Bisensors for amino acids

Two kinds of biosensors for amino acids (one with nonspecific enzyme as bioelement, the other with specific enzyme(s) as bioelement), including their principles, applications, recent researches and future trends were discussed in detail. 61 references were given. A part of work for gaining Ph. D in chemical and biochemical application at FPMs (Mons, Belgique) Synopsis of the first author Xia Jinlan, Male, born in 1963, now at Facult’e Polytechnique de Mons, Belgique     

介孔分子筛SBA-15中胰蛋白酶组装及催化活性研究

在酸性条件下以正硅酸乙酯（TEOS）为硅源、非离子表面活性剂Pluronic P123为模板剂合成了介孔分子筛SBA-15,将其作为载体,对胰蛋白酶进行了固定化研究。其固定化后的装载量、温度、粘度等指标表明,固定化后的酶仍具有较高的酶活性,这为胰蛋白酶的实际应用提供了理论基础。     

生物酶水质稳定剂对炼油厂循环水的处理研究

采用了一种由微生物及酶制剂组成的生物酶水质稳定剂对循环冷却水进行处理。向4个相同的水样中投加不同体积分数的生物酶制剂,通过生物酶及微生物的作用,对水样的COD、氨氮进行测定。结果表明,投加生物酶制剂的水样与未投加生物酶制剂的水样相比,对COD、氨氮的降解起到了显著的效果,并且随着生物酶制剂体积分数的提高,COD、氨氮的降解效果越来越好,处理后的水质呈中性。当生物酶制剂的体积分数为水样体积的32‰时,COD的去除率高达89%,氨氮的去除率高达95%。     

纤维素酶综合整理纯棉牛仔布的应用研究

讨论了纤维素酶的浓度、处理温度、pH值、时间与纯棉牛仔布的失重率关系。探讨了各种酸根离子、金属离子、表面活性剂、氨基硅油等添加物对纤维素酶的影响。评定了经酶洗后再用氨基硅油综合整理的纯棉牛仔布的质量。试验证明,经酶洗和氨基硅油综合整理纯棉牛仔布的悬垂性、柔软性、耐磨性、弹性等指标明显优于只经酶洗整理的纯棉牛仔布。     

果皮酵素的制备及抗氧化活性研究

本文研究以新鲜果皮为原料,采用市面常用菌种来发酵制备果皮酵素。为进一步优化果皮酵素的发酵工艺参数,以超氧化物歧化酶（SOD）活力为测定指标,通过正交试验确定果皮酵素的最优发酵条件。结果表明,糖浓度为25%,发酵时间为36h,接种量为6%,发酵温度为30℃时发酵效果最好。该条件下果皮酵素的超氧化物歧化酶（SOD）活力平均值为46.84U/ml。该研究为果皮酵素的制备和抗氧化活性研究奠定了基础。     

蓝莓叶片原生质体的制备

文章以北陆蓝莓叶片为材料,研究酶液配比浓度、酶解时间、温度、pH值以及甘露醇浓度对蓝莓叶片原生质体制备的影响.结果显示,以2.0%纤维素酶+0.8%果胶酶为酶液组合,0.60 mol/L甘露醇为渗透压稳定剂,酶液pH值为5.8,温度(26±1)℃,黑暗条件下酶解8h,此后以1000r/min,离心6 min,所得蓝莓叶...     

生物工程在油脂开发和加工中的应用

本文论述了生物工程在油脂开发和加工中的应用:微生物油脂资源开发;酶法制油,酶法酯交换,酶法水解,酶法加氢,微生物脂肪酶用来改善乳脂风味;运用遗传工程技术改造微生物油脂和油料作物.     

