蒲公英多糖脱色脱蛋白方法及其降血糖活性研究

以蒲公英为原料,采用超声波辅助法提取蒲公英粗多糖,对其脱色和脱蛋白工艺进行研究,并评价纯化前后多糖的体外降血糖能力。以脱色率和多糖损失率为考察指标,对大孔树脂、活性碳、过氧化氢、壳聚糖的脱色效果进行对比,筛选出最佳的脱色方法;以脱蛋白率和多糖损失率为考察指标,对Sevag法、盐析法、酶-三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)法、酶-Sevag法的脱蛋白效果进行比较,筛选出最优的脱蛋白方法;利用抑制α-葡萄糖苷酶能力评价多糖的体外降血糖活性。结果表明:大孔树脂S-8脱色效果最优,色素脱除率为86.45%,多糖损失率为18.9%;盐析法脱蛋白效果最优,蛋白质脱除率为85.64%,多糖损失率为20.51%。所得精制多糖对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制能力,随着多糖质量浓度的增加,抑制率逐渐增大,当质量浓度为1.0 mg/mL时,抑制率达到76.28%。     

D113树脂对状元豆粗多糖脱色脱蛋白工艺优化研究

为研究D113树脂对状元豆粗多糖的脱色脱蛋白效果及多糖保留能力,引入综合吸附效应指数,并以该效应指数ζ值为指标,比较了10种树脂纯化效果,并对筛选出的D113树脂对工艺条件进行了动态单因素和Box-Behnken Design响应面试验研究。结果表明;室温25℃下,上样质量浓度为4.1 mg/m L,上样p H为5.5,上样流速为1.6 m L/min,上样体积为2.9 BV时,蛋白去除率、脱色率和多糖保留率分别达90.24%±0.87%,86.60%±1.09%和94.07%±1.15%。用30%乙醇配制的1 mol/L盐酸以1.0 m L/min流速洗脱2.5 h后,树脂再生性能良好。该方法操作简单,省时,脱色脱蛋白效果好,可应用连续化工业生产中。     

水飞蓟多糖树脂脱色工艺的优化

通过吸附条件的试验,在7种大孔吸附树脂和3种离子交换树脂中筛选出了对水飞蓟多糖的脱色效果好的大孔阴离子交换树脂D900。进一步通过温度、p H值、多糖溶液浓度对D900树脂进行单因素试验、正交试验,确定了D900大孔阴离子交换树脂的最佳脱色条件,并进行动态操作试验。试验结果表明:采用D900树脂作为水飞蓟多糖的脱色树脂,温度为50℃,p H值为5,溶液浓度为3 mg/m L,上样速率为1 m L/min,上样量为1.5 BV条件下,水飞蓟多糖的脱色效果最好,脱色率达到80.23%,多糖保留率达到85.56%。     

一种淡红侧耳多糖的制备工艺

研究了淡红侧耳多糖的提取工艺条件,并对其进行脱色脱蛋白处理。以单因素实验为基础,采用响应曲面法优化多糖的提取条件;选用大孔阴离子交换树脂D315脱色、Sevage法脱蛋白。建立的淡红侧耳多糖较佳提取工艺条件为提取温度95℃,提取时间3.9 h,固液比(g∶m L)1∶30.6,在此条件下淡红侧耳多糖的平均得率为13.44%;D315的脱色率为81.37%,多糖保留率为82.21%;Sevage法蛋白脱除率为61.39%,多糖保留率为93.29%。经响应面优化及脱色脱蛋白处理,可获得得率高且色素蛋白含量低的淡红侧耳多糖。     

大孔离子交换树脂对菊粉纯化效果的研究

采用树脂法对菊粉粗提液进行脱色、脱蛋白研究。通过静态和动态筛选实验,得出D280与D151两种离子交换树脂组成的串联树脂对菊粉粗提液脱色、脱蛋白效果最好。结果表明:最佳脱色、脱蛋白条件为树脂m(D280)∶m(D151)=2∶1,p H为6.5,流速为3.19m L/min,在此条件下树脂纯化菊粉粗提液的最大体积为28.3m L/(g树脂),粗提液的脱色率、脱蛋白率、菊粉保留率分别为90.1%、88.9%、96.8%。     

