外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子凝胶对烧烫伤动物的疗效

目的观察外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)凝胶对实验性动物烧烫伤的治疗作用。方法采用电烙铁方法建立实验性大鼠烫伤创面,烫伤部位分别采用外用rhGM-CSF凝胶基质、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)喷雾剂、外用rhGM-CSF凝胶高(20μg/cm2)、低(5μg/cm2)剂量进行治疗,观察外用rhGM-CSF凝胶对烫伤创面的治疗作用,包括烫伤皮肤的病理学检查、烫伤创面的愈合情况、烫伤创面的感染情况及烫伤动物的死亡情况。采用凝固气油烧灼建立实验性小鼠Ⅲ°烧伤模型,烧伤部位分别采用rhGM-CSF凝胶基质、bFGF喷雾剂和外用rhGM-CSF凝胶进行治疗,观察小鼠死亡数量、感染情况及创面愈合后生毛时间。结果与凝胶基质对照组比较,外用rhGM-CSF凝胶高、低剂量治疗大鼠烫伤后的皮肤愈合时间明显缩短。病理检查结果显示,外用rhGM-CSF凝胶高、低剂量治疗大鼠烫伤创面的愈合程度明显优于凝胶基质对照组。外用rhGM-CSF凝胶对小鼠Ⅲ°烧伤具有保护和抗感染作用。烫伤创面愈合后生毛时间明显短于凝胶基质对照组。结论外用rhGM-CSF凝胶对实验性动物烧烫伤具有较好的治疗效果。     

护肤生物制品辅料中重组人表皮细胞生长因子抑制剂的筛选

目的筛选护肤生物制品辅料中重组人表皮细胞生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)抑制剂。方法以BALB/3T3细胞构建模型,采用MTT法对配制好的rhEGF及单组分辅料样品进行生物活性检测,筛选出对rhEGF活性有影响的辅料。通过建立的动物模型,观察rhEGF对皮肤切割伤的促愈合作用,进一步验证筛选出的辅料对rhEGF生物活性的影响。结果经细胞模型筛选的25种辅料中,大分子透明质酸钠和黄原胶显著抑制rh EGF活性。动物模型进一步验证rhEGF具有促兔表皮切割伤愈合的作用,平均愈合时间较生理盐水组提前1～3 d,并呈现良好的剂量效应,随剂量升高,促愈合作用进一步增强,剂量为100μg/m L时,促创面愈合效果最佳。0. 4%黄原胶组和10μg/mL rhEGF+0. 4%黄原胶联合给药组兔创面愈合时间均较生理盐水组晚1 d,黄原胶抑制rhEGF促皮肤切割伤愈合的作用,与细胞模型结果一致。0. 4%透明质酸钠组和10μg/m L rhEGF+0. 4%透明质酸钠联合给药组的兔创面愈合时间均较生理盐水组提前2 d,并且与10μg/mL rhEGF组愈合时间相同,与细胞模型结果不一致。结论黄原胶在细胞和动物模型中均可抑制rhEGF活性,为rhEGF在护肤生物制品中的应用配方提供了理论依据。     

人用重组禽流感血凝素疫苗接种大鼠的安全性及免疫原性

目的评价家蚕生物反应器生产的重组禽流感血凝素疫苗的安全性和免疫原性。方法将SD大鼠随机分为5组,分别经皮下注射9.4、1.88和0.375mg/kg剂量的重组禽流感血凝素疫苗(含氢氧化铝佐剂)、A(lOH)3和生理盐水,每10d注射1次,连续注射3次,分别于第1次给药后第2、22和42天进行血液学、血液生化学、病理学和免疫原性检测。结果3个剂量组疫苗第1次给药后第42天,检测抗体滴度(P/N)在8～11之间,CD4+、CD8+T淋巴细胞含量及IFNγ和IL-2的含量与两对照组相比,未见明显升高;连续3次给药后,大鼠的血液学和生化学指标均无明显改变;给药期间注射部位皮下出现肉芽肿样结节,经20d恢复后有所改善;9.4和1.88mg/kg剂量组动物出现可逆性的脾肿大症状;整个实验期间,动物未出现任何其他明显不良反应。结论重组禽流感血凝素疫苗对大鼠具有良好的安全性,但免疫原性较低。     

重组人生长激素给药系统的研究进展

重组人生长激素（rhGH）是治疗各种生长激素缺乏症及并发症的首选药物,但临床上需长期频繁注射给药,实现rhGH长效化和改变给药途径可显著提高患者依从性,具有重要的研究价值。本文针对近年来rhGH长效化制剂和非注射给药途径的类型、有效性及开发现状进行了综述,主要介绍了利用化学修饰、构建融合蛋白、构建缓释微球等rhGH长效化方法以及经皮给药、肺部给药、鼻腔黏膜给药等rhGH非注射给药途径的研究现状和最新进展,分析了各类rhGH给药系统在应用方面的潜在问题,以期使读者对该领域的研究状况有更全面、更清楚的了解;并指出了该研究领域未来的发展方向,提出了将rhGH长效化与非注射给药途径合理结合应是将来实现rhGH高效递送的重要研究方向,以期为进一步开发安全有效的rhGH新型给药系统提供参考。     

聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性

目的　研究聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性。方法　通过分子筛高效液相 (SizeexclusionHPLC)、毛细管等电聚焦 (CIEF)、圆二色谱 (CD)以及荧光光谱等方法检测单聚PEG- GH的纯度、等电点、二级结构以及分子构象 ;采用妊娠兔肝细胞放射受体分析法 (RRA)检测单聚PEG GH的体外受体亲和力 ,采用未成年去垂体大鼠体重增加法检测体内生物活性。结果　分子筛高效液相图谱上仅出现一个峰 ,表明样品纯度很高 ,等电点范围为 5 .1～ 5 .2 ,与未修饰的rhGH的等电点相一致 ;CD谱与荧光光谱均表明单个mPEG ALD的修饰对rhGH的二级结构以及分子构象没有明显影响 ;与未修饰的rhGH相比 ,单聚PEG GH体外受体亲和力明显降低 ;但体内作用时间更长 ,且更加有效。结论　此结果为进一步研究和开发长效重组人生长激素提供了理论依据。     

微波联合重组ɑ-2b人白细胞干扰素凝胶治疗尖锐湿疣疗效观察

目的探讨微波联合重组ɑ-2b人白细胞干扰素凝胶治疗尖锐湿疣疗效。方法对198例患者分组治疗,治疗组局部外用重组ɑ-2b人白细胞干扰素凝胶,对照组则不使用任何药物。结果治疗组中痊愈86例(86%),复发14例(14%);对照组治愈67例(68.37%),复发31例(31.63%)。两组复发率比较χ2=7.88,P<0.005,有显著差异性。结论微波联合重组ɑ-2b人白细胞干扰素凝胶外用治疗尖锐湿疣,治疗组的复发率明显低于对照组。     

注射用重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白对大鼠生育力及早期胚胎发育的毒性作用

目的观察注射用重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白(RCT-18)对大鼠生育力及早期胚胎发育的毒性作用。方法将SD大鼠随机分为4组,分别经皮下注射RCT-18 129、37、11 mg/(kg.d)和0.9%NaCl注射液,每2 d给药1次。雄鼠连续给药5周、雌鼠连续给药2周后,按雌雄1∶1的比例合笼交配,合笼期为2周,计算交配率。雄鼠继续给药至交配成功,雌鼠继续给药至妊娠第6天。实验过程中观察动物的一般反应、体重及摄食量变化。确定雌鼠受精后处死雄鼠,解剖检查睾丸和附睾等生殖器官。于妊娠第15天解剖孕鼠,综合评价妊娠及胚胎形成和早期发育等情况。结果 RCT-18高、中、低剂量组雌性和雄性大鼠均未出现明显的母体毒性反应。各组大鼠各脏器均未见肉眼可见的异常。各剂量RCT-18对大鼠的交配率、妊娠率、生殖系统脏器重量和系数以及早期胚胎发育均无明显影响。结论RCT-18对SD大鼠的生育力及早期胚胎发育无明显毒性作用。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效

目的 观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对烧伤创面愈合的治疗作用。方法 选择浅Ⅱ度和深Ⅱ度烧伤病例共920例,分别用bFGF治疗其烧伤创面,用药剂量为144U/cm2观察伤后8d（浅Ⅱ度）和15d（深Ⅱ度）创面愈合率,以及创面完全愈合时间。结集8d愈合率总体治疗组为77.6％±24.4％,对照组为51.7％±26.4％;完全愈合时间总体治疗组为9.6±2.4d,对照组为12.6±2.9d。15d愈合率总体治疗组为75.2％±26.3％,对照组为53.3％±25.4％;完全愈合时间总体治疗组为17.5 ±4.5d,对照组为21.9±5.5d。结论 bFGF具有明显的促进Ⅱ度烧伤创面愈合的作用。     

重组人干扰素α2b凝胶联合阿昔洛韦对带状疱疹的疗效

目的观察重组人干扰素α2b凝胶联合阿昔洛韦治疗带状疱疹的疗效。方法将122名带状疱疹病人随机分成2组:联合组62名,将重组人干扰素α2b凝胶直接涂在患处,每日4次,同时口服阿昔洛韦片,0.2g/次,每日5次,疗程10d;单一组60名,只使用重组人干扰素α2b凝胶,用法、疗程同上。观察重组人干扰素α2b凝胶单独使用及联合阿昔洛韦对带状疱疹的疗效。结果联合组和单一组的总有效率分别为88.71%和73.33%,两组间比较,差异有显著意义;联合组平均起效时间(止疱时间、水疱干涸时间、疼痛缓解时间和痊愈时间)均较单一组短,差异有极显著意义;联合组用药后不良反应轻微。结论重组人干扰素α2b凝胶联合阿昔洛韦对带状疱疹有明显的疗效。     