亚麻织物的复合酶整理

以复合酶(果胶酶+纤维素酶)整理亚麻织物。通过正交实验确定其优化工艺条件为:温度45℃,pH值3.0,酶用量2.0 g/L,时间5 h。对比实验分析了枯草杆菌酶、纤维素酶和复合酶的整理效果及对织物性能的影响。     

酿酒酵母原生质体菌株的筛选

实验研究酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）原生质体的分离再生及再生菌株的构建，以蜗牛酶、纤维素酶、溶壁酶的去壁效果最好，而新生酶、几丁质酶的去壁效果较差。2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液浓度在0.1％－2％内原生质体释放量随酶解液的浓度升高而上升。酶解液pH值在5.0－7.0时原生质体的产量较高，渗透压稳定剂以柠檬酸－磷酸缓冲液（pH6.0，内含0.8mol/L山梨糖醇）处理原生质体释放量最高。而培养基对原生质体释放量的影响不明显。通过原生质体融合技术，获得融合子HG112，对HG112进行以葡萄糖为基质的发酵试验，结果显示该融合子乙醇含量达7.9％（体积比），比亲本QT提高49.7％，该技术可用于筛选优良菌株。     

酿酒酵母原生质体菌株的筛选

实验研究酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae) 原生质体的分离再生及再生菌株的构建 ,以蜗牛酶、纤维素酶、溶壁酶的去壁效果最好 ,而新生酶、几丁质酶的去壁效果较差。 2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液浓度在 0 .1 %～ 2 %内原生质体释放量随酶解液的浓度升高而上升。酶解液 pH值在 5 .0～ 7.0时原生质体的产量较高 ,渗透压稳定剂以柠檬酸 -磷酸缓冲液( pH6.0 ,内含 0 .8mol/L山梨糖醇 )处理原生质体释放量最高。而培养基对原生质体释放量的影响不明显。通过原生质体融合技术 ,获得融合子HG112 ,对HG112 进行以葡萄糖为基质的发酵试验 ,结果显示该融合子乙醇含量达 7.9% (体积比 ) ,比亲本QT提高 4 9.7% ,该技术可用于筛选优良菌株     

纤维素染色品在酶的处理中染料的移染以及与酶的关系

选择4种不同构造的酶，考察了酶在棉布上的吸收及其与靛蓝的污染量的关系，研究了酶、靛蓝、棉纤维的组合方式、酶的活性等因素对靛蓝污染量的影响。结果表明，酶在纤维表面的吸着呈多分子层，不含CBD的酶可以在纤维表面吸附，但不会导致靛蓝的污染；靛蓝对纤维污染通过酶的作用完成，活性酶造成的污染要大于非活性酶。     

酶法水解麦麸制取功能性低聚糖

以淀粉加工业剩余物-麦麸为原料，利用从里氏木霉制得复合酶中的半纤维素酶与纤维素酶，对物料中的半纤维素与纤维素成分进行控制酶水解，制取功能性低聚糖．酶解在接近常温和常压下进行，相对于常用的葡萄糖或淀粉原料，采用麦麸原料价格较低．由于低价原料和复合酶系的采用，简化了工序与设备，降低了成本，具有较好的开发应用前景．     

纤维素染色品在酶的处理中染料的移染以及与酶的关系

选择4种不同构造的酶,考察了酶在棉布上的吸收及其与靛蓝的污染量的关系,研究了酶、靛蓝、棉纤维的组合方式、酶的活性等因素对靛蓝污染量的影响。结果表明,酶在纤维表面的吸着呈多分子层,不含CBD的酶可以在纤维表面吸附,但不会导致靛蓝的污染;靛蓝对纤维污染通过酶的作用完成,活性酶造成的污染要大于非活性酶。     

As1.398中性蛋白酶在球形壳聚糖上的固定化研究

研究了以中空球形壳聚糖固定化Ａｓ１．３９８中性蛋白酶的方法,分成了戊二醛浓度,给酶量对固定化的影响,并对固定化酶的性质进行了讨论。实验结果显示,戊二醛质量浓度为４％,每克载体给酶量２５ｍｇ时,酶活力回收为６５．４％,固定化酶的热稳定性、ＰＨ稳定性及乙醇的稳定性均高于游离酶。     

