加镧液体培养灰树花富集有机锌的研究

灰树花是药食两用真菌,富含多糖、氨基酸和多种矿物元素。利用灰树花将无机锌转化为有机锌,能为人体补锌提供一条新的有效途径。稀土元素对生物的生长代谢具有促进作用。为了研究镧和锌元素存在时灰树花液体培养富集锌的能力,设计了四因素四水平的正交试验方案。其因素和水平分别为:硝酸镧浓度50、100、150、200(mg/L培养基),1L培养基中碳源马铃薯/葡萄糖150/18、200/24、250/30、300/36(g/g),氮源麸皮20、25、30、35(g/L培养基)和7水硫酸锌浓度100、600、1300、2000(mg/L培养基)。分别以干菌丝有机锌含量、25ml培养基有机锌产量和锌的转化率3个指标进行了分析,并分别给出了其最优培养条件,以用于指导灰树花液体培养基的设计。以25ml培养基有机锌产量为指标时,得到优化培养基为1L培养基中含ZnSO4·7H2O2000mg、麸皮35g、La(NO3)350mg、马铃薯300g、葡萄糖36g。优化培养基下有机锌的产量为1.472mg/25ml,即58.88mg/L培养基。     

加锎液体培养灰树花富集有机锌的研究

灰树花是药食两用真菌,富含多糖、氨基酸和多种矿物元素.利用灰树花将无机锌转化为有机锌,能为人体补锌提供一条新的有效途径.稀土元素对生物的生长代谢具有促进作用.为了研究镧和锌元素存在时灰树花液体培养富集锌的能力,设计了四因素四水平的正交试验方案.其因素和水平分别为硝酸镧浓度50、100、150、200(mg/L培养基),1 L培养基中碳源马铃薯/葡萄糖150/18、200/24、250/30、300/36(g/g),氮源麸皮20、25、30、35(g/L培养基)和7水硫酸锌浓度100、600、1300、2000(mg/L培养基).分别以干菌丝有机锌含量、25 ml培养基有机锌产量和锌的转化率3个指标进行了分析,并分别给出了其最优培养条件,以用于指导灰树花液体培养基的设计.以25 ml培养基有机锌产量为指标时,得到优化培养基为1 L培养基中含ZnSO4·7H2O 2000 mg、麸皮35 g、La(NO3)3 50 mg、马铃薯300 g、葡萄糖36 g.优化培养基下有机锌的产量为1.472 mg/25ml,即58.88 mg/L培养基.     

Zn、La对灰树花液体培养菌丝产量的影响

研究了微量元素锌、镧对灰树花菌丝产量的影响。在灰树 花液体发酵液中,加入不同浓度的硝酸镧和硫酸锌,接种 培养7d后,测定其菌丝干重。结果表明,锌含量对菌丝体 的生长影响显著,当培养基中锌含量大于1000mg/L时, 菌丝体的生长受到抑制。最佳工艺参数是:每1L培养基 中含锌100mg、马铃薯300g、葡萄糖36g、麸皮35g、 La(NO3)3 100mg,培养温度为25℃,摇床转速为150r/min。 实验中所得灰树花菌丝平均干重为0.4725g/25mL,最高 干重值为0.5938g/25mL。      

Zn、La对灰树花液体培养菌丝产量的影响

研究了微量元素锌、镧对灰树花菌丝产量的影响。在灰树 花液体发酵液中,加入不同浓度的硝酸镧和硫酸锌,接种 培养7d后,测定其菌丝干重。结果表明,锌含量对菌丝体 的生长影响显著,当培养基中锌含量大于1000mg/L时, 菌丝体的生长受到抑制。最佳工艺参数是:每1L培养基 中含锌100mg、马铃薯300g、葡萄糖36g、麸皮35g、 La(NO3)3 100mg,培养温度为25℃,摇床转速为150r/min。 实验中所得灰树花菌丝平均干重为0.4725g/25mL,最高 干重值为0.5938g/25mL。     

灰树花对铬生物富集作用的探讨

本课题对灰树花的耐铬和富铬特性进行了研究.结果表明,灰树花的耐铬和富铬能力都很强.在加铬量为1～5 mg/L的固体培养基上,菌丝均能生长,当加铬量超过4 mg/L时,菌丝生长受到一定影响.采用B和C两种不同培养基液体深层培养,前者菌丝生物量小,但富集量却高于后者,当铬质量分数达到5 mg/L时,菌丝体对铬的富集量最高,达31.398μg/g.     

灰树花富锗培养研究

对食药用真菌灰树花的耐锗和富锗特性进行了研究 .结果表明 ,灰树花的耐锗能力和富锗能力都很强 .在锗质量分数为 1 0 0～ 3 0 0 0mg/kg的固体培养基上 ,菌丝均能生长 ,当锗质量分数超过 2 50 0mg/kg时 ,菌丝生长受到一定影响 .采用液体深层培养 ,在锗质量分数为 1 0 0～ 1 50 0mg/kg范围内 ,菌丝体富集锗的范围为 2 96～ 3 74 6mg/kg(以干菌丝计 ) ,当锗质量分数为 50 0mg/kg时 ,菌丝体对锗的吸收率最高 ,达 3 .58% .适当的锗还能促进菌丝体对培养液中还原糖的利用并提高菌丝干收率及胞外多糖分泌量 ,但对发酵液 pH值、发酵周期及菌丝体胞内多糖产量没有明显影响 .     

