固定化酶水解鱿鱼碎肉制备高F值寡肽的工艺优化

为了研究鱿鱼碎肉通过固定化双酶水解法制备高F值寡肽的工艺,以蛋白质水解度为指标,通过单因素和正交试验确定固定化胃蛋白酶和固定化风味酶的最佳酶解条件。第1步采用固定化胃蛋白酶,其最佳酶解条件是:料水比1∶5、加酶量26.83 U/g鱿鱼碎肉、水解时间5 h、水解温度55℃;第2步采用固定化风味酶,其最佳酶解条件是:加酶量1 692 U/g鱿鱼碎肉、pH 7.0、水解温度55℃、水解时间3 h;两步酶解后的总水解度为(32.09±0.58)%,OD_(280)为0.238±0.001。酶解液经多级活性炭串联吸附脱除芳香族氨基酸后,支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值(F值)大于20。鱿鱼碎肉经固定化胃蛋白酶和固定化风味蛋白酶分步水解后,活性炭串联吸附脱芳后可制备高F值寡肽。     

海蜇胶原蛋白肽的酶解制备工艺

以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,以还原力(RP)和水解度(DH)为指标,采用响应面法研究了酶解温度、酶解时间、pH、料液比、酶添加量对还原力和水解度的影响,得到最佳酶解胶原蛋白的工艺条件;并进一步与复合酶水解工艺进行比较,确定海蜇胶原蛋白肽的最优制备工艺。结果表明:胰蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH8.5、料液比0.50 g/mL、酶添加量3.0%和酶解时间4 h;风味蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH7.5、料液比0.56 g/mL、酶添加量4.0%和酶解时间4 h;进一步进行复合酶实验,结果表明采用风味蛋白酶和胰蛋白酶分别在其最适条件下进行先后酶解获得的酶解液的DH和RP最高,分别为(71.56%±0.0076%)和(0.341±0.0101)。     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

牛骨蛋白分步酶解制取胶原多肽螯合钙的研究

以富含胶原蛋白和有机钙的新鲜牛骨为原料,在采用正交试验确定胃蛋白酶(pepsin)适宜水解条件的基础上,通过添加A1398中性蛋白酶(neutral protease)结合三因素二次旋转试验方法对水解牛骨蛋白制备胶原多肽钙的工艺进行优化。结果表明:先用胃蛋白酶在pH1.5,料液比1∶30,E/S5∶000U/g(蛋白质),温度37℃,酶解3h,再调节pH值至7.5,E/S3000U/g(蛋白质),温度50℃,酶解40min,螯合率最高可达98.36%。     

蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解工艺研究

以酶解液多肽指数为指标,选用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及蜗牛酶、纤维素酶水解蛹虫草HWM剩余物,筛选蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解最佳用酶。采用二次回归正交试验确定其最佳酶解工艺。试验结果表明,碱性蛋白酶为蛹虫草HWM剩余物蛋白降解的最佳用酶,其最佳酶解工艺参数为反应时间12 h,加酶量为干基底物质量的10%,底物质量浓度70 mg/mL,酶解温度55℃,初始pH 12.0。在此条件下,蛹虫草酶解液多肽指数达90.32%。     

海参蒸煮废液多肽提取响应面优化及抗氧化研究

以海参蒸煮废液为原料,采用蛋白酶酶解法提取废液中的海参多肽,筛选出水解海参蛋白的最适蛋白酶。通过单因素试验,研究了加酶量、酶解pH、酶解温度和酶解时间四个因素对水解度的影响,并通过Box-Benhnken中心组合试验及响应面分析法对酶解条件进行优化。结果表明,中性蛋白酶水解效果最好,其最优酶解工艺条件为:酶解时间4 h,加酶量3.85%,温度45℃, pH 7.0。在此条件下海参蛋白水解度为44.5%。制得的海参多肽对羟自由基和超氧自由基具有较强的清除能力, IC_(50)值依次为6.901和8.804 mg/mL。     

酶法制备汉麻籽蛋白抗氧化肽

采用不同蛋白酶酶解汉麻籽蛋白,确定Alcalase 2.4L碱性蛋白酶是酶解汉麻籽蛋白制备抗氧化肽的优良酶源。通过单因素和响应面回归分析,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解汉麻籽蛋白的优化条件为:底物浓度50 mg/mL、水解时间2 h、温度50℃、加酶量2.2%、pH 9.4。优化酶解条件下,水解度约为20%,10 mg/ mL酶解产物的DPPH自由基清除率为82.65%,显示出较好的抗氧化活性。     

