高产柠檬酸黑曲霉菌株的诱变选育

本文报告了高产柠檬酸黑曲霉菌株,从选择合适的出发菌株出发诱变育种试验过程。通过诱变育种,不但能提高黑曲霉产酸能力,而且还改善了菌种的其它性能。     

黑曲霉细胞诱变产菊粉酶菌株选育的研究

从徐州市沛县河口镇秦庄村牛蒡种植基地取得的土壤样本中,筛选出产菊粉酶的菌株,对从土壤中分离到的40株产菊粉酶的各类微生物进行酶活的测定。通过透明圈法初筛及摇瓶复筛,获得产菊粉酶能力较高的霉菌菌株3株,为C122803、D081506和D081513,这3株菌株的酶活分别达到：C122803：1.411U/mL;D081506：1.895U/mL;D081513：1.792U/mL。其中D081506的酶活最高,为1.895 U/mL;对D081506号黑曲霉产菊粉酶菌株进行紫外诱变及LiCl诱变后,得到一株内切型菊粉酶酶活最高的菌株F144131,其酶活力提高到2.025 U/mL,比出发菌株的酶活力提高了20%。     

亚硝基胍诱变选育酸性蛋白酶产生菌

利用亚硝基胍对野生黑曲霉DH-010进行诱变，使用自制的培养基筛选出10株对羊毛细化具有效果的菌株，又通过摇瓶复筛出一株对羊毛细化具有明显效果的菌株并命名为DH-C40。同时设计了一种以羊毛作为底物的酶活力测定方法，用此法筛选出的菌株的最高产酶活力可以达到620μg／ml。     

高产柠檬酸黑曲霉菌株的航天诱变选育及其产酸条件的研究

对在工业生产中有较高性价比的产柠檬酸黑曲霉C9为出发菌株,航天诱变后,进行了透明圈初筛、耐酸度复筛、遗传稳定性和产柠檬酸发酵条件实验.结果表明,选育出的黑曲霉AM-51是一株优良的高产柠檬酸菌株.该菌株的耐酸度能达到16％以上,产酸稳定性良好;以玉米粉为原料,在产酸温度为34℃～37℃、初始pH值为5.5～6.5、发酵时间为70h～96h的条件下产酸率基本稳定.当发酵温度为37℃、初始pH值为6.0、发酵时间为84h时,平均产酸率达16.50％,较出发菌株产酸率(12.80％)提高了22.42％.     

纤维素酶产生菌黑曲霉的选育及其产酶条件的研究

进行优良纤维素酶高产菌株的选育,并研究其发酵条件.以黑曲霉菌株S1为原始出发菌株进行紫外诱变,经过单因素实验和正交实验优化突变菌株的产酶条件.获得一株高产纤维素酶黑曲霉(Aspergillus niger)菌株S12,其最佳产酶条件为:在pH6.0、培养温度28℃、培养时间96 h条件下;秸秆粉2.5 g、麦麸2.5 g、1%(NH4)2SO410mL.在此条件下,滤纸酶活力为3.79 IU/mL,羧甲基纤维素酶活力19.06 IU/mL,β-葡萄糖苷酶活力47.33 IU/mL,其酶活分别是原始菌株的1.20倍、1.70倍和1.13倍.     

航天诱变黑曲霉ZM-8发酵玉米秸秆粉产β-葡萄糖苷酶的培养基组分优化

以玉米秸秆粉为主要原料,在单因素实验基础上利用正交实验对航天诱变高产纤维素酶菌株黑曲霉ZM-8产β-葡萄糖苷酶的培养基组分进行了优化。研究结果表明,麸皮添加量(F=32.414>F0.01=6.01)和含氮量(F=13.716>F0.01=6.01)对该菌株产酶的影响达到极显著水平,含水量达到了显著水平(F=4.251>F0.05=3.55)。该菌株产酶的最佳培养基组分为:麸皮添加量为35%,氮源为1.2%的(NH4)3PO4,含水量为250%,接种量为1∶18。在此条件下,β-葡萄糖苷酶活为42.49U/mL。     

