高纯度大豆染料木苷的制备工艺研究

从低温脱溶豆粕超声提取大豆染料木苷,水洗纯化染料木苷粗提物。通过单因素及正交试验,优化制备高纯度大豆染料木苷的最佳工艺条件为:乙醇浓度为70%、超声时间为40 min、提取温度为40 ℃、水洗纯化温度为90 ℃、染料木苷粗提物与水体积比为1:50(mL/mL)、压滤机的压强为0.25 MPa。此条件下制备的染料木苷纯度高达92.66%,更年期女性每人服用大豆染料木苷30 mg/d,具有类雌激素效应。研究结果对满足国民的大豆异黄酮类雌激素需求具有重要意义。     

大豆异黄酮苷元的纯化

以大豆异黄酮糖苷水解产物为原料,分离纯化染料木黄酮和大豆苷元.以丙酮为溶剂进行萃取分离,通过单因素实验考察溶剂体积、萃取温度和萃取时间对分离效果的影响,最终确定分离条件为:加入30倍体积丙酮,15℃分离20 min,最终产品染料木黄酮纯度72.3%,回收率89.5%;大豆苷元纯度67.7%,回收率84%.     

吸附树脂分离大豆异黄酮染料木苷和乙酰基染料木苷的研究

利用Sepabeads SP207大孔吸附树脂分离提纯大豆异黄酮。用乙醇从脱脂大豆中提取的大豆异黄酮主要含有染料木苷,还含有大豆苷、黄豆苷和乙酰基染料木苷等;经Sepabeads SP207大孔吸附树脂的乙醇梯度洗脱,可分离得到染料木苷和乙酰基染料木苷;经HPLC检测其纯度均为90%以上。     

大豆糖蜜发酵提高染料木苷含量研究

以制备大豆浓缩蛋白时副产物"大豆糖蜜"为底物,通过发酵法提高其染料木苷含量。在单因素试验基础上,采用正交试验优化发酵工艺条件;结果表明,最宜发酵工艺条件为:发酵温度30℃、发酵时间24 h、大豆糖蜜溶液浓度10%、pH 5.0、酵母用量7%;在此条件下,染料木苷含量提高率最大,为81.0%。     

酶水解对大豆异黄酮粗提物中苷元含量的影响

采用β-葡萄糖苷酶水解的方法将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木素和大豆苷元含量为指标,通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察。以染料木素含量为指标,运用正交试验优化了β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度40℃、水解时间1.5h、水解介质pH4.5、水解底物浓度10mg/mL,在此条件下,水解得到的大豆异黄酮苷元中染料木素的含量可达到22.91%。     

UPLC法测定大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量

目的：建立同时测定大豆制品及相关制剂中4种大豆异黄酮类化合物大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量的超高效液相色谱法。方法：色谱柱：Acquity UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7μm),流动相：A为体积分数0.2%甲酸溶液,B为乙腈,梯度洗脱;流速：0.4mL/min;检测波长：254nm,柱温：30℃。结果：线性范围：大豆苷0.625～40.0mg/L(r=1.000),染料木苷0.625～40.0mg/L(r=0.9999),大豆苷元0.04～2.56mg/L(r=0.9997),染料木素0.04～2.56mg/L(r=0.9996)。大豆和Natrol? soy isoflavones中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素平均回收率为98.5%～99.8%。结论：本方法简便、快速、灵敏、准确,适用于大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量测定。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定保健食品中大豆异黄酮含量

建立保健食品中6种大豆异黄酮的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测方法。样品中大豆异黄酮采用80%甲醇超声提取、Florisil固相萃取柱净化,C₁₈色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30 ℃,质谱正离子多反应监测(MRM)模式进行检测。结果表明,大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素以及染料木素在各自浓度范围内线性关系良好;大豆黄苷、大豆黄素检出限均为10 μg/kg;大豆苷、染料木苷检出限均为20 μg/kg;大豆素、染料木素检出限均为30 μg/kg,加标回收率为81.8%~98.4%,相对标准偏差为1.8%~6.7%。所建立的超高效液相色谱串联质谱是一种高灵敏度、高准确度的测定方法,对保健食品中大豆异黄酮的质量控制提供了参考依据,具有一定的理论意义和应用价值。     

