植物病毒样品的超薄切片技术研究

应用超薄切片技术及电镜检测植物病毒在寄主细胞中内含体的形态,是确认病毒的可靠手段之一。然而由于超薄切片的效果与取样及固定处理程序等有直接关系,植物细胞内含物质对观察病毒在细胞中的存在影响很大,目前常规的生物处理程序,对观察病毒在细胞内的形态都不理想,作者近两年在植物病毒样品的前处理上进行了一系列实验研究。样品先经0.1M磷酸缓冲液(pH7.0)处理12小时,再行常规固定、包埋切片程序,获得了明显效果。选三种病毒材料,萝卜(TuMV)、克里夫兰烟(CMV)、蔓陀岁(PXV)。样品采集后,切成1     

HMBA诱导胃癌细胞表面及骨架结构的变化研究

本文研究5mM HMBA(环六亚甲基双乙酰胺)诱导处理人胃腺癌MGc80—3细胞系后,细胞骨架及表面形态结构的变化。扫描电镜观察显示,MGc80—3细胞多呈球型,细胞表面有丰富的微绒毛,边缘有大量的丝状和片状伪足(图1)。经HMBA诱导后,细胞表面变化显著,主要表现在细胞表面微绒毛和边缘伪足的大量减少甚至消失,出现一些突起或皱痕状结构。细胞的形态普遍趋于扁平铺展状,呈现出与人正常胃粘膜原代培养细胞相似的表面形态结构(图2)。细胞骨架整装电镜观察显示,MGc80-3细胞骨架结构松散,分布不均,纤维间常有断开和分叉现象(图3)。经诱导后细胞骨架纤维伸长,纤维结构致密、分布均匀,纤维间联接紧密,并有较多的纤维束状结构(图4),与对照组细胞有着明显差异。     

免疫金法与ABC法在电镜包埋前染色之比较

包埋后免疫电镜术虽能精确定位抗原,但难度大。本文用胶体金标记法与ABC法对人鼻中线恶网瘤组织在树脂包埋前作抗人T细胞免疫染色,并对两种方法进行比较。简述如下:临床活检鼻中线恶网组织,经4％多聚甲醛加1％戊二醛4℃固定,振动切片(50μm),PBS冲洗,在预先硅化的载玻片上作免疫染色:鼠抗人T细胞McAb(Dako公司出品)孵育过夜;金标羊抗鼠抗体(10nm,军科院基础所出品)室温下孵育1小时,再将切片倾入小瓶,经1％锇酸后固定,常规脱水包埋及超薄切片,不作铀铅复     

牦牛毛的电镜观察

中国牦牛是我国青藏高原广大高寒地区的特有家畜,约有1200余万头,占世界总量的85％,其毛与羊毛相近,产量也较大,但因其色泽不佳,至今尚未充分利用。如能对牦牛毛进行深入研究,将是很有意义的。牦牛毛也是高度角化的死细胞,很难得到满意的切片和展示内部结构。用巯基乙醇(0.4M处理30小时)将角朊中胱氨酸的二硫键拆开,使其与四氧化锇(2％处理75小时)反应形成高电子密度,而含硫较少的微纤维被显示出来。经常规脱水,包埋,LKBV型超切机切片,菲利浦EM400ST电镜观察,其结果如图a、b、c、d。图a、牦牛毛横切面,显示两个皮质区,有较多的色素颗粒,核残余物等,鳞片层可分外层。(a层和b层)、内层,a层     

无细胞真皮基质的制备及扫描电镜观察

目的：制备无细胞真皮基质(ADM)及通过扫描电镜(SEM)观察研究所制备的ADM经大剂量辐照后其形态结构是否有改变。方法：用高渗盐溶液除去皮肤的表皮,经十二烷基硫酸钠(SDS)和胰蛋白酶处理去除真皮中的细胞成分,得到ADM。结果：通过SEM观察表明,ADM中细胞成分基本被去除,经20kGy辐照后,胶原纤维排列正常,结构完整。结论：本研究方法能基本去除皮肤中的细胞成分且辐照后不损伤胶原纤维的三维结构,可为临床修复烧伤创面提供良好的移植材料。     

蚕豆末期染色体的立体电镜观察

关于染色体的高层次结构,迄今尚无统一意见。对染色体进行立体电镜观察有助于阐明染色体的结构。我们按常规固定、包埋蚕豆根端分生组织,用LKB-5型切片机切片,经醋酸铀和柠檬酸铅染色,在Hitachi600B型电镜下进行观察,倾斜角为±7°。我们发现,末期染色体横切面中央和周边部位存在着电子密度很低的区域,其中有纤维和颗粒结构(图1,白箭头)。从立体对(图1和2)中可以看出,这些纤维和颗粒分布在低电子密度区中不同平面上,染色体与染色体间物质(黑箭头)也不在一个平面上。末期时染色体中央低电子密度区增大;有的染色体切面是“O”形,其中央低电子密度区是封闭的;     

