快中子诱变所得黑曲霉变异株UV-11-NF83的特性研究

产糖化酶的黑曲霉(Aspergillus niger)变异株UV-11(AS3.4309),通过快中子处理诱变,获得一株具有高活力糖化酶的新变异株UV-11-NF83,产酶活力从3600u/ml提高到7000u/ml。培养基配方为玉米粉:豆饼粉:麸皮=10:4:3时,酶活力达13000u/ml。该变异株产酶pH在3-4之间。它的发酵液不仅具有糖化酶活力高的特点,而且具有a-淀粉酶、酸性蛋白酶、葡萄糖转苷酶低的特点,糖化淀粉的DE值达98％以上。 我们曾报道了“快中子对黑曲霉(Asptrgillus niger)变异株UV-11(AS3.4309)产糖化酶的诱变效应”的研究情况。在这个基础上,我们又用快中子诱变获得了一株比变异株UV-11产酶能力提高90.1%的新变异株UV-11-NF83。现报道如下。     

产柠檬酸黑曲霉菌株的复合诱变选育

为了选育高产柠檬酸菌种,以前期分离到的一株黑曲霉YZ-35为出发菌株,进行了紫外线与硫酸二乙酯(DES)复合诱变研究,得到了一株稳定高效的目的菌株,命名为(Aspergillus niger)YZ-DE-3,该菌株的产酸量达到6.46%,较原始菌株YZ-35提高了50.23%。突变株YZ-DE-3经斜面传代培养5代,产酸遗传特性稳定。     

黑曲霉细胞诱变产菊粉酶菌株选育的研究

从徐州市沛县河口镇秦庄村牛蒡种植基地取得的土壤样本中,筛选出产菊粉酶的菌株,对从土壤中分离到的40株产菊粉酶的各类微生物进行酶活的测定。通过透明圈法初筛及摇瓶复筛,获得产菊粉酶能力较高的霉菌菌株3株,为C122803、D081506和D081513,这3株菌株的酶活分别达到：C122803：1.411U/mL;D081506：1.895U/mL;D081513：1.792U/mL。其中D081506的酶活最高,为1.895 U/mL;对D081506号黑曲霉产菊粉酶菌株进行紫外诱变及LiCl诱变后,得到一株内切型菊粉酶酶活最高的菌株F144131,其酶活力提高到2.025 U/mL,比出发菌株的酶活力提高了20%。     

黑曲霉突变菌株产糖化酶的酶学特性表征

以电子束诱变黑曲霉突变菌株为对象,通过最适pH试验、最适作用温度试验、热稳定性试验、酸碱稳定性试验和金属离子对糖化酶活力影响的试验,探明黑曲霉电子束突变菌株产糖化酶的酶学特性。结果表明:突变菌株产糖化酶酶最适作用温度为63℃,且最高酶活较原始菌株提高26%,在80℃原始菌株所产糖化酶失活时,仍有8.4 kU/mL酶活剩余,突变菌株所产的糖化酶的热稳定性明显提高。突变菌株所产糖化酶最适pH为4.6,且最高酶活较原始菌株提高24%,在原始菌株所产糖化酶失活时仍有6.9 kU/mL酶活剩余,突变菌株糖化酶的pH稳定性有着明显提高。K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺可在一定程度上增强其活力;Ag⁺、Fe²⁺、Cu²⁺则在不同程度上抑制糖化酶活力;Zn²⁺、EDTA对其酶活力影响较小或无明显现象。     

黑曲霉固态发酵产糖化酶的研究

以糖化酶活力为评价指标,对1株黑曲霉变异株固态发酵产糖化酶的培养基组成和发酵条件进行了研究,分别考察了碳源、氮源、原料粉碎度、培养基含水量、温度、起始pH值、发酵时间、接种量等对该菌株固态发酵产糖化酶的影响.结果表明,该菌株产糖化酶的最佳发酵培养基组成为:麦麸:豆饼粉=3:1,(NH4)2SO4含量为3%,K2HPO40.1%.原料粉碎度为过60目筛,起始pR5.0,培养基含水量为120%,培养温度为32℃,接种量为每瓶培养基接108/mL的孢子悬液2.5mL,培养时间为72h,最高产酶活力达17800U/g.     

