响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究

以核桃分离蛋白为原料,用Neutrase 0.8L酶解制备高活性的ACE抑制肽.采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定酶解多肽的ACE抑制率,同时以水解度和ACE抑制率为考查指标,通过单因素试验及响应面试验设计,优化了中性蛋白酶（Neutrase 0.8L）酶解核桃分离蛋白的酶解工艺.结果表明：各因素对水解度的影响顺序为pH〉温度〉E/S,对ACE抑制率的影响顺序为pH〉E/S〉温度;最佳酶解工艺条件为：pH 6.81、温度55℃、时间2h、底物质量浓度2%、酶与底物比3.43%,酶解产物的水解度达到8.52%,ACE抑制率达到67.94%.     

蛋清源ACE抑制肽结构鉴定及其稳定性

利用碱性蛋白酶酶解蛋清制备活性肽,采用交联葡聚糖凝胶色谱初步纯化具有血管紧张素转化酶抑制活性的组分,高活性组分通过液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱(LC-QTRAP)对纯化组分进行结构鉴定得到19个活性肽。分别对其中3个活性肽DHPFLF、HAEIN和QIGLF进行化学合成及活性测定,其中QIGLF的ACE抑制活性较高,IC50为75.00μM,对胃蛋白酶和胰蛋白酶具有较强的抗酶解能力。     

用2709碱性蛋白酶水解醇洗花生蛋白制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽

采用2709碱性蛋白酶水解醇洗花生蛋白制备ACE抑制肽。以短肽得率、水解度和ACE抑制率为指标,通过单因素和响应面优化设计获得最佳酶解工艺条件:p H 9.3、酶解温度50℃、时间150 min、加酶量3 000 U/g和底物浓度4%,在最佳酶解条件下,短肽得率为77.89%,水解度为17.87%,ACE抑制率为76.26%。结果表明:适当的酶解时间和温度能提高短肽得率和ACE抑制率,但酶解时间过长,过度水解会使短肽失去ACE抑制结构,降低ACE抑制率。     

Alcalase水解泥鳅蛋白制备降压肽工艺研究

以泥鳅肉水解产物对血管紧张素转化酶（ACE）的抑制率、水解度（DH）以及水解产物的肽含量为指标,从碱性蛋白酶、碱性内切酶（Alcalase）、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶5种酶中筛选出碱性内切酶作为酶解泥鳅蛋白制备降血压肽的最适水解酶。在单因素试验基础上,采用响应面实验对该酶的酶解条件进行优化,得出最佳水解条件为：时间60min,pH 8.1,温度45℃,酶底物比（E/S）1 900U/g,固液比1∶15。在该条件下水解,得到酶解物的ACE半抑制质量浓度IC50值为0.22mg/mL。 更多还原     

Alcalase酶解芝麻蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

以芝麻蛋白为原料,采用酶解法制备血管紧张素转化酶(Angiotensin I-Converting Enzyme,ACE)抑制肽。通过比较Alcalase酶、碱性蛋白酶2709、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶的酶解结果,筛选出Alcalase酶作为制备ACE抑制肽的工具酶。通过单因素试验,分析了时间、p H、加酶量、温度及底物浓度对短肽生成率和水解度的影响。基于单因素试验结果,固定加酶量为3 000 u/g和底物浓度为3%,以短肽生成率和ACE抑制率为考察指标,通过响应面优化试验确定Alcalase的最佳水解条件为:时间147 min,p H 8.24,温度55℃。在此条件下短肽生成率和ACE抑制率分别为75.27%和70.80%,IC50值为1.004 mg/m L。     

响应面法优化酶法制备酪蛋白糖巨肽的工艺条件

采用Minitab方法设计实验,对影响酪蛋白糖巨肽制备的酶解因素进行优化,发现酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶与底物比是影响酶解酪蛋白的主要因素.由于唾液酸是酪蛋白糖巨肽的特征性组分,本文以唾液酸的含量表征酶解上清液中酪蛋白糖巨肽的含量.根据Minitab分析的结果,采用Design Expert软件中水平设计和响应面分析法对影响酪蛋白糖巨肽产量的主要因素进行优化,建立唾液酸含量A580对酶解主要条件的二次回归模型,其回归方程的决定系数达到了0.962,9.得到的最佳酶解条件为：酶解时间80,min,酶解温度42.5,℃,酶解pH 6.28,酶与底物比270,U/g.唾液酸含量A580最高为0.653,此时酪蛋白糖巨肽的得率为17.91 mg/g.     