树脂法同时脱除虫草粗多糖中色素与蛋白质

引入综合吸附效应指数反映树脂的脱色、脱蛋白以及多糖保留能力,并以该效应指数评价了8种树脂对虫草粗多糖的脱色、脱蛋白效果。结果表明,D113树脂具有理想的脱色、脱蛋白效果。在优化的静态吸附工艺条件下,D113脱色率可达79.5%±1.7%,脱蛋白率达82.2%±1.7%,多糖保留率达75.0%±1.8%。对D113树脂的动态吸附性能研究表明,流速为1.5BV/h,树脂床径高比为1∶15,树脂处理量为8.4mg/mL时,D113脱色率为85.1%±1.9%,脱蛋白率为85.0%±2.0%,多糖保留率为80.2%±2.2%。50%乙醇盐酸溶液以12BV/h流速洗脱1h后,树脂再生性能良好。     

AB-8和D-101大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖

以葡萄糖为标准品,利用大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖,结果表明AB-8大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖的最佳上样浓度为1.0 mg/m L,最佳洗脱浓度为75%乙醇,最佳流速为1.0 m L/min,洗脱液体积为上样的10 BV,玉竹粗多糖的纯度从65.23%提高到78.64%;D-101大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖的最佳上样浓度为0.6 mg/m L,最佳洗脱浓度为50%乙醇,最佳流速为1.0 m L/min,洗脱液体积为上样的10.5 BV,玉竹粗多糖的纯度从65.23%提高到73.79%。AB-8大孔吸附树脂对玉竹多糖的分离纯化效果优于D-101大孔吸附树脂。     

树脂吸附对巴戟天多糖脱色脱蛋白的工艺研究

以脱色率、多糖保留率及脱蛋白率为指标,筛选合适的树脂对巴戟天多糖脱色脱蛋白,并进行静态及动态的工艺研究。确定最佳的工艺条件是:采用D941树脂,室温下(25℃),巴戟天多糖液pH值5.96(原液),以流速2 BV/h进行动态吸附。在此工艺条件下,脱色率为89.87%,多糖保留率81.08%,脱蛋白率50.75%,表明D941树脂具有良好的脱色效果和一定的脱蛋白能力。     

熟地多糖树脂法脱色工艺的研究

比较不同类型的大孔树脂对熟地多糖提取液脱色效果的影响,并确立其脱色的最佳工艺参数。通过静态吸附,比较HP20、DM130、X-5、S-8、D-101、NKA-II 6种不同极性的大孔吸附树脂对多糖提取液脱色效果与含量影响,在相同实验条件下筛选出脱色效果最好的一种树脂并采用正交试验优化其脱色参数,以时间(A),温度(B),药料比(C),振荡时间(D)为考察因素,多糖脱色率(%)和多糖剩余率(%)为指标进行L9(43)正交试验。6种大孔吸附树脂中,DM130大孔吸附树脂对熟地多糖提取液脱色效果最好。通过正交试验发现DM130吸附多糖的最佳参数为:温度30℃,多糖液与树脂体积比4∶1,振荡3 min,反应5 h,脱色效果为74.68%,多糖损失率26.21%。采用DM130型大孔树脂对熟地多糖提取液进行脱色,具有最优的效果。     

D301和LSA-700B大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖

以葡萄糖为标准品,利用大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖,结果表明D301大孔吸附树脂最佳上样浓度为1.3 mg/m L,最佳洗脱浓度为50%乙醇,最佳流速为1.0 m L/min,洗脱液体积为上样的10 BV,玉竹粗多糖的纯度从65.23%提高到82.52%;LSA-700B大孔吸附树脂分离纯化玉竹多糖的最佳上样浓度为0.6 mg/m L,最佳洗脱浓度为75%乙醇,最佳流速为1.0 m L/min,洗脱液体积为上样的10.4 BV,玉竹粗多糖的纯度从65.23%提高到76.43%;D301大孔吸附树脂对玉竹多糖的分离纯化效果明显优于LSA-700B大孔吸附树脂。     

