曹州木瓜过氧化物酶酶学特性研究

以曹州木瓜果实为试验材料,采用分光光度法对曹州木瓜过氧化物酶(POD)的酶学特性进行研究,为控制木瓜加工贮藏过程中的酶促褐变提供理论依据。试验结果表明:曹州木瓜POD的最适pH 5.8,最适反应温度45℃,90℃处理75 s或者100℃处理30 s后POD活性完全丧失。其过氧化物酶催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数Km=18.17 mmol/L,Vmax=1 666.67 U。抑制剂对POD的抑制作用从大到小依次为VC亚硫酸氢钠柠檬酸EDTA-2Na。Na+,K+,Mg2+,Mn2+和Ca2+对POD具有激活作用,Zn2+,Ba2+和Cu2+在低浓度时对POD有激活作用,高浓度时有抑制作用。     

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

芋头多酚氧化酶的酶学性质研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究了芋头多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。结果表明:芋头PPO的最适温度pH为7.5,最适温度为40℃;90℃高温处理2 min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应符合米氏动力学方程,相应动力学参数Km=0.0221mol/L,Vmax=46.08 U/min;4种抑制剂对PPO活性均有不同程度的抑制作用,抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸;金属离子Sn2+对PPO活性具有较强的抑制作用,A13+、Cu2+、Mg2+、Ca2+和Co2+对PPO活性有一定的抑制作用,Zn2+对PPO活性具有激活作用,Fe3+、Fe2+和Mn2+对PPO活性几乎没有影响。     

槟榔芋多酚氧化酶的酶学特性研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究p H、温度、底物浓度对槟榔芋多酚氧化酶(PPO)活性的影响,建立相应的酶促褐变反应动力学方程,并探讨抗坏血酸、L-半胱氨酸、甘氨酸、尿素、Cu Cl2对PPO活性的影响。研究结果表明,槟榔芋PPO的最适p H为6.5;最适温度为35℃;在20℃和30℃时在60 min之内槟榔芋PPO保持较稳定的活性,30℃~60℃处理破坏PPO部分活性,70℃加热10 min PPO活性接近零;在最适作用条件下,槟榔芋PPO的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,且相应动力学参数为Km=54.05 mmol·L-1,Vmax=588.24 U·min-1。抗坏血酸、L-半胱氨酸可抑制槟榔芋PPO活性,当它们浓度分别为2.5 mmol/L和6 mmol/L时,可有效抑制槟榔芋PPO活性,而甘氨酸对槟榔芋PPO活性无抑制作用;尿素、Cu Cl2可增强槟榔芋PPO活性,当它们浓度分别为150 mmol/L和1 mmol/L时,可明显提高槟榔芋PPO活性。     

杏鲍菇多酚氧化酶的酶学特性研究

以杏鲍菇中多酚氧化酶(PPO)为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究.结果表明,杏鲍菇PPO的最适底物为邻苯二酚;最适pH为6.0;最适温度为35℃;90℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.0207mol/L,Vmax=41.32U/min;7种金属离子对PPO酶活性的影响效果各不相同,Al3+、Mn2+对PPO酶活性有一定的抑制作用,Mg2+、Zn2+、Ca2+和Cu2+对PPO酶活性的抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活性有激活作用;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸＞亚硫酸氢钠＞L-半胱氨酸＞柠檬酸.     

抑制剂对杏多酚氧化酶抑制作用

使用冷丙酮分别从黄金杏和晚红杏中提取多酚氧化酶(PPO),以邻苯二酚为底物,利用分光光度计法研究几种抑制剂在不同浓度下对2种杏PPO的抑制作用及酶促反应动力学曲线。结果表明, 2种杏最适波长均为410nm。以邻苯二酚为底物, 2种杏多酚氧化酶的酶促褐变反应均符合米氏方程,晚红杏、黄金杏PPO的动力学参数米氏常数分别为0.042 mol/L和0.114 mol/L。V_(max)分别为100 U/min和167 U/min。抑制剂对2种杏多酚氧化酶的抑制作用存在一定差异。对黄金杏PPO抑制作用:抗坏血酸(40 mmol/L)柠檬酸(10 mmol/L)L-半胱氨酸(10mmol/L)亚硫酸氢钠(10 mmol/L)。对晚红杏PPO抑制作用:亚硫酸氢钠(10 mmol/L)柠檬酸(10 mmol/L)抗坏血酸(40 mmol/L)L-半胱氨酸(10 mmol/L), EDTA-2Na对2种杏PPO抑制作用均较差。     