超声辅助酶解谷朊粉制备ACE抑制肽工艺优化

以谷朊粉为原料,采用超声辅助碱性蛋白酶酶解制备ACE抑制肽,并对碱性蛋白酶酶解条件进行单因素分析及正交试验设计,确定最优的水解工艺条件.研究结果表明:超声波作用能够提高酶解的水解度和抑制率,同时能够缩短酶解的反应时间.各因素对水解度的影响顺序为:超声功率>酶浓度>温度>时间;最佳酶解工艺条件为:酶浓度为30 mg/g、功率为250 W、时间为60min、温度为50℃,此时水解度为14.64%,抑制率为80.37%.     

酶法制备玉米胚芽ACE抑制肽的研究

血管紧张素转化酶(ACE)是引起高血压的重要因素,研究一种安全有效的ACE抑制剂十分迫切。以玉米胚芽蛋白为原料,优化玉米胚芽ACE抑制肽的制备工艺。通过单因素试验研究了酶种类、酶解时间、底物浓度、pH值、加酶量、温度对酶解产物水解度和ACE抑制率的影响,选择风味酶为后续试验用酶。在单因素试验的基础上,依据Box-Benhnken原理进行三因素三水平的响应面试验,结果表明影响ACE抑制率的3个因素由主到次依次为pH值、温度和加酶量。确定最佳的酶解工艺条件为底物浓度3%、酶解时间120 min、p H 6、温度40℃、加酶量13 300 U/g,此条件下ACE抑制率达到(85.64±0.98)%,与预测值接近。玉米胚芽蛋白ACE抑制肽具有功能因子和天然食物的双重特性,此研究可为降血压药物及相关功能性食品的开发提供理论依据。     

蛋黄非磷肽相对分子质量分布及其营养价值评价

采用蛋白酶水解鲜鸡蛋蛋黄,分离得到卵黄非磷肽,测定了卵黄非磷肽的分子组成,并采用氨基酸比值系数法,分别以鸡蛋蛋白质为标准蛋白,以WHO/FAO氨基酸参考模式为评价标准,对蛋黄非磷肽营养价值进行评价.结果表明:卵黄非磷肽的相对分子质量分布在158～1493之间,其中氨基酸种类齐全,必需氨基酸占总氨基酸量的39%,第一限制性氨基酸为蛋氨酸(Met)+半胱氨酸(Cys),其营养价值高于酪蛋白磷酸肽.     

酪蛋白非磷肽分子组成及其抑制血管紧张素转换酶活性的研究

测定了酪蛋白非磷肽(CNPP)的分子组成,并对酪蛋白非磷肽抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性进行了研究.研究结果表明:酪蛋白非磷肽的相对分子质量分布在226~8 314之间,其中数均相对分子质量253的肽含量最多,约占26.54%,其次是数均相对分子质量603的肽,含量约占25.69%;CNPP具有较强的疏水性,其中碱性氨基酸Lys、H is和Arg的含量为11.29%,芳香族氨基酸Tyr和Phe的含量为13.03%;CNPP对ACE活性具有抑制作用,且具有一定的量效关系,IC50是0.63μmol/L.     

枸杞幼苗对钒胁迫的生理响应和积累特性

在不同的钒（V）胁迫浓度（0、25、50、100和200 mg＆#183; kg -1）条件下,通过40 d盆栽试验,研究了枸杞植株对V积累及V对枸杞叶中细胞膜透性、抗氧化酶活性,以及丙二醛（ MDA）、脯氨酸（ Pro）、叶绿素和可溶性蛋白含量的影响。结果表明,枸杞中各部位V含量分布大小的顺序依次为根＞叶＞茎。随着V浓度增大,过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）活性、叶绿素含量和可溶性蛋白含量等呈先上升、后下降的变化趋势,当 V 胁迫浓度≤100 mg ＆#183; kg -1时,与对照组相比, CAT和POD的活性、叶绿素含量和可溶性蛋白含量分别增大了227.9％、76.2％、40.2％和117.4％;当V胁迫浓度＞100 mg＆#183; kg -1,则分别降低了5.1％、5.8％、22.8％和36.7％。在不同浓度V的处理下, MDA含量、细胞膜透性和 Pro 含量比对照分别增加了13.3％～220.7％、12.4％～76.9％和69.7％～276.3％。可见,低浓度V （＜100 mg＆#183; kg -1）刺激了叶绿素和抗氧化酶活性的增加,促进了植物可溶性蛋白质的合成;高浓度V （≥100 mg ＆#183; kg-1）破坏了叶绿素结构,抑制了抗氧化酶和可溶性蛋白的合成,膜脂过氧化作用和细胞膜透性显著增大,游离脯氨酸含量明显增加。     