芒果皮渣多糖脱蛋白和脱色工艺研究

探讨芒果皮渣多糖纯化过程中蛋白质和色素的脱除方法。以蛋白质脱除率和多糖保留率为评价指标,比较三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法、Sevage法、HCl法、木瓜蛋白酶法、三氯乙酸+Sevage法、木瓜蛋白酶+三氯乙酸法、木瓜蛋白酶+Sevage法和木瓜蛋白酶+三氯乙酸-正丁醇法对芒果皮渣多糖的脱蛋白效果;以脱色率和多糖保留率为评价指标,在单因素实验的基础上,通过正交实验优化活性炭对脱蛋白后多糖溶液的脱色工艺。结果表明:三氯乙酸-正丁醇法脱蛋白效果最佳,其条件为三氯乙酸-正丁醇与样液体积比2:1、三氯乙酸与正丁醇体积比1:20、振荡时间2 h,此时蛋白质脱除率为90.08%,多糖保留率率为94.40%;活性炭脱色最佳工艺条件为:样液pH3.0,活性炭添加量1.5%,脱色温度50℃,脱色时间75 min,此条件下脱色率为70.98%,多糖保留率为92.77%。本实验筛选的方法切实可行,可用于芒果皮渣多糖的脱蛋白和脱色。     

微波辅助提取花生粕多糖的五种脱蛋白方法研究

通过微波辅助提取法从花生粕中提取多糖,从而探索花生粕多糖脱蛋白的最优方法。以蛋白质脱除率和多糖损失率为指标,比较Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶–Sevag联用法和木瓜蛋白酶–TCA联用法脱除花生粕多糖蛋白的效果。结果显示:木瓜蛋白酶–TCA联用法效果最好,其脱蛋白的最佳条件为木瓜蛋白酶用量0.05 g、酶解温度45℃、酶解反应2 h,采用6%TCA溶液除蛋白1次,此时蛋白去除率为85.83%,多糖损失率为6.44%。     

响应面法优化大孔树脂纯化地黄多糖工艺

为研究大孔树脂纯化地黄多糖的最优工艺条件,以多糖保留率、脱色率、蛋白质脱除率的加权综合评分为指标选择具有较好纯化效果的大孔树脂,在单因素的实验基础上,根据响应面试验来优化地黄多糖的纯化工艺参数。结果表明,以HPD-400和LS-700B型大孔吸附树脂混合纯化地黄多糖效果最好,最佳纯化工艺为:树脂质量比（HPD-400:LS-700B）为1.20,上样浓度6.0 mg/mL,温度30℃,上样速率1.5 BV/h,上柱体积1.5 BV。纯化后的多糖保留率为90.25%,脱色率为83.15%,蛋白质脱除率79.75%,综合评分为84.97%。本研究得到的纯化工艺适用于地黄多糖纯化。     

利用大孔树脂对莼菜多糖脱色的工艺优化

为了研究莼菜多糖的脱色条件,本文以脱色率为主要测定指标,首先对比了不同类型的树脂对莼菜多糖的脱色效果,然后通过树脂种类、脱色温度、脱色pH的单因素实验和正交实验对脱色工艺参数进行了优化。结果表明:采用大孔树脂NKA-9树脂,在脱色温度55 ℃和脱色pH为4的条件下,莼菜多糖溶液的脱色率可达到79.22%,多糖保留率为67.54%,蛋白质去除率为55.75%。该脱色方法工艺简单,效果好,可用于莼菜多糖的脱色。     

拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺优化及体外清除自由基能力

以加酶量、酶解温度、pH值、酶解时间为影响因素,以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,通过正交试验优化拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺,并与三氯乙酸法、等电点法脱蛋白效果进行比较。同时对脱蛋白多糖的体外清除自由基能力进行研究。结果表明,拟目乌贼肌肉多糖脱蛋白最佳工艺条件为:加酶量3.0 g/100 m L、酶解温度53℃、p H 8.2、酶解时间1.5 h。此条件下蛋白脱除率为89.43%,多糖损失率为1.78%,优于三氯乙酸法和等电点法。清除自由基结果显示,多糖质量浓度为10 mg/m L时,酶法、三氯乙酸法和等电点法得到的脱蛋白多糖对羟自由基清除率分别为45.72%、38.72%和25.18%,相应的IC_(50)值分别为12.44、16.37、34.64 mg/m L;对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率分别为68.00%、30.08%和23.10%,相应的IC50值分别为7.62、16.71、28.96 mg/m L。3种脱蛋白方法所得拟目乌贼肌肉多糖清除自由基效果依次为:酶法三氯乙酸法等电点法。     

