生物活性追踪法对丁香抗低密度脂蛋白氧化修饰的研究

丁香为桃剑娘科植物丁香的干燥花蕾。实验室前期经筛选发现,丁香在国家公布的87种药食两用物品原料中抗氧化活性最强。为了在此基础上进一步探索丁香抗低密度脂蛋白（10wdensitylipoprotein,LDL）氧化修饰作用,本文采用生物活性追踪及硫酸铜诱导法,对丁香抗LDL氧化修饰作用进行了研究。结果表明,反应体系中硫酸铜和LDL浓度分别采用3mmol／L和4meCmL合适。丁香粕提物及其乙酸乙酯相、正丁醇相与水相三个极性部位对LDL氧化均具有相应的抑制能力。在不同极性部位中乙酸乙酯相抑制率最高（85．29士o．02）％,为有效部位。该有效部位对LDL抑制呈现良好的量效关系,且对已被氧化修饰的LDL也存在抑制能力。薄层色谱分析发现有效部位主要由8种成分组成。实验证明丁香具有很强的LDL氧化修饰抑制能力,为后续研发抗动脉粥样硬化功能食品打下了基础。     

丁香非油类成分对LDL的氧化修饰抑制作用

为研究丁香非油类成分(NCC)对低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)的氧化抑制作用,本文采用有机溶剂萃取法分离制备得到NCC,建立Cu²⁺-LDL氧化体系,通过测定生化及荧光指标来确定NCC抑制LDL氧化修饰有效部位及其量效关系。结果显示:NCC各极性相能有效抑制LDL氧化修饰过程TBARS生成、Trp荧光淬灭、氧化产生的活性醛修饰赖氨酸(Lys)和荧光产物产生。在NCC中,乙酸乙酯相(EAF)对LDL氧化抑制作用最强,为有效部位;进一步发现,EAF对LDL氧化修饰抑制作用与浓度(5、10、15 μg/mL)成正相关;三维荧光光谱表征也得到相同结果。本文为后续对丁香组成分析和功能食品研发奠定基础。     

生姜提取物对于低密度脂蛋白(LDL)体外氧化的抑制作用

主要研究了三种生姜提取物对于低密度脂蛋白(LDL)体外氧化的影响。实验结果表明三种提取物对于Cu2+氧化体系和自由基引发剂2,2-偶氮双(2-脒基丙烷)盐酸盐(AAPH)氧化体系所引发的低密度脂蛋白体外氧化具有不同程度的抑制作用,其中75%乙醇提取物的抗氧化效果较为显著。三种提取物以一定比例混合后,具有明显的抗氧化协同作用。     

丁香不同极性部位抑制低密度脂蛋白脂质氧化修饰的研究

为研究丁香提取物对LDL中脂质氧化修饰的抑制作用,采用生物活性追踪法对该提取物抑制LDL弱氧化及完全氧化过程中共轭二烯(CD)产生、总胆固醇降解及脂褐素产生的效果进行了测定。结果表明,在LDL弱氧化过程中,丁香不同极性部位对CD产生、总胆固醇降解均有显著抑制作用(p<0.05),抑制作用强弱顺序为正己烷相>乙酸乙酯相>正丁醇相>水相。在LDL完全氧化过程中,不同极性部位对CD产生、总胆固醇降解及脂褐素产生均有显著抑制作用(p<0.05),抑制作用强弱顺序与上述相同。总多酚、总黄酮含量高低是各极性相对LDL脂质氧化修饰抑制效果产生差异的原因。本文为后续研发丁香抑制LDL氧化功能食品提供参考。      

诃子粗提物及不同极性部位抑制低密度脂蛋白氧化修饰的研究

为了研究诃子抑制低密度脂蛋（Low density lipoprotein,LDL）氧化修饰活性,采用Cu2+体外诱导LDL氧化,以硫代巴比妥酸反应物（thiobarbituric acid reactive substance,TBARS）含量为指标评价氧化修饰程度。运用生物活性追踪法确定诃子抗LDL氧化修饰有效部位,并对其抗LDL氧化修饰活性进行了研究。结果表明,不同浓度诃子粗提物（0.5、0.9、2.7mg/mL）抗LDL修饰抑制率分别为64.31%、77.22%和82.66%。相同浓度（0.5mg/mL）的不同极性部位中,乙酸乙酯相抗LDL氧化修饰能力显著高于其他3个极性部位（p<0.05）,为有效部位。不同浓度有效部位（0.5、0.9、2.7mg/mL）抗LDL修饰的抑制率分别达73.19%、81.85%和86.29%。有效部位能明显延长LDL氧化反应潜伏期并能延缓和降低LDL氧化修饰程度。诃子抗LDL氧化修饰与其所含的总黄酮和总多酚有关。结果显示,诃子具有很强的抗LDL氧化修饰能力,为后期开发抗LDL氧化及抗动脉粥样硬化功能食品奠定基础。      