肝素化丝素／聚氨酯共混膜的制备及其缓释性能

以自制的非水溶性丝素粉体为载体,将肝素与医用聚氨酯同溶液混合,制备出含有肝素的丝素／聚氨酯共混膜,解决了肝素与聚氨酯同溶液共混成膜时团聚的问题,并利用丝素蛋白良好的吸附和缓释功能,使肝素从共混膜中缓慢释放出来,达到相对长效的抗凝血效果。利用ATR—FTIR分析了肝素加入后丝素粉体、丝素／聚氨酯共混膜的红外光谱的变化,并对共混膜中肝素的缓释性能及共混膜在PBS溶液中浸泡48h前后的形貌变化进行了研究。     

N、S共掺杂碳基高效氧还原催化剂的制备

杂原子掺杂碳基氧还原（ORR）催化剂具有代替Pt基催化剂的巨大潜力。以硫掺杂g-C₃N₄（S-doped g-C₃N₄, S-g-C₃N₄）作为硫源和氮源,以三嵌段共聚物P123作为碳源,通过简单的高温热解法成功制备了N、S共掺杂碳（N, S co-doped carbon, NSC）催化剂,并考察了热解温度对制备的NSC催化剂ORR性能的影响。材料表征结果显示:温度为1 000 ℃时制备的催化剂NSC-1000具有较高的氮含量和硫含量及最大的比表面积;电化学测试结果显示:NSC-1000具有最佳的ORR性能,在0.1 mol/L KOH溶液中半波电位（half-wave potential, E1/2）高达0.888 V,且经10 000圈循环伏安扫描后E1/2仅负移12 mV,表现出极佳的活性和稳定性。此外,旋转环盘电极测试结果显示:NSC-1000催化剂主要以四电子反应路径催化ORR的发生。本实验为制备N、S共掺杂碳基高效ORR催化剂提供了新的思路。     

聚氨酯改性聚砜的合成及性能研究

用双酚A(Bis-A)和4,4′-二氯二苯砜(DCS)合成羟基封端的聚砜预聚体,用甲苯二异氰酸酯(TDI)、聚丙二醇(PPG)、2,2-双(羟甲基)丙酸(DMPA)合成异氰酸酯基封端的聚氨酯预聚体,再将两种预聚体共聚,制备出了改性聚砜.通过改变原料配比、浓度、反应温度和反应时间,测定产物的特性黏度,确定出了共聚改性的最佳条件为:反应温度80℃、反应时间6h,聚砜预聚体和聚氨酯预聚体质量比4∶1.将改性共聚物通过相转变法制备成超滤膜,测试膜的机械性能、分离性能以及抗污染性能.经测试改性聚砜膜,相比未改性膜,其断裂伸长率提高3.9%,抗张强度减少1.75N/mm2,纯水通量提高4.36mL·cm-2·h-1,水接触角减少13.2°,蛋白吸附量减少71.9μg/cm2.     

基于α,α-二苯基-4-哌啶甲醇的铬（Ⅵ）光化学敏感膜

Cr（Ⅵ）对固定于聚氯乙烯（PVC）膜中的新试剂α,α-二苯基-4-哌啶甲醇有可逆荧光猝灭作用,研制成测定Cr（Ⅵ）浓度的光化学敏感膜.敏感膜最佳组成为50 mg PVC粉、100 mg癸二酸二异辛脂（DOS）和3.0 mgα,α-二苯基-4-哌啶甲醇（DAC）.在pH=9.6的NH4Cl-NH3H2O缓冲溶液中测定Cr（Ⅵ）,其线性响应范围为（1.0×10^-7-9.0×10^-4）mol/L,检出限为（1.0×10^-8）mol/L,响应时间小于1 min.敏感膜具有良好的重现性、可逆性和选择性,除Fe（Ⅲ）严重干扰外,其它常见阴离子和阳离子不干扰测定.用敏感膜制成的光化学传感器来测定环境水样中Cr（Ⅵ）的含量,回收率为97.6%-108.0%,结果满意.     