普洱茶多糖分离及纯化

研究10种树脂对普洱茶多糖溶液色素脱除的效果,比较sevag法、三氯乙酸法、盐酸等电点法对普洱茶多糖的脱蛋白质效果.脱色、脱蛋白后的茶多糖经冷冻干燥、透析后,再用DEAE-52纤维素柱层析分离纯化.结果表明:D101大孔吸附树脂为普洱茶多糖脱色的最佳树脂,脱色率为72.27%,多糖保留率为46.97%,脱蛋白率为71.38%;三氯乙酸的脱蛋白效果最佳,添加2%(体积分数)质量分数为50%的三氯乙酸可脱除95.2%的蛋白质;选择水和NaCl溶液作为洗脱剂的温和条件,DEAE-52纤维素柱水洗脱的多糖得率最高,为51.23%.     

倒卵叶五加多糖脱色工艺研究

采用水提醇沉法提取倒卵叶五加多糖,分别采用双氧水法和大孔树脂法对倒卵叶五加多糖进行了脱色研究.在单因素实验的基础上进行了正交实验,得到双氧水法脱色的工艺条件为:温度60℃,时间3h,pH=10.0,样液比1∶1在该条件下多糖脱色率为84.45％,多糖保留率为90.94％.树脂法脱色的工艺条件为LS-700B树脂,温度45℃,溶液pH=7.0.在该条件下的脱色率达到79.50％,多糖保留率为82.80％,蛋白脱除率达到79.10％.实验结果表明,双氧水法是一种相对较优的脱色方法.     

利用大孔树脂对玉米花丝多糖脱色的研究

采用4种大孔吸附树脂和4种大孔阴离子交换树脂对花丝多糖溶液进行脱色,分析不同树脂的多糖脱色率和多糖保留率。结果发现,大孔树脂AB-8、D392和D315对花丝多糖溶液均具有较高的脱色率和多糖保留率,其中以D315较优,D392和AB-8次之。树脂脱色的最优条件是采用D315,添加量为0.5g/mL,pH6.0,温度45℃;在最优条件下,D315的脱色率达到85.4%,多糖保留率为76.8%;大孔树脂的多糖脱色率在一定程度上与多糖保留率成反比;对多糖脱色效果的评价,以脱色率为主要指标,多糖保留率为次要指标比较合适。     

库拉索芦荟凝胶多糖脱蛋白方法研究

为研究库拉索芦荟凝胶多糖蛋白质的脱除工艺条件,本文以蛋白质脱除率和多糖保留率为指标,比较三氯乙酸(TCA)法、Sevag法、木瓜蛋白酶法、木瓜蛋白酶-TCA联用法、木瓜蛋白酶-Sevag联用法脱除芦荟凝胶多糖蛋白的效果。结果显示,木瓜蛋白酶-TCA联用法效果最好,其条件为酶用量2%、酶解温度60℃、酶解时间1h、pH为6,采用5%TCA除蛋白1次,此时蛋白质去除率为83.4%,多糖保留率为74.9%。不同脱蛋白法对芦荟凝胶多糖的脱蛋白效果有较明显差异,木瓜蛋白酶-TCA联用法是一种有效的芦荟凝胶多糖脱蛋白方法。     

灵芝多糖树脂法脱色工艺优化

利用大孔树脂对灵芝多糖进行脱色。比较10种大孔树脂在脱色方面的性能,以灵芝多糖的脱色率和多糖保留率为考察指标,结果发现D303树脂的脱色效果最佳,通过单因素试验和正交试验对D303树脂的灵芝多糖脱色各种工艺参数进行优化,得到D303树脂静态脱色的最佳参数为在样品上样质量浓度15mg/mL、pH6、脱色温度50℃、脱色时间7h条件下,灵芝多糖溶液的脱色率可达91.89%,多糖保留率75.28%;D303树脂动态脱色的最佳参数为上样流速3BV/h、每毫升树脂上样量150mg,此条件下灵芝多糖溶液的脱色率可达92.01%,多糖保留率71.85%。研究表明D303树脂适合应用于灵芝多糖的脱色工艺。