Ⅰ型糖原储积病患者肝的超微结构改变

糖原储积病Ⅰ型,为遗传性代谢障碍疾病。本文着重报告本病肝细胞超微结构改变特点。材料为2例患儿肝活检标本。经戊二醛、O_SO_4双固定,按电镜样品制备常规脱水、色埋。I_μ薄切片经甲苯胺兰—Pyronin染色,光镜观察定位。超薄切片用铅、铀双染,国产DXB_2-12型电镜观察。光镜下肝细胞明显肿胀,其大小可为正常肝细胞体积2-3倍,排列如植物细胞样(图I)。部分深染肝细胞胞浆内充满致密物,多数肝细胞内脂滴异常增多,其余肝细胞表现程度不同混肿和颗粒性变。电镜下,光镜所见深染细胞为胞质内糖原颗粒大量堆积,其间伴有糖原自噬泡及小泡状滑面内质网(图2),有的肝细胞胞质内大片糖原高度聚集,形成糖原板块(图3),多数肝细胞胞质内脂滴显著增多,脂滴周围常伴随     

Bi基高温超导纤维的结构

高温超导体纤维有重要的应用前景,得到人们很大的重视。本课题组用激光加热基座生长法(LHPG)制备了性能优异的Bi基Bi-Sr-Co-Cu-O及Bi-Pb-Sr-Ca-Cu-O超导纤维,超导的零电阻温度T_(co)为85K及108K,临界电流密度Jc已达到了5150A/cm~2。本文研究了这种超导纤维的结构。图1为材料源棒与激光熔化生长纤维的过渡区,图中S为源棒,G为溶化成纤区。激光束使原晶体熔化,选用适当的仔晶,从熔化区提拉生长出晶休纤维。生成的纤维有很好的取向性,x衍射分析表明,纤维轴向主要是晶体的[001]方向。图2是超导纤维横断面的扫描电镜照片,Bi系超导晶体一般成片状结构,纤维中的晶粒尺度较大,当晶片紧密堆砌时,材料的密度较高,对获得较高的Jc有利,当晶片的取     

芳纶的电镜分析鉴别

对于有待分析鉴别的两种高强度、高模量合成纤维,除进行化学分析和性能测试外,我们亦进行了微观结构分析。因为估计这些纤维可能是芳纶,因此以 Keviar49作为比较的标准样品。待分析样品编号为1,2。分析方法与结果如下:1.外观均为淡黄色。用SEM观察外形,待分析纤维与 Keviar49皆为直径10μm的园截面长丝。2.用超声波将纤维粉碎后,在TEM中观察微观结构。Kevlar49以长微纤为主,另有一些块状物(图1),1 样品与 Kevlar 相同(图2),而2样品中含微纤很少,大部分为块状物(图3)。     

微波辐射固定及其在免疫金标记技术中的应用

应用微波辐射快速固定大鼠胰腺组织和白血病病人骨髓细胞悬液,再按常规制作电镜超薄切片。包埋后超薄切片免疫金标记β细胞中的胰岛素分泌颗粒显示组织细胞结构清晰,标记率高,(图1)。骨髓细胞悬液包埋前免疫金标记和酶反应定位血小板表面糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)和胞浆内过氧化物酶均呈现阳性结果(图2)。电镜观察结果表明,经微波辐射固定的生物样品能较好地保存细胞的超微结构,抗原性及其酶活性。根据多次反复试验,我们取得的经验是,在进行微波辐射固定生物样品时,电镜样品固定温度和时间以26～28℃,15秒为宜。由于微波辐射加热温度升高很快,我们采用在炉室内四角放置四个盛有     

银染活性核仁形成区的透射电镜观察

有活性的rDNA是间期细胞核核仁形成的组织者(Nucleolar Orgnizer Region),也称之为活性核仁形成区(aNOR)。应用常规超薄切片技术一般只能显示核仁的大小和数目,而很难观察到核仁内部的结构。我们改进了前人的方法,建立了悬浮培养细胞银染活性核仁形成区的透射电镜技术,对核仁的超微结构进行了观察。收集悬浮培养于RPMI—1640培养基中的人急性白血病细胞(HL—60),经2.5％戊二醛预固定后,再用Carnoy＇s固定液行后固定,固定后的细胞经离心形成细胞团块,以50％AgNO_3:2％蛋白胶(用1％     

YAG激光手术中的麻醉问题

我们用六只兔和六只大白鼠,在不同的体表部位削去毛后用不同的局麻药作局麻处理,当用输出功率为500毫瓦聚焦YAG激光照射时,均看到动物有肌肉抽搐以至挣脱等反应。此外,从动物心电图上迭加的肌电指标也看到动物的痛觉反应(见图1)。从图1可见,麻醉后用激光刺激时所记录的心电图(图1(5))与未麻醉时用刀割及用激光刺激时所记录的心电图(图1(2)、(3))一样,迭加有较强烈的肌电干扰,表明麻醉后激光照射时动物因仍有痛觉而引起肌肉紧张及抽搐。但麻醉后用刀割(图1(4))时的心电图却     