放射型根瘤杆菌植酸酶对麸皮中植酸的脱磷作用

采用放射型根瘤杆菌植酸酶粗酶液水解麸皮中的植酸,研究其脱磷的最适条件。依据单因素试验和正交试验获得脱磷的最优条件为加酶量750U/g、底物质量浓度40mg/mL、温度45℃、pH7、时间5h。最优条件下,麸皮中植酸的水解率在5h达最大,为81.50%。     

均匀设计法优化罗非鱼肉富肽酶解液制备工艺

为得到高肽含量罗非鱼肉酶解液,以水解度及肽含量为指标,从胃蛋白酶、胰蛋白酶、Alcalase 2.4L、中性蛋白酶及木瓜蛋白酶中筛选出中性蛋白酶为最适用酶。在单因素试验的基础上,采用均匀设计试验优化中性蛋白酶酶解条件。得到最高肽含量酶解条件为:加酶量1.38%,料液比1∶3(g/mL),温度50℃,自然pH,时间7 h,此时肽含量(以每克鱼肉计)为(37.71±0.11)mg。     

乳清蛋白酶解条件的研究

研究了中性蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、复合风味蛋白酶4种水解乳清蛋白的酶,以水解度作为测定指标,考察不同酶酶解温度、时间、p H值、加酶量对水解条件的影响。结果为:确定碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶,复配酶最佳酶解条件为:酶解温度55℃;酶解时间4 h;每千克蛋白质中加酶量为6 g;碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶的质量比为1∶2。     

酶解葵花籽粕蛋白制备降血压肽的工艺研究

建立胰蛋白酶水解葵花籽粕蛋白制备降血压肽的工艺.以酶解物对血管紧张素转换酶抑制率、苦味值和蛋白水解度为指标,对pH、温度、底物浓度、加酶量和酶解时间等酶解条件进行单因素实验,并在此基础上,选择酶解时间、pH、温度等参数通过正交实验,确定了酶解葵花籽粕蛋白制备降血压肽的最优参数组合为:底物浓度为3.5%,加酶量2.85%.pH7.5、温度45℃和酶解时间5min,所得葵花籽粕降血压肽产品的IC50值为6.06mg/mL.     

固定化中性蛋白酶制备水牛乳抗氧化活性肽的研究

采用琼脂包埋固定中性蛋白酶,优化固定化条件,并利用固定化酶水解脱脂水牛乳生产具有抗氧化活性的酶解液,对其进行调配研制具有抗氧化活性的饮料。结果表明,最佳固定化条件为3%的琼脂、每克琼脂添加160mg中性蛋白酶、固定化时间为4h。固定化酶水解脱脂水牛乳最佳工艺为pH7.5、温度55℃、加酶量为2500U/g和酶解5h。     

复合酶分步酶解法提取牛骨胶原蛋白工艺的研究

以牛骨胶原蛋白初步酶解产物为研究对象,以水解度为指标,采用甲醛滴定法监测深度酶解的进程,对比分析不同的酶解条件对水解度的影响,确定了中性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的酶解条件。通过正交试验结果表明:采用中性蛋白酶和风味蛋白酶加酶量分步水解牛骨蛋白的最佳条件为物料比1∶750,起始pH值是6.5,先用中性蛋白酶55℃酶解3h后,再用风味蛋白酶于55℃继续酶解2h。此时水解度达到63.6%。     

利用啤酒废酵母酶法制备蛋白肽工艺研究

以啤酒废酵母为原料,选用碱性蛋白酶(Alcalase)酶,制备酵母蛋白肽.分别从底物浓度、酶解温度、加酶量、酶解pH值和酶解时间等因素来研究Alcalasc酶对啤酒废酵母水解度的影响,并通过正交试验优化酶解条件,其最佳酶解条件为:酵母浓度20%、pH8.0、加酶量0.5%、酶解温度55℃、酶解时间16h.在此条件作用下,酵母的水解度(DH)可达38.2%,水解液中酵母蛋白肽含量可达5.32mg/mL.     