海参肠道组织蛋白酶B粗酶提取条件的优化

为了获得具有较高活力的海参肠组织蛋白酶B,研究了其粗酶的提取条件。以Z-Arg-Arg-MCA为特异性底物,采用荧光光度法测定了酶活力。对提取海参肠组织蛋白酶B的浸提缓冲液、浸提时间和硫酸铵饱和度进行优化。结果表明,采用含5 mmol/L L-半胱氨酸、1 mmol/L EDTA、0.2%TritonX-100的50 mmol/L pH5.0的NaAc-HAc缓冲液浸提7 h后,选择80%饱和度的硫酸铵进行沉淀,能够有效地从海参肠道中提取组织蛋白酶B;同时研究了巯基保护剂对酶活力的影响。结果表明,巯基保护剂可提高酶的活力,这符合组织蛋白酶B结构中含有巯基的特性。在提取粗酶的过程中,添加巯基保护剂可有效地保证酶活力。     

海参肠道组织蛋白酶B粗酶提取条件的优化

为了获得具有较高活力的海参肠组织蛋白酶B,研究了其粗酶的提取条件。以Z-Arg-Arg-MCA为特异性底物,采用荧光光度法测定了酶活力。对提取海参肠组织蛋白酶B的浸提缓冲液、浸提时间和硫酸铵饱和度进行优化。结果表明,采用含5 mmol/L L-半胱氨酸、1 mmol/L EDTA、0.2%TritonX-100的50 mmol/L pH5.0的NaAc-HAc缓冲液浸提7 h后,选择80%饱和度的硫酸铵进行沉淀,能够有效地从海参肠道中提取组织蛋白酶B;同时研究了巯基保护剂对酶活力的影响。结果表明,巯基保护剂可提高酶的活力,这符合组织蛋白酶B结构中含有巯基的特性。在提取粗酶的过程中,添加巯基保护剂可有效地保证酶活力。     

产黄芪甲苷酶的酶反应条件

为提高黄芪甲苷产率,研究了微生物所产的黄芪甲苷糖苷酶将3个糖基黄芪皂苷转化为黄芪甲苷的酶性质。该酶的最佳反应条件为:反应温度为35℃,底物质量浓度为30 mg/mL,pH 5.0,酶反应时间28 h,K+、Na+对提纯酶有激活作用,Zn2+、Fe3+对酶有抑制作用,其中Fe3+抑制作用显著。在20~60℃p、H 4.0~7.0时,酶活力相对稳定。在最佳酶反应条件下,黄芪甲苷的产率为8.7%。     

碱性蛋白酶对鸡蛋清的酶解效果研究

试验以新鲜鸡蛋蛋清为原料,以水解度(DH)作为试验衡量指标,利用pH-stat法对底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解时间等试验条件进行考察,并采用正交试验综合分析得到碱性蛋白酶酶解鸡蛋清制备蛋清肽的最佳工艺条件为:底物浓度4%;酶解pH值9.5;酶解温度55℃;加酶量6%;酶解反应时间4 h,水解度可达23.74%。     

交联纤维素酶聚集体制备及其催化特性研究

用90%饱和度的硫酸铵盐析沉淀纤维素酶蛋白,将蛋白沉淀用3%戊二醛交联固定制得交联酶聚集体;研究交联酶聚集体的最适反应温度、最适反应pH、酸碱稳定性、热稳定性、批次稳定性。交联酶纤维素酶聚集体的最高比活性为559.2 U/g湿载体,最适反应温度为60℃,最适pH为9.0。交联酶聚集体的热稳定性和pH稳定性均优于游离酶,重复使用10批活性基本稳定。交联纤维素酶聚集体稳定性较好,具有一定的工业应用前景。     

海参肠中溶菌酶的分离纯化及其酶学性质

从海参肠中分离纯化溶菌酶,并测定其酶学性质及抑菌作用。在4℃下将海参肠打浆,用Tris-HCl缓冲液抽提。上清液经浊点萃取法(CPE)浓缩、阳离子交换柱(CM52纤维素)层析和SephadexG-75凝胶过滤层析分步纯化,得到电泳纯的溶菌酶。该酶的比活力达到3 026.1 U/mg,纯化倍数为18.7,活力回收为46.0%。对纯化的溶菌酶性质研究表明,该酶相对分子质量约为16 000,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH 6.5,在45℃以下和pH 4.0~8.0都有较好的稳定性,并与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性。与通常从蛋清中提取的溶菌酶相比较,从海参中分离纯化的溶菌酶具有广谱杀菌功能,即对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌细胞壁均有溶解作用。