鸡蛋清蛋白酶解肽的抗氧化活性

分别采用胃蛋白酶和碱性蛋白酶对鸡蛋清蛋白进行单酶和双酶水解,筛选得到水解度较高的鸡蛋清蛋白酶解产物Ⅰ(P-A)H,并对上述酶解产物依次进行超滤和树脂分离,得到高活性的组分ⅠF2。通过总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基(·OH)抗氧化评价体系,分析酶解产物Ⅰ(P-A)H和组分ⅠF2的抗氧化能力。结果表明:Ⅰ(P-A)H具有较强的总还原力和DPPH清除力以及显著的·OH清除能力;组分ⅠF2与酶解产物Ⅰ(P-A)H的抗氧化活性相比,其活性显著性提高。     

超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽的研究

选用风味酶、Alcalase酶和双酶酶解花生蛋白,采用超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽.以水解度为评价指标,研究超声预处理、水浴处理和超声波与酶同时处理对花生分离蛋白酶解过程的影响.结果表明:3种酶解过程中,在相同酶解时间下,超声预处理的水解度均大于水浴处理和超声波与酶同时处理.超声预处理辅助Alcalase酶酶解8h时水解度最大,为29.81％.酶解过程中随着水解度增大,花生肽的还原力均呈现先增高后降低的趋势.Alcalase酶超声预处理条件下制备的花生肽还原力最大,其抗氧化能力相当于浓度为50.92 μg/mL的Vc.     

磷酸化预处理对花生蛋白酶解特性的影响

以水解度和蛋白质提取率作为评价指标,研究了经磷酸化预处理对花生蛋白酶解特性的影响.通过单因素和正交试验确定了磷酸化处理的最佳工艺条件为:三聚磷酸钠(STP)添加量8%,预处理时间20 min,温度30℃,p H为8.0.同时研究了磷酸化处理后花生蛋白在酶解过程中水解度和蛋白提取率的变化规律.     

菜籽蛋白酶水解产物抗氧化活性研究

对菜籽蛋白酶水解产物的抗氧化作用进行了研究.采用枯草杆菌中性蛋白酶、低温高碱碱性蛋白酶水解菜籽蛋白,然后将水解产物冷冻干燥后按一定比例加入猪油中,采用烘箱法和Rancimat法研究了菜籽蛋白酶水解产物的抗氧化活性.     

用响应曲面法优化豌豆蛋白酶解条件

旨在应用响应曲面试验设计优化豌豆蛋白酶解条件,以期得到准确的酶解预测模型。本文以含水量为30%的豌豆蛋白为原料,以DPPH和·OH清除率为评价指标,利用响应曲面设计优化中性蛋白酶的酶解条件,得出酶解最佳条件为加酶量10.60%、温度40.30 ℃、pH 7.02、底物质量分数6.80%。在此条件下,得到DPPH清除率、·OH清除率分别为99.10%、97.60%。经验证,所建模型预测准确可靠,酶解产物抗氧化性高,可为相关生产和工艺产品开发提供参考。     

中性酶从米糠中制取抗氧化性活性肽的研究

以中性蛋白酶(Neutrase)为工具酶,在水相体系里水解米糠蛋白,制备具有抗氧化能力的活性肽溶液,以其对OH.自由基、O2-.自由基的清除率为指标,探讨了温度、时间、加酶量(基于米糠质量)、pH值、底物浓度对活性肽溶液制备的影响,得出较优条件为:温度45℃、时间4.5 h、加酶量0.8%、pH6.5~7.0,底物浓度1∶15.抗氧化实验表明,在此条件下制得的米糠活性肽溶液对超氧阴离子自由基和羟自由基具有良好的清除能力.     

低次烟叶蛋白肽抗氧化特性的研究

采用复合蛋白酶水解低次烟叶蛋白，产生的酶解物中蛋白肽根据其分子量大小进行了分离，在此基础上采用氧化亚油酸体系TBA法和DPPH自由基清除活性研究了不同肽组分的抗氧化活性。低次烟叶蛋白酶解液经超滤膜分级分离，得到透过10kDa、5kDa、3kDa和1kDa4种截留分子量膜的肽组分，其中透过5kDa的肽组分具有较高的抗氧化活性，其氧化抑制率为42．55％，是原蛋白酶解液活性的2倍左右，接近VE的抗氧化活性。透过5kDa的肽组分对DPPH自由基的清除活性最强（清除率达到83．82％），略低于VE的清除活性。试验结果袁明．低次烟叶蛋白经盆合蛋白酶酶解后产生的蛋白肽功能特性有明显的改善。     

酶法制备富硒糙米抗氧化肽的研究

采用酶法制备富硒糙米抗氧化肽,研究了酶种类、酶解时间、酶解温度、底物浓度、pH和加酶量对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶较适宜制备富硒糙米抗氧化肽。在单因素的基础上,以总抗氧化能力为指标,采用响应面法优化了富硒糙米抗氧化肽的最佳制备工艺,其条件为:底物浓度3%,pH 8.0,酶解时间2.0 h,温度50℃,加酶量7 550 U/g。该条件下制备的抗氧化肽的总抗氧化能力为(16.16±0.22)μmol/g。抗氧化肽在食品特别是功能性食品中的应用,对于保持食品品质、提高机体抗氧化机能具有积极作用。     

中药抗氧化成分及抗氧化活性的体外评价方法

研究发现有机体的多种疾病都与自由基对机体的氧化损伤有关,中药作为天然抗氧化剂资源倍受关注。综述了中药中酚类、黄酮类、皂苷及多糖等几类主要天然抗氧化剂及其抗氧机理,并简要介绍了评价清除自由基作用的几种体外方法,包括化学发光法、分光光度法和电子自旋共振法等。     

大豆蛋白酶解产物降胆固醇活性的初步研究

研究了用AS1.398和Alcalase两种蛋白酶制备的水解度为10%～24%的大豆蛋白酶解产物的降胆固醇活性.结果表明:用Alcalase酶水解大豆蛋白,水解度为18%的产物降胆固醇活性最高,添加量为5 mg/mL时,对胆固醇胶束溶解度的抑制率为48.39%,动物实验表明该产品在灌喂剂量大于1 g/(kg·d)时,对喂饲高脂饲料小鼠的血清总胆固醇降低作用比较显著(P＜0.025),30 d后降低幅度可达30%以上.     