重组碱性成纤维细胞生长因子凝胶剂的制备

目的制备重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)凝胶剂。方法以卡波姆940、甘油、1,2丙二醇为基质,加入复方保护剂(肝素钠、人血白蛋白、甘露醇和HP-β-CD),制成bFGF凝胶剂,观察25和4℃保存的稳定性,并进行家兔局部刺激试验、急性毒性试验、促烧伤创面愈合试验。结果bFGF凝胶剂在25℃保存18个月、4℃保存24个月,效价维持在原效价的80%以上;局部用药未见皮肤刺激反应和急性毒性反应;促家兔烧伤创面愈合的效果明显优于水溶液剂。结论制备的bFGF凝胶剂安全有效,具有缓释作用,稳定性良好,具有广阔的临床应用前景。     

rhGM-CSF喷雾剂的制备及其药效学分析

目的制备重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)喷雾剂,并分析其药效性能。方法以复合稳定剂维持主药生物稳定性,加入吸收促进剂,以5种配方制备rhGM-CSF液体喷雾剂,并对其进行主要质量指标、稳定性检测及动物药效学试验。结果以优选的制剂配方配制的rhGM-CSF喷雾剂各项主要质量指标均合格,且稳定性良好。动物药效学试验结果显示,此喷雾剂与抗病毒药物联合使用,抵抗流感病毒感染的效果更好,且具有抗单纯疱疹病毒感染和抗白色念珠菌感染的作用。结论所制备的rhGM-CSF喷雾剂药效良好,具有临床应用价值。     

重组人角质细胞生长因子异构体抗实验性肝纤维化的作用

目的观察重组人角质细胞生长因子(rhKGF)异构体(K102)对实验性肝纤维化的预防和治疗作用。方法取90只Wistar大鼠,随机分为K102大剂量组(2.0mg/kg),K102小剂量组(0.5mg/kg)和模型对照组,用50%CCl4与精制花生油按1:1(v/v)比例混合,灌服大鼠,每周2次,同时K102大、小剂量组皮下注射相应剂量的K102,模型对照组皮下注射等量溶媒,分别连续用药6周和8周。另取36只大鼠,随机分为3组,复制肝纤维化模型后,再给予相应药物6周,同时设正常大鼠对照组(12只)。实验结束后处死各组动物,并采集血液和肝脏组织,检测肝功、肝组织羟脯氨酸含量,并进行肝脏病理和胶原特殊染色观察。结果 K102能明显改善大鼠的肝功,降低肝组织羟脯氨酸含量,与模型对照组比较,差异有统计学意义。肝脏病理观察显示,K102治疗组较模型对照组病变轻微;胶原特殊染色显示,K102治疗组中仅见少量胶原纤维。结论 K102对实验性肝纤维化有一定的预防和治疗作用,为临床研究提供了依据。     

盐酸氨基葡萄糖及其与甲氨蝶呤联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用

目的探讨盐酸氨基葡萄糖及其与甲氨蝶呤联用对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用。方法将佐剂性关节炎大鼠分为4组:模型对照组(AA组)、盐酸氨基葡萄糖组(GH组)、甲氨蝶呤组(MTX组)和联合用药组(GHM组),另设1组空白对照。自造模前1d至造模后22d,正常对照组和AA组每天给予蒸馏水灌胃,其他组以相应的药物灌胃。造模前及造模后不同时间,测量各组大鼠左、右后足体积,造模后22d,ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果与AA组比较,在继发反应期,GH、MTX及GHM各组的左、右后足体积和血清中TNF-α含量均有所下降,且差异均有统计学意义,除血清中TNF-α含量GHM组显著低于MTX组外,其他各项指标GHM组与GH组和MTX组比较,差异均无统计学意义。结论盐酸氨基葡萄糖可缓解大鼠佐剂性关节炎症状,具有抗炎作用和治疗类风湿性关节炎的潜力,其与MTX联用,有望降低MTX的用量。     

重组分泌型人生长激素的纯化

rh GH工程菌 W310 0发酵培养后 ,经低渗裂解、阴离子交换柱层析、疏水层析、分子筛层析 ,得到纯化的人生长激素 ,纯度为 97%以上 ,比活大于 2 .5 IU / mg     

重组人酸性成纤维细胞生长因子滴眼液的制备及其稳定性

目的制备重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)滴眼液,并进行稳定性检测。方法在rhaFGF中添加复方保护剂,并以透明质酸钠作为保湿剂,制备rhaFGF滴眼液,对其进行鉴定和体外药效学检测,并进行稳定性试验。结果制备的3批滴眼液各项质量指标均合格,可促进碱烧伤家兔角膜细胞和鸡胚绒毛膜血管增殖。在4℃保存12个月,-20℃保存18个月,(25±2)℃保存6个月,滴眼液各项质量指标与0月基本一致。结论制备的rhaFGF滴眼液稳定性良好,可促进损伤角膜细胞修复。     

应用RP-HPLC分析基因工程人表皮生长因子肽谱

用DTT还原rhEGF中的二硫键，并用碘乙酰胺封闭巯基，用TPCK处理的胰蛋白酶消化rhEGF，经RP－HPLC分析，发现不同工程菌生产的rhEGF存在结构的细微差别。该法具有灵敏度高、重现性好等优点，适用于基因工程产品肽谱的常规检定。