产果胶酶菌株——黑曲霉的复合诱变及产酶条件研究

以产果胶酶菌株——黑曲霉YQ-13为出发菌株,通过紫外与氯化锂复合诱变反复处理,最终获得1株能够稳定遗传的突变菌株YQY-36,其果胶酶活力为67.6 U/m L,比出发菌株提高了2.44倍。应用PlackettBurrman设计筛选主要影响因素,通过最陡爬坡试验确定中心点后用响应面法对突变菌株YQY-36的发酵培养基进行优化。优化后培养基成分(g/L)是:桔皮粉42.5,葡萄糖5.0,蛋白胨28.5,(NH_4)_2SO_415.0,Na_2HPO_4·12H_2O 1.7,KH_2PO_41.4,Zn SO_4·7H_2O 0.5。优化培养基后果胶酶活力达92.1 U/m L,比优化前提高了36.2%。     

紫外线和He-Ne激光诱变产植酸酶黑曲霉菌株的研究

采用He-Ne激光（波长632nm,功率10mW）和紫外线对植酸酶产生菌黑曲霉Px的孢子和原生质体进行诱变。结果表明:原生质体对紫外线诱变的耐受能力比孢子强,而对He-Ne激光诱变的耐受能力比孢子弱。经诱变后筛选出一株突变菌株L2-2,植酸酶产量为9274IU/mL,是出发菌株的1.51倍,传代实验表明该菌株植酸酶产量稳定。      

黑曲霉产糖化酶液态发酵条件研究

以糖化酶活力为指标,通过单因素实验,分别考察了添加物、补料时间和补料量对黑曲霉发酵产糖化酶的影响。通过正交实验,考察了发酵条件对黑曲霉发酵产酶的影响。结果表明,添加0.4%的(NH4)2SO4作为促进剂可使酶活提高17%,最佳补料时间为48 h,补料量6 mL,补料可使发酵周期由原来的96 h延长到120 h;最佳发酵条件为接种量15%,250 mL三角瓶装液量50 mL,初始pH为4.5。     

产高活性糖化酶黑曲霉的筛选工艺研究

以实验室保藏的原始菌株作为诱变的出发菌株,通过紫外线和硫酸二乙酯诱变,获得产酶较高的菌株。经8次传代,酶活较稳定。其中第6代菌株所产糖化酶活为2 773 U/m L,比原菌株的产酶能力提高17.98%。     

黑曲霉F5菌株产高温糖化酶的液体发酵优化分析

实验通过对黑曲霉F5菌株进行了温度、p H值、碳源、氮源、磷酸盐的筛选及正交优化,结果表明,发酵培养基最优条件为:30%马铃薯汁,2%蛋白胨,0.4%磷酸二氢铵,p H4.5,在30℃下发酵培养4 d糖化酶活力达到87.3 IU/m L;糖化酶的最适反应温度为65℃,p H5.0。     

微波诱变选育耐热糖化酶菌株

采用微波诱变糖化酶生产菌株Aspgillus niger 3.4309,用SDS双层梯度平板进行筛选,最终得到比出发菌株糖化酶耐热性提高15～20 ℃的突变株9-1,经多次传代证明该菌株遗传性能稳定.     

黑曲霉液态发酵产糖化酶条件的研究

在工业发酵生产酒精、有机酸、氨基酸等过程中,淀粉液化后的糖化酶作用是必不可少的工序,通过单因素实验考察不同碳源物质、氮源物质、培养温度对黑曲霉菌液态发酵中糖化酶活力的影响。实验结果表明:选取以可溶性淀粉做碳源物质、蛋白胨做氮源物质、29℃恒温培养,可以作为黑曲霉的最适培养条件以获得最大的糖化酶活力。     

黑曲霉AS3.4309产糖化酶条件的研究

对黑曲霉AS3.4309液体曲产糖化酶的培养条件进行了研究.采用糖化力较强的黑曲霉进行液态培养,在单因素试验的基础上,采用4因素3水平正交试验对其产糖化酶的培养条件进行优化.结果表明,该菌株产糖化酶的最优培养基组成为:玉米粉15%,玉米浆7%,麸皮5%,豆粕粉2%,(NH4)2SO4 0.15%:培养条件为:接种量10%,发酵液起始pH4.5,30℃,200 r/min,摇瓶培养7d,最高酶活力达到1294.52 U/g.     