诃子对低密度脂蛋白所含蛋白apoB100氧化修饰抑制效果的研究

为了研究诃子(TCR)对低密度脂蛋白(LDL)所含蛋白apoB100氧化修饰的抑制效果,本文采用定性及定量荧光技术对诃子粗提物(CET)及诃子抗氧化有效部位-乙酸乙酯相(EAFT)抑制LDL所含蛋白apoB100氧化修饰的抑制效果进行了研究。结果表明,CET能显著(P<0.05)抑制apoB100中赖氨酸(Lys)游离氨基活性降低,显示出相应的量效关系。在1.25~5.00 μg/mL浓度范围内,EAFT对Lys游离氨基活性衰减具有较显著抑制效果(P<0.05);在5~15 μg/mL浓度范围内,EAFT对Trp荧光淬灭具有显著抑制作用(P<0.05);在5~15 μg/mL浓度范围内,EAFT对总荧光产物及脂褐素的生成也具有显著的抑制作用(P<0.05);三维荧光光谱也直观地表征出EAFT对LDL氧化过程中Peak A所代表的本底物质减少及Peak B所代表的氧化产物的生成具有抑制效果。本文为后续诃子抑制LDL氧化、抗动脉粥样硬化(AS)功能食品研发提供依据。     

脂质氢过氧化物氧化修饰对大豆蛋白去折叠和复折叠性质的影响

以13-氢过氧化-顺-9,反-11-十八碳二烯酸(HPODE)代表脂质氢过氧化物,采用园二色谱和内源荧光光谱研究不同浓度HPODE氧化修饰对大豆蛋白去折叠和复折叠性质的影响。结果表明:复折叠过程中氧化大豆蛋白结构恢复程度随着大豆蛋白氧化程度的增加而下降;随着蛋白质氧化程度的增加,氧化大豆蛋白ΔGH2O、m以及去折叠分数为50%对应的尿素浓度([Urea]1/2)逐渐下降,表明蛋白质氧化导致大豆蛋白结构稳定性下降;蛋白质氧化还使得大豆蛋白去折叠速率增加,复折叠速率下降。     

蛋白质氧化和翻译后修饰对肉品质的影响及机制研究进展

动物屠宰后,肌肉向可食肉转变的过程中涉及一系列的生化变化,它们相互影响并决定了肉的品质.其中氧化应激引起的蛋白质氧化以及蛋白质翻译后修饰对肉品质的形成具有重要影响,但鲜见对其机理系统的深入总结报道.本文综述了氧化应激与蛋白质氧化的关系,总结了动物屠宰后蛋白质氧化和翻译后修饰对肉的嫩度、持水性、肉色和营养价值等品质形成的...     

蛋白质氧化对肉食用品质影响的研究进展

肉品质变化的内部因素从理化方面而言主要包括脂肪氧化以及蛋白质氧化,其中蛋白质氧化是近年来研究的热点.本文首先分析了肉蛋白质氧化机理(蛋白质的共价修饰)和蛋白质氧化表征(羰基化、巯基化以及交联等氧化修饰类型);其次从可能的微观机理到宏观外在表现来说明蛋白质氧化对肉食用品质的影响;最后提出了在蛋白质氧化领域一些目前还未研究...     

恒温超声辅助提取丁香总多酚工艺优化及其对低密度脂蛋白氧化修饰过程中荧光的抑制

低密度脂蛋白(LDL)氧化是引起动脉粥样硬化(AS)的一个主要原因,为了探索恒温超声辅助技术对丁香总多酚的提取效果,及对LDL氧化修饰过程中荧光的抑制,本文采用该技术首先对丁香总多酚提取工艺进行了优化,进而分析其对LDL氧化修饰过程中荧光的抑制效果。结果表明,恒温超声辅助提取丁香总多酚最佳工艺条件为:超声功率270 W、超声频率80 k Hz、超声时间30 min、超声温度50℃、料液比1∶30、乙醇浓度60%,此条件下所提取的总多酚含量为(0.301±0.0043)g/g。通过最优工艺得到的丁香总多酚提取物能有效抑制LDL氧化修饰过程中Trp淬灭、总荧光产物及脂褐素的产生,且抑制效果与浓度成正比,呈现出良好的量效关系。该研究为后续将丁香总多酚研发成抑制LDL氧化功能食品提供依据。      

