH7.5,NaCl浓度0.1mol/L;确定的最佳脱附条件为是pH6.5,α-D-甲基葡萄糖苷浓度0.02mol/L。由Langmuir方程对实验数据进行拟合,得到填料的最大吸附量qm为9.58mg/g,表观解离常数Kd为3.43mg/g,巴戟天粗多糖在填料上的吸附速率K为0.144mg/h。在最佳的吸附和洗脱条件下,巴戟天粗多糖被分为MOP-A1和MOP-A2两个组分。