航天诱变黑曲霉ZM-8发酵玉米秸秆粉产β-葡萄糖苷酶的培养基组分优化

以玉米秸秆粉为主要原料,在单因素实验基础上利用正交实验对航天诱变高产纤维素酶菌株黑曲霉ZM-8产β-葡萄糖苷酶的培养基组分进行了优化。研究结果表明,麸皮添加量（F=32.414>F0.01=6.01）和含氮量（F=13.716>F0.01=6.01）对该菌株产酶的影响达到极显著水平,含水量达到了显著水平（F=4.251>F0.05=3.55）。该菌株产酶的最佳培养基组分为:麸皮添加量为35%,氮源为1.2%的（NH4）3PO4,含水量为250%,接种量为1∶18。在此条件下,β-葡萄糖苷酶活为42.49U/mL。      

一株耐高温α-淀粉酶产生菌的诱变选育

以一株耐高温α-淀粉酶产生菌DG-4为出发菌株,通过紫外线(UV)诱变,得到菌株DG-4-4,酶活提高了20.4%;通过硫酸二乙酯(DES)诱变,得到菌株DG-4-46,酶活在UV诱变基础上提高了61.9%,比初始出发菌株DG-4提高了95.0%.     

复合酶降解高温蒸煮玉米秸秆研究

利用复合酶在其最优条件下降解高温蒸煮玉米秸秆,确定复合酶降解最优条件:0.8g底物(蒸煮秸秆0.6144g)加入30mlpH4.8柠檬酸缓冲液,调pH4.8,121℃灭菌20min,待冷却,无菌操作下加入20mg纤维素酶、10mg木聚糖酶、6mgβ–葡聚糖酶、1.3mg果胶酶,在50℃、100r/min条件下酶解16h,降解率为70.03%。此法降解率已非常接近玉米秸秆理论降解率(约74%),对玉米秸秆降解研究具有一定参考价值。     

秸秆纤维素降解菌的分离筛选、复合菌系构建及产酶条件优化

该研究采用刚果红染色法和滤纸条崩解法从山西老陈醋源中分离筛选纤维素降解菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定。以滤纸酶活性为筛选指标构建复合菌系,采用单因素试验及响应面试验对其产酶发酵条件进行优化,并评价其对不同秸秆的降解效果。结果表明,筛选出3株纤维素降解菌,编号为J1、J2和J3,分别被鉴定为灿烂类芽胞杆菌（Paenibacillus lautus）、千叶类芽胞杆菌（Paenibacillus chibensis）和窖泥类芽胞杆菌（Paenibacillus vini）。3株菌等比例复配得到最佳复合菌系D,其最优产酶发酵条件为初始pH 7.4,接种量9%,发酵温度40℃。在此优化条件下,滤纸酶活性达到35.10 U/m L,是优化前的1.6倍。复合菌系D对不同秸秆均具有较好的降解效果,且对小麦秸秆的降解率最高,达27.63%。     

产复合酶黑曲霉变异株598的选育研究

出发菌株黑曲霉 10 3,经紫外诱变获得一株复合酶高产菌株 598。简单固体发酵培养 ,其纤维素酶活达 2 80 4 2U/g(干曲 )、蛋白酶活为 15510U/g(干曲 )、果胶酶活 150 4U/g(干曲)、糖化酶活 2 4 77U/g(干曲 ) ,分别比出发菌株 10 3提高 113 9%、2 9 2 %、112 5%、115 4 %。经斜面传代培养 4代 ,产酶性能稳定。本文还对复合酶菌株的初筛方法进行了初步探讨。     

1株产耐热脂肪酶根霉突变株的选育

采用紫外线、硫酸二乙酯、紫外线和硫酸二乙酯复合对实验室保藏的1株高产耐热脂肪酶的根霉SFE-L01菌株进行诱变处理,筛选获得1株突变株UD-23,产耐热脂肪酶活力比出发菌株提高了112.39%,达24 000.00 U/mL。对突变株UD-23的产酶条件及部分酶学性质进行了研究,结果表明,突变株UD-23所产脂肪酶最适作用温度为60℃,且具有良好的热稳定性。条件优化后,该突变株产酶酶活达30 000.00 U/mL,比优化前提高了25%。     

霉菌酸性蛋白酶高产突变菌株9169的选育

对一株宇佐美曲霉进行紫外光、微波和60Co的逐级诱变育种,使酸性蛋白酶产量从2800U/mL提高到7200U/mL.突变株传代多次,产酶性能保持稳定;对突变株与出发株的发酵过程进行了比较研究,发现突变株最大产酶时间提前10h以上,而培养基pH值对产酶有一定影响.     

玉米秸秆制浆

对玉米秸秆进行实验审蒸煮实验,得出了玉米秸秆较适宜的蒸煮工艺条件.     