大豆分离蛋白酶解的研究(一)

选用木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白,对原料预处理条件,酶解条件进行了研究。实验结果表明：原料预处理最佳条件为：水中８０℃处理１５ｍｉｎ,酶解最佳条件为：底物浓度４５％,酶浓度９０００ｕ／ｇ,ｐＨ７,５５℃。     

水酶法同时提取浓香花生油和水解蛋白质的研究

为增加油脂风味,将花生在不同温度下烘烤后再进行水酶法提油.结果表明:花生经190℃烘烤20 min后,提取出的油脂具有浓郁的香味.以此烘烤条件下的花生为研究对象,对其水酶法提油工艺参数进行优化,得出最佳条件为:碱提pH9.5,固液比1:5,加酶量3.0%(V/W),酶解时间2 h.在最佳条件下油脂和蛋白质得率分别约为76%和79%.     

Alcalase酶解芝麻蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

以芝麻蛋白为原料,采用酶解法制备血管紧张素转化酶(Angiotensin I-Converting Enzyme,ACE)抑制肽。通过比较Alcalase酶、碱性蛋白酶2709、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶的酶解结果,筛选出Alcalase酶作为制备ACE抑制肽的工具酶。通过单因素试验,分析了时间、p H、加酶量、温度及底物浓度对短肽生成率和水解度的影响。基于单因素试验结果,固定加酶量为3 000 u/g和底物浓度为3%,以短肽生成率和ACE抑制率为考察指标,通过响应面优化试验确定Alcalase的最佳水解条件为:时间147 min,p H 8.24,温度55℃。在此条件下短肽生成率和ACE抑制率分别为75.27%和70.80%,IC50值为1.004 mg/m L。     

花生蛋白酶解液的活性炭脱色工艺研究

水酶法工艺可以同时提取浓香花生油和花生水解蛋白,但由此得到的蛋白酶解液色泽较深.分别使用颗粒和粉末活性炭对花生蛋白酶解液进行脱色处理,发现粉末活性炭更适合于蛋白酶解液的脱色,其脱色最佳条件为:活性炭用量(g/mL)8%,温度55℃,时间30 m in,pH3.2.在此条件下酶解液的脱色率可以达到79.38%,而蛋白损失率为20.86%.     

用2709碱性蛋白酶水解醇洗花生蛋白制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽

采用2709碱性蛋白酶水解醇洗花生蛋白制备ACE抑制肽。以短肽得率、水解度和ACE抑制率为指标,通过单因素和响应面优化设计获得最佳酶解工艺条件:p H 9.3、酶解温度50℃、时间150 min、加酶量3 000 U/g和底物浓度4%,在最佳酶解条件下,短肽得率为77.89%,水解度为17.87%,ACE抑制率为76.26%。结果表明:适当的酶解时间和温度能提高短肽得率和ACE抑制率,但酶解时间过长,过度水解会使短肽失去ACE抑制结构,降低ACE抑制率。     

酶解改性对大豆蛋白抗原性的影响研究

大豆蛋白营养价值很高,但其是八大类食物过敏原之一,会对过敏人群造成危害,而酶解是一种较好的蛋白改性方法。选用风味蛋白酶处理大豆分离蛋白,采用间接竞争ELISA法测定酶解产物中β-伴大豆球蛋白的抗原性,并利用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,风味蛋白酶可以显著降低β-伴大豆球蛋白的抗原性,且其抗原性与水解度具有负相关关系。风味蛋白酶在酶解时间30 min、加酶量1 500 U/g、温度60℃、p H 6.5条件下,酶解产物中β-伴大豆球蛋白抗原抑制率达到最低,为21.79%,比大豆分离蛋白降低了76.60%。SDS-PAGE结果表明,风味蛋白酶能够将β-伴大豆球蛋白酶解成低相对分子质量的肽段,从而降低其抗原性。     

酶促水解对大豆蛋白热凝结性的影响

酶促水解可以显著提高大豆分离蛋白的热凝结性。本课题采用微生物蛋白酶部分水解方法，使大豆分离蛋白的热凝结度从９．３％增加到３５．６％，酸性溶液中的氮溶解率从５．７％增加到４８．１％。拓宽了大豆分离蛋白的应用范围。     

花生蛋白制备ACE抑制肽的初步分离纯化研究

采用30 ku、10 ku、5 ku三级超滤将酶解液进行分离和浓缩。三级超滤的结果表明:10 ku的透过液的半抑制浓度(IC50)最低为1.32 mg/m L。采用葡聚糖G-15对酶解液10 ku的透过液进行脱盐和分组,结果表明:脱盐率达到了94.50%,花生多肽的回收率为78.23%。分离的4个峰中峰4的IC50最小为0.634 mg/m L,说明峰4的ACE抑制活性效果最好。将峰4的组分进行LCMS检测,得到ACE抑制肽主要的相对分子质量为1 193.5、1 512.6、1 530、1 608.9、1 777.6。