鹿角盘成分提取及其工艺的优化

摸索鹿角盘提取条件,优化提取工艺。利用正交试验考察水提法和酶解法对鹿角盘提取率的影响。水提法:料液比1︰25 (g/mL), 100℃煎煮6 h,提取率为28.11%。单酶酶解法:胃蛋白酶酶解工艺为料液比1︰30 (g/mL),pH 1.8,加酶量4%,酶解温度37℃,酶解4 h,提取率为22.39%;胰蛋白酶酶解工艺为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量4%,酶解温度55℃,酶解6 h,提取率为20.99%。复合酶解酶解工艺:先胃蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL),pH 1.8,加酶量1%,酶解温度37℃,酶解12 h;后胰蛋白酶,处理条件为料液比1︰20 (g/mL), pH 8.0,加酶量0.4%,酶解温度37℃,酶解2 h,提取率可达31.84%。按照复合酶解工艺,对水提法最佳条件下提取后的鹿角霜进行复合酶解,提取率仅为1.33%。利用水提和酶解的方法筛选出鹿角盘的最优提取条件,制备工艺合理。由结果看出,两个方法中得到的提取率差异不明显。复合酶解得到的提取物种类和含量多于水提法的种类和含量。     

响应面法优化碱性蛋白酶酶解草鱼蛋白质

用Alcalase碱性蛋白酶对草鱼蛋白质进行酶解,比较酶的添加量、pH值、温度、料液比以及酶解时间对草鱼蛋白水解进程的影响,通过响应面法优化Alcalase碱性蛋白酶酶解反应的工艺条件。结果表明：Alcalase碱性蛋白酶酶解草鱼蛋白质的最优工艺条件为：加酶量1.8%、酶解温度55 ℃、酶解pH 9.0、料液比1∶15、酶解时间180 min,此条件下蛋白质水解度达到23.46%。     

复合酶水解乳鸽肉的研究

以乳鸽脯肉为原料,选择复合蛋白酶(Protamex)和复合风味酶(Flavourzyme)分步水解制备乳鸽肉水解液。通过对水解条件的研究确定Protamex酶最适酶解条件为:固液比为1∶2,反应温度为55℃,pH值7.5,酶用量0.2%,酶解时间5h;在此反应条件下,单一酶酶解液最高水解度为25%左右;分步酶解的工艺条件是:Protamex酶反应进行2h后,加入0.5%Flavourzyme酶,50℃下酶解时间14h,酶解液水解度达40%,复合水解液呈亮黄色,味道鲜美。氨基酸分析结果表明,游离氨基酸含量约4641mg/100mL(色氨酸未计),必需氨基酸2838mg/100mL,占61.2%。尤其是亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸等支链氨基酸含量以及谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸等呈味氨基酸含量丰富。结果为乳鸽肉复合水解液作为疗效营养剂或高级调味料提供了依据。     

复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的工艺优化

以带鱼下脚料蛋白为原料,以水解度及亚铁螯合率为考察指标,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选试验,然后进行复合酶解试验.采用二次正交旋转组合设计,以水解度及亚铁螯合率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH值及温度对制备亚铁螯合多肽工艺的影响.综合考虑水解度和螯合率因素,最终确定复合酶解带鱼蛋白制备亚铁螯合多肽的最佳工艺条件为:总加酶量22 000 U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比4:6先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶9h、木瓜蛋白酶8 h;pH值为碱性蛋白酶8.0、木瓜蛋白酶6.0;酶解温度为45℃.该条件下制备的带鱼蛋白亚铁螯合多肽产物水解度和螯合率分别为52.22％、82.31％.     

低苦味花生多肽的制备

以花生分离蛋白为原料,研究复合酶协同酶解法制备低苦味花生多肽的最佳条件,并分析其体外抗氧化活性。根据单因素实验的结果,筛选出低苦味花生多肽的最佳水解条件,并通过测定清除DPPH、ABTS+自由基的能力来评价其抗氧化活性。结果表明,复合蛋白酶协同酶解花生分离蛋白的最佳反应条件为:使用碱性蛋白酶(pH8.5,温度55℃,时间4 h)、蛋白酶P(pH7.0,温度50℃,时间3 h)和风味酶(pH7.0,温度50℃,时间2 h)依次分步酶解花生分离蛋白,三种酶添加量分别为0.8%、0.4%和0.2%。此工艺下,酶解液苦味值为1.3,多肽得率为86.75%,相对分子质量低于1 kDa的多肽含量达85.93%。酶解液质量浓度为4 mg/mL时,对DPPH自由基和ABTS+自由基清除率分别为80.70%和87.92%,表明花生粗多肽抗氧化活性较好。     

中性蛋白酶水解荞麦蛋白的研究

以水解度为主要指标,研究了中性蛋白酶对荞麦蛋白的水解作用.试验结果表明,最佳的酶解条件为:加酶量5000 U/g,底物质量浓度40 g/L,温度50℃,pH7.5,酶解时间2 h.在此酶解条件下,荞麦蛋白水解度达到42.31%.