HPLC法测定绿豆芽中四种大豆异黄酮的含量

建立同时测定绿豆芽中4种大豆异酮(大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素)含量的高效液相色谱方法,对从绿豆芽中提取4种大豆异黄酮的工艺进行优化,最佳工艺为:用60%的乙醇在55℃条件下超声提取60 min,料液比为1:12(g/mL),同时探究绿豆发芽不同天数4种大豆异黄酮的含量.采用日本岛津LC-20A高效液相色谱仪进行测定的色谱条件为:色谱柱为 phenomenex C18(150 mm×4.6 mm,5.0 μm),采用乙腈-0.2%甲酸为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.大豆苷,染料木苷,大豆苷元,染料木素的线性范围分别是0.74 μg/mL～100.00 μg/mL,0.74 μg/mL～200.00 μg/mL,0.167 μg/mL～500.00 μg/mL,0.198 μg/mL～160.00 μg/mL(r>0.9996),线性关系良好;加样回收率(n=9)分别为100.02%,98.95%,99.28%,99.63%.     

纤维素酶水解大豆异黄酮糖苷混合物的抗氧化活性

大豆异黄酮主要以糖苷类型的分子形式存在于大豆中,但是其具有生物活性的部分主要是苷元.为了建立一种体外生物转化大豆异黄酮糖苷为大豆异黄酮苷元的新方法,采用纤维素酶水解70%乙醇提取脱脂大豆粕得到的异黄酮粗提物,对比了水解前后两样品的异黄酮组成差异,并测定了其清除DPPH自由基的能力.结果表明:纤维素酶能完全水解大豆苷和染料木苷为大豆素和染料木素;而不能水解丙二酰基染料木苷和丙二酰基大豆苷.纤维素酶处理以后的大豆异黄酮糖苷混合物达到DPPH自由基50%清除率所需要的异黄酮浓度是未处理的大豆异黄酮糖苷混合物的1/2.56.     

Isoflavonoid production by soy plant callus suspension culture

Production of aglycone type isoflavonoids, Genistein and Daidzein, and β-glycosidic type isoflavonoids, Genistin and Daidzin, by the soy plant callus suspension culture was investigated in a batch system. Genistein and Daidzein concentrations increased during the exponential growth phase of the biomass. Genistin and Daidzin concentrations were not directly related with biomass production. Methyl jasmonate addition to the growth medium (0.1 kg/m³) was found to increase isoflavonoid biosynthesis by 5-6 times. Isoflavonoid production in the 7 days old culture increased with pulsed electric field (PEF) application at 1.6 kV, and aglycone forms were influenced to a greater extent.     

高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素

以含量为4.4%的荷叶黄酮粗粉为原料,在优化高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素条件的基础上,通过对不同溶剂体系的优选及操作参数的优化,建立了高速逆流色谱分离纯化荷叶黄酮槲皮素的技术方法。结果表明,采用流动相甲醇和0.4%磷酸、梯度(0min90%甲醇→10min60%甲醇→20min40%甲醇→40min20%甲醇)洗脱、检测波长360nm、流速1.0mL/min、柱温30℃、进样量20μL的技术参数可作为高效液相色谱分析荷叶黄酮槲皮素的方法;采用氯仿:甲醇:水(体积比8:10:5)为溶剂系统(上相为固定相,下相为流动相)、流速2mL/min、转速850r/min、进样量150mg的高速逆流色谱操作技术参数,可分离制备荷叶黄酮槲皮素单体,其纯度大于99%。     

高速逆流色谱分离制备白胡椒中单萜类化合物

应用高速逆流色谱法分离制备了白胡椒中3种单萜类化合物。以V(叔丁基甲基醚)∶V(甲醇)∶V(水)=2∶1∶1为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,在主机转速900 r/min、流动相流速2.5 mL/min条件下,从2.76 g样品中一步分离制备得到3,7-二甲基-2-辛烯-1,6,7-三醇35 mg,对薄荷烷-1,2,8-三醇-2-O-β-D葡萄糖苷55mg,5-羟基龙脑-2-O-β-D葡萄糖苷40mg,经高效液相蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测纯度均达95.0%以上,各化合物结构经质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。研究结果表明,利用该方法可以对白胡椒中的单萜类化合物进行快速的分离和纯化,且制备量大,分离效率高。     

应用离子液体逆流色谱系统分离制备金银花中的绿原酸

采用离子液体为高速逆流色谱两相溶剂系统的改良剂,分离金银花中的高极性的活性成分绿原酸。首先采用乙酸乙酯萃取、HCl调节p H等方法,将金银花提取液中的绿原酸进行初步富集。通过逆流色谱溶剂系统的选择,以V(乙酸乙酯)︰V(水)︰V([C₆min][PF₆])=5︰5︰0.5为溶剂系统,上相有机相为固定相,下相水相为流动相。一次进样300 mg粗样,制备得到30 mg绿原酸,经高效液相色谱测定,其纯度为97.5%。并经过ESI-MS和1H NMR确定其化学结构。     