鸡蛋黄低密度脂蛋白理化及加工特性研究进展

鸡蛋黄中的低密度脂蛋白(LDL)是纳米级球形大分子物质,密度为0.982 g/m L,主要存在于卵黄浆质部分,由蛋白质与脂质(中性脂、磷脂和胆固醇)组装而成,脂质是LDL的主要组成成分,占其干重的87%,蛋白质仅占12%。LDL脱脂之后的成分为脱辅基蛋白,通过SDS-PAGE得到鸡蛋黄LDL中5个主要的脱辅基蛋白,相对分子质量分别为15 000、60 000、65 000、80 000和130 000,关于鸡蛋黄LDL中脱辅基蛋白的研究主要集中在其分泌转运方面。目前研究结果表明,这些脱辅基蛋白大部分都是由母鸡血液中极低密度脂蛋白(VLDL)的脱辅基蛋白Apovitellenin I和Apolipoprotein B转运而来。LDL具有较好的乳化活性,也被用于动物精液冷冻保存。将针对LDL的理化性质及加工特性的研究进展展开论述。     

Heat-Induced Gelation of Hen's Egg Yolk Low Density Lipoprotein (LDL) Dispersion

The heat-induced gelation of hen's egg yolk low density lipoprotein (LDL) dispersion (3.5%) was studied in comparison with ovalbumin (OV) and bovine serum albumin (BSA). Stable gels of both OV and BSA were formed only at the narrow pH regions, but LDL gels obtained at every pH between 4 and 9 were stable. The presence of large amounts of salts decreased the rigidity of both OV and BSA gels, especially on the acid side of the isoelectric point of the proteins, but did not affect that of LDL gels at every pH tested. The results indicated that the heat-induced LDL gels were more stable than those of OV and BSA under various environmental conditions.     

自制研发奶粉对ox-LDL诱导平滑肌细胞增殖的影响

研究自制研发的中老年心血管奶粉对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌细胞增殖与NO释放量的影响。用ox-LDL诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖,建立VSMC增殖模型,通过比较自制奶粉与3种常见市售奶粉对模型细胞的增殖抑制作用和NO释放量的数据结果,评价实验室自制研发奶粉的功效。结果表明,30μg/mL的ox-LDL作用VSMC 24 h可极显著的促进细胞增殖并抑制NO的释放(p0.01),说明模型构建成功;在此VSMC增殖模型中分别添加奶粉样品,得出自制奶粉在200、400、800μg/mL均能抑制ox-LDL诱导的VSMC的增殖,且在400μg/mL的抑制作用极显著(p0.01),并均能极显著的促进NO的释放(p0.01)。说明自制研发的中老年心血管奶粉能够抑制ox-LDL诱导的VSMC增殖模型,具有较好的预防动脉粥样硬化的功效。     

菊苣酸对蛋白质氧化损伤的作用

目的：评价菊苣酸对自由基诱导蛋白质氧化损伤的影响。方法：采用Cu2＋/H2O2和2,2’-偶氮二（2-甲基丙 基咪）二盐酸盐（2,2’-azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride,AAPH）两种不同的自由基诱导体系,分别 诱导牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）、小鼠肝脏蛋白和脑蛋白氧化损伤,研究菊苣酸对蛋白氧化损 伤的影响;通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹法检测蛋白氧化损伤程度。结果：菊苣酸在 100～1 000 μmol/L浓度范围内能够抑制Cu2＋/H2O2诱导的BSA氧化损伤;低浓度菊苣酸对Cu2＋/H2O2诱导的小鼠肝脏 蛋白和脑蛋白氧化损伤具有保护作用,但在高浓度时表现出促氧化作用;在AAPH诱导体系中,菊苣酸对3 种蛋白 模型均具有保护作用,且菊苣酸浓度越高保护效果越好。结论：在Cu2+/H2O2和AAPH两种诱导体系中,菊苣酸对蛋 白质氧化损伤表现出不同的作用效果。     

Heat Gelling Properties of Hen's Egg Yolk Low Density Lipoprotein (LDL) in the Presence of Other Protein

Ovalbumin (OV), bovine serum albumin (BSA) and lysozyme (Lys) were added to egg yolk low density lipoprotein (LDL) and the heat-induced gel formation of LDL-protein mixture was studied. The gel formation of LDL-protein mixture was different between the acidic and alkaline pH region; fine stable gels were formed in the alkaline pH region, but weak paste-like gels were formed in the acidic pH region. The effect of added BSA or OV on the gel strength of LDL was much larger than that of Lys. Scanning electron micrographic observation showed that the microstructures of both LDL-BSA and LDL-OV gels were more uniform than that of LDL-Lys gel.     

On Sodium Chloride Action in the Gelation Process of Low Density Lipoprotein (LDL) from Hen Egg Yolk

Gelation of 40% LDL solution with 1~10% NaCl was inhibited during frozen storage at ?20°C and ?25°C. Frozen storage of LDL solutions with more than 4% NaCl at ?30°C, ?40°C and ?60°C induced the gelation, whereas gelation was inhibited by addition of 1 and 2% NaCl at temperatures lower than ?30°C. Differential scanning calorimetry analyses revealed that when NaCl acts as an inhibitor of gelation, it increased the unfrozen water in the LDL solutions through formation of LDL-water-NaCl complex where the water is hardly frozen; and when it acts as an accelerator of gelation, it promoted removal of water from the complex.