高产、大分子透明质酸突变菌株NUF-036的选育

对兽疫链球菌NUF-035进行紫外诱变,得到突变菌株NUF-036,使透明质酸的产量从1.8 g/L提高到3.0 g/L,相对分子质量从2.1×10~6提高到3.2×10~6,突变株经多次传代,透明质酸产量及相对分子质量保持稳定.     

无花果曲霉（NRRL 3135）与黑曲霉（AsN 70）植酸酶产酶条件的研究

本文重点进行了无花果曲霉（Ａｓｐ．ｆｉｃｕｕｍＮＲＲＬ３１３５）和黑曲霉（Ａｓｐｎｉｇｅｒ７０）用固体培养法生产植酸酶的对比研究。结果表明：ＮＲＲＬ３１３５与ＡｓＮ７０均可以麸皮为主要原料，ＮＲＲＬ３１３５用缓冲液（ｐＨ４．８）控制ｐＨ，在３０℃±１℃培养８～９，产酶水平为５．２ｕ／ｇ干基；ＡｓＮ７０在不需要缓冲液控制ｐＨ的情况下，３０℃±１℃培养５～６天，其产酶水平可达４５．０ｕ／ｇ干基。     

低聚果糖合成酶──果糖转移酶的部分酶学性质研究

研究从土壤中筛选得到的黑曲霉ＡＳ００２３菌株所产的β－果糖转移酶的一些酶学性质。该酶的最适ｐＨ为５．０，最适温度为５０℃，有较好的热稳定性和较宽的ｐＨ（３．５～１０）适宜范围；并研究了１２种化学物质对酶活的影响和底物的特异性。结果显示，钴离子对该酶有一定的激活作用；底物分子越大其反应速度越慢。该酶的米氏常数Ｋ＿ｍ＝４７ｍｍｏｌ，葡萄糖是酶反应的竞争性抑制剂，其Ｋ＿ｉ＝３３０ｍｍｏｌ．当５０％（Ｗ／ｖ）蔗糖与酶在ｐＨ５．０和５０℃作用１６ｈ时，得到５２％（产物／总糖）低聚果糖。     

玉米秸秆制酒精--秸秆预处理及水解方法的探讨

利用丰富、价廉的玉米秸秆为原料生产酒精已成为必然趋势，而最需要解决的关键问题是玉米秸秆的预处理及水解转化技术。研究结果表明，玉米秸秆先采用蒸汽爆破法或温氧法预处理，使木质素和纤维分离，然后进行酶水解，可使纤维素转化率达85％，再利用酵母发酵生成酒精。     

Optimization of Citric Acid Production from a New Strain and Mutant of Aspergillus niger Using Solid State Fermentation

A new strain of Aspergillus niger isolated from soil and its mutant were used for citric acid production from carob under solid-state fermentation conditions. The parental strain produced 30 g/kg citric acid, while the mutant G4, selected after four rounds of gamma ray irradiation, produced 60 g/kg. Maximum citric acid production was obtained after 7 days of incubation, as the acid production was 34 and 64 g/kg for parental and mutant strains, respectively. The addition of 2% methanol increased citric acid production from the parental strain to 42 and the mutant G4 to 65 g/kg. Trace elements, namely Cu, Fe, and Zn, promoted the production of citric acid as the acid production from the parental strain increased to 46 g/kg and for mutant G4 increased to 73 g/kg after their addition. The optimum spore inoculum concentration for acid production was 10⁷ ml^?1, and the optimum pH was 5 for both parental and mutant strains.     

Optimization of Citric Acid Production from a New Strain and Mutant of Aspergillus niger Using Solid State Fermentation

A new strain of Aspergillus niger isolated from soil and its mutant were used for citric acid production from carob under solid-state fermentation conditions. The parental strain produced 30 g/kg citric acid, while the mutant G4, selected after four rounds of gamma ray irradiation, produced 60 g/kg. Maximum citric acid production was obtained after 7 days of incubation, as the acid production was 34 and 64 g/kg for parental and mutant strains, respectively. The addition of 2% methanol increased citric acid production from the parental strain to 42 and the mutant G4 to 65 g/kg. Trace elements, namely Cu, Fe, and Zn, promoted the production of citric acid as the acid production from the parental strain increased to 46 g/kg and for mutant G4 increased to 73 g/kg after their addition. The optimum spore inoculum concentration for acid production was 10⁷ ml^-1, and the optimum pH was 5 for both parental and mutant strains.