高速逆流色谱法分离制备孜然黄酮

应用高速逆流色谱法分离制备了孜然中的黄酮类成分。以氯仿∶甲醇∶水=4∶4∶2(v∶v∶v)为两相溶剂系统,在主机转速为850r/min、流速1.8mL/min、检测波长254nm条件下进行分离制备。所得分离收集液经高效液相色谱法检测,结果表明,从孜然黄酮粗提物中分离得到了纯度超过90%的两种黄酮类成分;经干燥得样品重分别为26mg和24mg。     

双水相萃取-高效液相色谱法分析红小豆中酰胺除草剂

建立以硫酸铵-乙醇为基础的双水相萃取法,在红小豆中萃取分离富集乙草胺、丁草胺、敌稗、异丙甲草胺4 种酰胺类除草剂的方法。采用高效液相色谱法对4 种除草剂进行分析测定。在双水相萃取过程中,上相富醇溶液的极性更接近于同一有机溶剂中除草剂的极性。下相盐溶液能有效沉淀蛋白质和脂肪。考察前处理条件,最终选择硫酸铵-乙醇体系双水相体系类型、25%乙醇、28%硫酸铵、35 ℃、1 min超声萃取时间为最佳前处理条件。由于避免了有毒有机溶剂,本方法是一种环境友好的方法。乙草胺、丁草胺、敌稗、异丙甲草胺的检测限分别为3.5、7.1、4.6、5.8 μg/kg。在加标量为10 μg/kg和100 μg/kg水平下,4 种酰胺除草剂的平均回收率范围为86.1%～95.9%,相对标准偏差≤4.5%。     

儿茶素和表儿茶素异构体的高效逆流色谱分离制备

应用高效逆流色谱法(HPCCC)对茶叶中的儿茶素和表儿茶素两种同分异构体的分离制备方法进行研究。结果表明：以正己烷-乙酸乙酯-水(体积比1:20:20)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,可以实现儿茶素和表儿茶素的完全分离。采用138mL的分离柱、1g儿茶素粗提物,在120min内一次制备即可得到纯度在95%以上的表儿茶素约35mg,纯度在99%以上的儿茶素325mg,纯度90%～99%的儿茶素100mg。     

涡旋辅助离子液体双水相萃取五味子中木脂素类化合物

建立一种简单、高效、绿色的涡旋辅助离子液体双水相法萃取五味子中7种木脂素类化合物,结合高效液相色谱法对目标物进行分离和定量.研究以离子液体[C4mim]BF4为萃取剂,以MgSO4为成相盐,在涡旋辅助作用下形成双水相体系且目标物则被萃取至离子液体相中,分别对双水相体系的组成和萃取条件进行了考察和优化,并进行了方法评价....     

高效液相色谱电喷雾质谱联机检测黑豆异黄酮

采用C18色谱柱,以甲醇:水:甲酸30min内,0.8ml/min梯度洗脱(从20:80:0.1到80:20:0.1)黑豆70%乙醇提取液。紫外光谱和电喷雾质谱的数据表明:大豆苷、乙酰基染料木苷、染料木苷、丙二酰基大豆苷、丙二酰基黄豆苷和丙二酰基染料木苷是黑豆种子中最主要的异黄酮,总含量为0.373%,为普通大豆种子异黄酮含量的2～6倍;黑豆是异黄酮的丰富来源。     

The effect of ammonia concentration on the properties of canola meals produced by the ammonia-methanol/hexane extraction system

Rapeseed (Tower variety) was extracted by a two-phase solvent system consisting of methanol containing dissolved anhydrous ammonia, and hexane. The effect of ammonia concentration in the polar phase on the composition and functional properties of the resulting meal was investigated. In the absence of ammonia, the two-phase extraction system removed 76% of the phenolic compounds and 50% of the glucosinolates, resulting in a meal containing 0.8mg/g of glucosinolates. The glucosinolate content decreased with increasing ammonia concentration until it levelled off at 0.3 mg/g at 10% ammonia. The presence of ammonia did not affect the total phosphorus or phytate levels of the meal. The content of phenolic compounds rose slightly with an increase of the ammonia concentration in the polar solvent.Extraction with the two-phase solvent system did not affect the water absorption of the meal. However, fat absorption rose sharply with increasing levels of ammonia in the polar phase. The opposite was true for the protein dispersibility index, which fell to 25% of the original level.