高分辨电镜放射自显影术及计量方法

高分辨放射自显影(ARG)是作为特殊分子在细胞内或组织内定位的一个好方法。除了改进ARG的方法以外,达到高分辨的最重要途径是定量分析。根据Blackett假想粒的理论,本文改进了他计数用的透明复盖膜并在国内首次设计了计算机数据处理程序。材料与方法电镜GRG用人类白血病HL60细胞与氚标记的烷基溶血磷脂(ALP,ET-18-OCH_3)共同孵育24小时,经常规固定、脱水、包埋、700A超薄切片用铂圈法复盖1:2.6V/V稀释的IlfordL_4核乳胶,呈紫色干涉光为适宜厚度,4℃暗室曝光5个月,用3种不同显影剂显影(图     

印度黄麂细胞骨架系统的电镜研究

细胞骨架决定细胞的形态与运动,并参与多种细胞生理活动。在已研究的多种体外培养的细胞系(株)中,细胞骨架具有很大共性。印度黄麂(Indian Muntjac)转化细胞系是一种在生物学研究上很有应用价值的成纤维细胞,而我们的初步研究表明其骨架纤维在组织及排布上都与已知模式有很大区别。为了更好地在电镜观察中显示细胞骨架系统的空间排布及其纤维的成分和走向,我们主要采取了下述样品制备技术:①对生长于载网及盖片上的细胞用非离子型去垢剂Triton×-100整体提取,在扫描、透射电镜下进行观察,并变换拍摄角度,拍成立体象对。②对生长于塑料培养碟中的细胞经原位包埋后,连同塑料基质一起进行水平的和垂直的定向切片。观察表     

被动吸烟小鼠气管上皮超微结构观察

模拟被动吸烟环境。取成年昆明种小鼠 ,随机分为正常组 ;被动吸烟 1组 (每天吸烟 4ｈ ,共处理 2周 ) ;被动吸烟 2组 (每天吸烟 2ｈ ,共处理 4周 ,之后恢复 4周 )。断椎处死 ,取气管中段 ,透射电镜常规处理。超薄切片 ,醋酸双氧铀 硝酸铅染色。ＪＥＯＬ10 0ＣＸ型电镜观察。观察结果显示 :对照组气管粘膜上皮 ,纤毛细胞管腔面有排列整齐的纤毛 ,纤毛基体清楚。椭圆形的核位于细胞中下部。核仁明显。细胞上部有丰富的线粒体。嵴清晰可辨 ,部分线粒体嵴消失呈空泡。滑面内质网较多 ,少见粗面内质网。胞质呈低电子密度 ,故细胞为浅色 (图 1～图…     

HIPS／TiO2复合材料的电子显微学研究

高抗冲聚苯乙烯树脂(HIPS)在实际应用中,往往要加入着色剂进行着色,钛白粉(TiO_2)是一种通用的白色着色剂。然而着色剂的加入对材料的力学性能有较大影响。本文对着色后的HIPS/TiO_2复合材料进行了电子显微学研究,明确了TiO_2影响HIPS力学性能的原因。 HIPS/TiO_2复合材料超薄切片的透射电子显微镜结果表明,TiO_2在样品中的分布很不均匀,局部区域TiO_2严重堆积(图1a)。扫描电子显微镜对HIPS/TiO_2冲击断面的组成观察得到了同样的结果(图1b。TiO_2在材料内部的堆积区域形成材料力学性能的弱点,材料受外力作用时首先从这些弱点处断裂,     

导电纤维的电子显微镜研究

本文以扫描电镜为主要手段,对目前所研制的几种导电纤维进行了微结构的观察研究,并结合其它测试手段作了有关性能的对比试验。图1,是腈纶导电纤维。它是将腈纶在铜盐及多种具有还原性物质的酸性溶液中进行处理,使腈纶中的腈基与铜盐形成配价键结合而制成的。未改性的腈纶纤维横截面基本上呈圆形。改性后的腈纶导电纤维横截面明显由两     

ZrO2—6mol%Y2O3陶瓷中Y原子的选择成像

本文测定了ZrO2-6mol Y2O3陶瓷中新发现的两种有序相(Y0.25Zr0.75O2-x和Y0.5Zr0.5O2-y)的结构,并确定了能使Y原子亚单胞单独成像的条件.图1(a)是[100]取向的高分辨像(HREM),表明从立方相ZrO2(c-ZrO2)到两种有序相的结构变化.图1(b-d)分别是图1(a)中用字母C,L和O表示区域同一倍数的放大像.图1(a)中嵌入了c-ZrO2(左)和一种新相(右)的电子衍射谱(EDP).对HREM和EDP进行的计算机模拟结果表明,图1(c,d)以及图1(a)中右边嵌入的EDP均不能用c-ZrO2或在c-ZrO2中氧离子沿<001>或<111>方向发生位移的结构来解释.显然,这是新相的高分辨像.     

PAL信号编码误差及其消除

本文系统地分析了在PAL信号编码过程中(图1),各项误差产生的原因、表现形式及经PAL_D解调后(图2)对重现图象的影响,着重阐述了载漏和相位误差;指出了     

环绕声处理电路四例

<正> 本文提供四种环绕声处理电路,它们是:1.三路环绕声输出处理电路(图1);2.两路环绕立体声处理电路(图2);3.二路环绕立体声处理电路(图3);4.四路环绕立体声处理电路(图4)。