60Co-γ射线辐照对转pprI基因烟草抗氧化酶活性的影响

以转pprI基因烟草植株为材料,并以同步培育的非转基因烟草植株为对照,研究了60Co-γ射线辐照对转pprI基因烟草抗氧化酶活性的影响。结果表明,经500 Gy60Co-γ辐照后,转基因和非转基因烟草的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）3种抗氧酶活性以及可溶性蛋白质含量在开始时（0~12 h）都逐渐提高,其中POD的活性则在6 h后达最大值,而SOD和CAT活性在12 h后达到最大值,随后三者活性都逐渐降低。但在500 Gy60Co-γ辐射后相同的时间内,转基因烟草的3种抗氧化酶活性和可溶性蛋白质含量均比非转基因烟草高,SOD、POD、CAT和可溶性蛋白质含量的峰值分别是非转基因烟草峰值的1.1290、1.9690、1.5840和1.9521倍,表明pprI基因提高了烟草在500 Gy60Co-γ辐照下SOD、POD和CAT等抗氧化酶的活性水平,从而提高了转基因烟草对辐射的耐受能力。     

超滤和纳滤集成膜技术纯化蒸汽爆破秸秆木聚糖酶酶解液

为掌握蒸汽爆破秸秆木聚糖酶酶解液的超滤脱色和纳滤浓缩的集成膜技术,研究了两支不同截留相对分子质量的超滤膜脱除色素的工艺,测定了膜通量数据并取样检测色值和还原糖含量,得到脱色率和还原糖回收率,优选一支超滤膜用于脱色;采用截留相对分子质量为150的纳滤膜浓缩超滤工艺的透过液,提高糖液浓度.集成膜工艺的脱色率达到63.6%（对原料液的色值）,总还原糖回收率达到92.1%（对原料液的还原糖）,说明超滤和纳滤集成膜技术可以脱除蒸汽爆破秸秆木聚糖酶酶解液内的色素,提高糖液的浓度,并且膜通量较高.     

N-苯基碳酰胺酸甲酯的合成

研讨了N-苯基甲酰胺酸甲酯（MPC）的新颖合成,整个合成分为两步完成：①起始原料尿素与苯胺在无溶剂存在下反应合成N,N′-二苯基脲（DPU）,通过实验确定最佳工艺条件为：反应温度170℃;n（苯胺）∶n（尿素）=5∶1;反应时间1.5h,N,N′-二苯基脲粗产物经重结晶法纯化,产率可达96.3%;②N,N′-二苯基脲与甲醇在高压反应釜中（氮气保护）无其它溶剂存在下醇解反应合成N-苯基碳酰胺酸甲酯。经过实验优化确定反应工艺条件为：反应温度170℃,n（N,N′-二苯基脲）∶n（甲醇）=1∶10,反应时间4h。粗产物经柱色谱分离提纯,N-苯基碳酰胺酸甲酯的分离产率可达83.7%。所有产物的分子结构经1 H NMR,13C NMR以及IR光谱表征。     

三硅氧烷季铵盐表面活性剂的制备及其表面活性

1,1,1,3,5,5,5一七甲基三硅氧烷（HMTS）和烯丙基缩水甘油醚（AGE）在铂催化下经硅氢加成反应制得环氧基三硅氧烷（ETS）,再将其和四甲基乙二胺（TMDEA）进行开环反应制得一种新型表面活性剂——三硅氧烷季铵盐表面活性剂（TQAs）．用IR对TQAs的结构进行了表征,并对TQAS的界面性能和发泡性能进行了研究．结果表明：TQAS溶液的临界胶束浓度（cmc）为0．7g·L^-1,临界胶柬浓度时的表面张力（γCMC）为26．4mN·m^-1．质量分数为0．1％的TQAS水溶液的发泡力为2．20,5min的稳泡性为0．167,TQAS产生泡沫后泡沫易消失．