银杏外种皮多酚氧化酶的研究

采用不同条件抽提银杏外种皮多酚氧化酶(简称PPO),比较抽提条件对PPO活性的影响;利用乙醇分级法对PPO进行初步分离纯化,比活力从49.8u/mg提高到292u/mg;研究pH、温度、金属离子对乙醇分级提纯后的PPO的影响,发现其最适温度为30℃,最适pH=7.6,Mg2+对酶有明显的激活作用。而Na+、K+、Fe2+则对酶有抑制作用。     

淫羊藿苷糖苷酶的纯化及其酶学性质的研究

对由菌株Absidiasp.E9r在发酵培养中产生的淫羊藿苷糖苷酶进行了分离纯化并对其酶性质进行了研究。结果表明,该酶的分子质量约为65ku,酶反应的最适温度和pH值分别为50℃和4.0,在20～60℃,pH3.0～6.0条件下稳定性较好;金属离子Na+、K+、Mg2+、Zn2+、Ca2+对酶反应的影响不大,而Fe3+、Cu2+对其有很明显的抑制作用;酶反应动力学研究,Vmax=3.012mmol/(L.h),km=58.59mmol/L。     

莴笋多酚氧化酶、过氧化物酶的特性及抑制作用研究

采用分光光度法测定莴笋多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)的活性,研究酶的稳定性、温度、p H、底物浓度及几种抑制剂对其活性的影响,建立相应酶促动力学方程,利用正交实验探讨最佳抑制条件。结果表明,PPO和POD最适温度分别为50℃和40℃,最适p H分别为6.0和6.5,随温度不断升高,PPO和POD活性逐渐下降。动力学方程分别为V=342.566[S]/(5.9×10-3+[S])和V=3403.008[S]/(6.88×10-4+[S])。对PPO抑制强弱为:VCL-CysNa HSO3柠檬酸EDTA苯甲酸琥珀酸,对POD抑制强弱为:EDTAVCL-Cys柠檬酸Na HSO3琥珀酸苯甲酸。正交实验表明,对PPO最佳抑制条件为:Na HSO39mmol/L、L-Cys 5mmol/L及VC5mmol/L。对POD最佳抑制条件为:VC0.2mmol/L、EDTA 0.2mmol/L及L-Cys 1.4mmol/L。     

67.8ku丝瓜多酚氧化酶酶学性质的研究

目的:为对67.8ku丝瓜多酚氧化酶(PPO)的酶学性质进行研究。方法:从丝瓜中提取、纯化得67.8ku的丝瓜多酚氧化酶,并分别从温度、pH、作用底物、金属离子、抑制剂及表面活性剂对丝瓜PPO活性的影响等方面对丝瓜PPO的酶学性质进行研究。结果:结果表明,pH为6.0时相对酶活最高,pH3.0~8.0酶活较稳定;其最适作用温度为30℃,对热稳定性较强,70℃保温120min后还具有40%的相对酶活;Co2+、K+、Ca2+等对酶有较强的激活作用,而Na+、Mg2+、Cu2+对酶有明显的抑制作用;抗坏血酸为该酶最好的抑制剂,其次为半胱氨酸、β-巯基乙醇、Na2S2O3、Na2SO3等;十二烷基肌氨酸钠(Laurouyl Sarcosine)、十二烷基硫酸钠(SDS)等对酶有一定的激活作用,而十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、吐温-20(Tween-20)对酶有抑制作用;与l-多巴(l-dopa)的结合力最强,以其为底物时该酶的Km为1.32mmol/L,Vmax为0.22OD475/min。结论:该研究确定了丝瓜多酚氧化酶的最适作用条件及其影响因素,可为控制丝瓜在贮藏、加工过程中的酶促褐变提供理论依据。