不同碳源对黑曲霉产糖化酶活力的影响

碳源对黑曲霉产糖化酶活力有很大影响。研究可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖和β-环糊精为碳源时,分别对黑曲霉产糖化酶活力的影响。结果表明,可溶性淀粉为碳源时酶活力最高,最高可达350．34±14．06U／ml;其次是葡萄糖;蔗糖和麦芽糖为碳源时酶活力没有显著性差异;乳糖为碳源时酶活力低于蔗糖和麦芽糖;β-环糊精的酶活力最低。不同碳源发酵培养基中生物量研究表明,黑曲霉能充分利用可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖,对乳糖的利用较差,几乎不能利用β-环糊精。     

产生淀粉糖化酶菌株的诱变选育

以黑曲霉vin-1为研究对象,通过紫外诱变（UV）和硫酸二乙酯（DES）两次诱变,获得产酶较高的菌株vin-1-24-72,酶活达到527u／g,比原始菌株提高154％,RDA％值为40％。菌株经过7次传代,酶活较稳定。     

航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究

以麦秸、麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产纤维素酶的条件进行了研究。结果表明,最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8:2,(NH4)2SO4为4%,料水比为1:2;最佳培养条件为:接种量为6%,初始pH值为6.5,培养温度为28℃,培养时间为96h。在以上的培养基和培养条件下,测定滤纸酶(FPA)、羧甲基纤维素酶(CMC)和β-葡萄糖苷酶的活力分别为7.90U/g、24.99U/g、21.74U/g,比出发菌种分别提高了3.0倍、1.66倍、2.24倍。     

航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究

以麦秸、麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产纤维素酶的条件进行了研究.结果表明,最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8:2,(NH4) 2SO4为4%,料水比为1:2:最佳培养条件为:接种量为6%,初始pH值为6.5,培养温度为28℃,培养时间为96h.在以上的培养基和培养条件下,测定滤纸酶(FPA)、羧甲基纤维素酶(CMC)和β-葡萄糖苷酶的活力分别为7.90 U/g、24.99U/g、21.74U/g,比出发菌种分别提高了3.0倍、1.66倍、2.24倍.     

高产柠檬酸黑曲霉菌株的诱变选育

本文报告了高产柠檬酸黑曲霉菌株,从选择合适的出发菌株出发诱变育种试验过程。通过诱变育种,不但能提高黑曲霉产酸能力,而且还改善了菌种的其它性能。     

黑曲霉产糖化酶固态发酵营养条件优化研究

实验以黑曲霉作为出发菌株,采用单因素试验确定黑曲霉固态发酵的最佳的碳源和氮源添加量,选取正交试验L9(33),确定该菌株产糖化酶最佳营养条件.结果表明,糖化酶固态发酵最佳营养条件为麸皮/玉米粉2∶1; (NH4)2SO4 1.0％; K2HPO4 0.2％;水50％.在该最佳营养条件下及发酵温度30℃、发酵5d后,该菌株产糖化酶的活力为11282U/g,比原始培养基提高了21％,本研究可以为工业固态发酵生产糖化酶提供一定的技术依据.     

高产柠檬酸黑曲霉菌株的航天诱变选育及其产酸条件的研究

对在工业生产中有较高性价比的产柠檬酸黑曲霉C9为出发菌株,航天诱变后,进行了透明圈初筛、耐酸度复筛、遗传稳定性和产柠檬酸发酵条件实验.结果表明,选育出的黑曲霉AM-51是一株优良的高产柠檬酸菌株.该菌株的耐酸度能达到16％以上,产酸稳定性良好;以玉米粉为原料,在产酸温度为34℃～37℃、初始pH值为5.5～6.5、发酵时间为70h～96h的条件下产酸率基本稳定.当发酵温度为37℃、初始pH值为6.0、发酵时间为84h时,平均产酸率达16.50％,较出发菌株产酸率(12.80％)提高了22.42％.