灰树花液体培养过程中底物利用与菌丝超微结构的变化

研究了灰树花深层发酵过程中底物利用与菌丝超微结构的关系。发酵的不同时期菌丝利用的底物不同,菌丝的超微结构也呈现出相应的变化。发酵早期的菌丝主要利用碳水化合物,结构上表现为线粒体丰富,液泡化程度低。发酵中期,菌丝开始分化,液泡增多增大,并通过内吞作用积累了一些脂质物质。这一时期超微结构上最大的特征是菌丝分化出顶囊以及膜边体,细胞内的膜系统分化出圆球体、初级溶酶体、次级溶酶体等结构,其中溶酶体内的各种水解酶负责水解蛋白质、脂肪等大分子;发酵后期菌丝高度液泡化,积累并利用脂质体,主要通过脂类分解代谢维持生命活动。     

液体深层培养灰树花菌株的筛选

利用摇瓶培养方法,以菌丝生物量及产发酵多糖整量为主要评价指标,从6个灰树花菌株中筛选出一个适应液体深层培养的优良菌株Gr9805。该菌株在综合PDA发酵培养基中生长,菌丝干重达0.5％左右,多糖总量达170.35mg/100ml发酵液。     

灰树花液体菌种固体栽培

采用一种特殊培养基培育灰树花液体菌种 ,并进行固体料的搅拌式接种 .此栽培方式由于发菌很快而大大缩短了栽培周期 ,是一种灰树花的制种、栽培新技术 .     

液体培养灰树花菌丝生产海藻糖

探索了灰树花(Grifola frondosa)GIM5.164深层培养中海藻糖积累的规律.结果表明,以培养基组分玉米粉4% 麸皮浸汁2% 葡萄糖1%,pH3.5及转速为130 r/min为适宜灰树花积累海藻糖的培养条件.海藻糖积累于快速生长期之后的稳定期,培养时间到第11天时,菌体内的海藻糖含量最高,达到1.20mg/mL,百分含量为11.48%;将已培养11d的灰树花菌体用37.5℃处理6 h后可使海藻糖的含量显著增加,达到1.59 mg/mL,百分含量为15.20%;在发酵培养基中添加0.1%～0.2%的花生油作为消泡剂可提高菌体的海藻糖含量;产物海藻糖为浅黄色的晶体.     

灰树花保健饮料的研制

以灰树花发酵液为主要原料,通过正交试验,确定了灰树花保健饮料的最佳配方为灰树花发酵液添加比例为80％、白砂糖为8g、柠檬酸0．2g、羧甲基纤维素钠0．02g。     

海藻糖在灰树花深层发酵中的积累及多糖的提取

探索了灰树花深层发酵与多糖提取的工艺 ,并对海藻糖与多糖产生的规律进行了研究。结果表明 ,以土豆 6 %、麸皮浸汁 2 %、葡萄糖 1%为培养基 ,在 2 5℃下培养为灰树花适宜的培养条件 ;灰树花多糖提取的最佳工艺参数是 :加水倍数 2 5,醇沉浓度 90 % ;海藻糖累积于快速生长期之后的稳定期 ,用 37 5℃处理灰树花菌丝体可获较高的产量 ;灰树花胞内多糖含量与海藻糖含量同时在稳定期达到最大值。     

灰树花菌丝体抗肿瘤糖肽GFPS1b结构的研究

以体外抑制肿瘤细胞增殖的活性作为筛选导向，从灰树花深层发酵培养菌丝体中提取、分离纯化得到一酸性糖酞GFPS1b．HPGPC法测得其重均相对分子质量为21000．蛋白质质量分数16．60％，糖质量分数为81．32％。利用化学方法（单糖组成分析、部分酸水解、甲基化分析）和仪器方法（GC、GC—MS、红外吸收光谱、核磁共振）分析GFPS1b的糖链结构，结果表明其单糖组成主要有G1c、Ga1、Ara和少量的糖醛酸，其糖链主链由两个α-D—G1c（1→3）、α-D—Ga1（1→4）、α-D—G1c（1→3，6）和α-D—Ga1（1→6）组成的，其中葡萄糖基的6位发生取代，取代侧链主要为α-L—Ara-（1—4）-α-D—Glc（1→。可以认为GFPS1b为一新糖肽。     

茯苓提取物参与灰树花液态深层发酵及对其活性物质产量的影响

中药茯苓提取物参与灰树花液态深层共发酵,进而探究不同溶剂提取的、不同添加比例的茯苓提取物对灰树花活性物质产量的影响。结果表明,添加5 g/L的茯苓醇提液和7 g/L的茯苓水提液时,均能够提高灰树花的生物量及多糖、总黄酮、蛋白的含量。相比于空白对照组,在最适醇提物和水提物添加量下的菌丝体生物量分别提高了24.28%和29.04%,具有显著促进作用(P<0.05)。5 g/L醇提物添加条件下的胞外多糖、胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白组与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了17.8%、30.29%、8.32%、10.13%、10.49%和10.24%。7 g/L水提液添加条件下胞内多糖、胞外黄酮、胞内黄酮、胞外蛋白、胞内蛋白与空白组相比具有显著促进作用(P<0.05),分别提高了19.8%、3.16%、9.29%、10.24%和8.78%。表明添加一定量的茯苓提取物能够在一定程度上增加灰树花菌丝体的生长和活性代谢产物的含量,并且对多糖的产量影响尤为明显。