乳碱性蛋白的功能特性及应用

乳碱性蛋白（MBP）为牛乳及人乳中痕量功能性物质的混合物，MBP直接作用于骨细胞，帮助骨形成并调节骨吸收。本文将概述了乳碱性蛋白的功能特性及其应用。     

日本推出骨太MBP系列饮料

日本雪印乳业公司向市场推出配有骨太MBP的系列饮料。MBP是含在牛乳及母乳中的微量成分，是一种碱性蛋白，具有增加骨芽细胞数量及提高骨芽细胞胶原的作用，进而促进骨的形成，使骨质紧密、结实。MBP还有调节骨细胞过剩的作用，从而能抑制钙从骨上流失、抑制骨重量下降。     

乳碱性蛋白的生理学功能及应用

乳碱性蛋白(milk basic protein,MBP)是天然蛋白质中的一种组分,为乳清中的痕量成分,对增强骨质有特殊的作用。本文阐述了MBP的生理学功能及应用。      

添加牛奶碱性蛋白牛奶对大鼠骨密度的影响

探讨添加牛奶碱性蛋白(MBP)牛奶对正常大鼠骨密度的影响。将50只SD大鼠分为低钙对照组、碳酸钙、低、中、高5个剂量组。分别采用含钙40,80,96mg/kg及含3.3,6.7,8mg牛奶碱性蛋白,检测体质量、骨密度、骨钙以及钙吸收率等指标。结果表明,各剂量组对大鼠体质量在3个月中未见显著差异;各剂量组大鼠股骨干重、股骨远心端骨密度、股骨中点骨密度、骨钙质量分数均明显高于低钙对照组;高剂量组的钙表现吸收率明显高于碳酸钙对照组。根据《保健食品检验与评价技术规范》推断,添加牛奶碱性蛋白的牛奶产品对大鼠具有增加骨密度作用。     

乳碱性蛋白的生理学功能及应用

乳碱性蛋白(milk basic protein,MBP)是天然蛋白质中的一种组分,为乳清中的痕量成分,对增强骨质有特殊的作用.本文阐述了MBP的生理学功能及应用.     

乳清碱性蛋白对青年女性骨密度及体成分的影响

目的:观察乳清碱性蛋白对健康青年女性全身各部位骨密度及体成分的影响。方法:将84名志愿者分成对照组、纯牛奶组和MBP组,除了对照组外分别用纯牛奶和含40mgMBP牛奶连续干预8个月,试验结束后用DEXA骨密度仪检测全身各部位骨密度和体成分,采集静脉血检测血清总蛋白、胆固醇和血糖等8项血液生化指标。结果:3组受试对象试验后全身BMD均显著高于试验前,牛奶组和MBP牛奶组全身BMD增长百分比高于对照组,但3组比较未见统计学差异,血液生化指标、体脂成分及骨矿含量均未见显著影响。结论:在该试验条件下,未观察到乳清碱性蛋白作用对青年女性骨密度和体成分的影响,同时牛奶对体成分无明显作用。     

不同浓度牛乳铁蛋白对成骨细胞与破骨细胞共培养的影响

研究证实牛乳铁蛋白具有成骨活性功能,既能刺激成骨细胞增殖,也能诱导破骨细胞凋亡。骨骼的生长发育是一动态平衡的生物过程,是通过成骨细胞诱导的骨生成和破骨细胞诱导的骨吸收所调节的。采用成骨细胞MC3T3-E1细胞与破骨前体细胞RAW264.7细胞1∶1的比例直接接触的共培养方式,研究不同浓度(20、100、500μg/m L)的牛乳铁蛋白对共培养中成骨细胞和破骨细胞活性以及破骨细胞骨吸收功能的影响。首先,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测共培养上清中的ALP活性,发现低浓度的牛乳铁蛋白能够抑制成骨细胞的ALP活性,而中高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地促进成骨细胞的ALP活性。利用TRAP活性检测试剂盒及ELISA检测试剂盒,则发现低中浓度的牛乳铁蛋白能够促进破骨细胞的TRAP活性,而高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的TRAP活性和共培养体系RANKL/OPG的比值。最后,通过骨吸收陷窝实验,证实了中高浓度组的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的骨吸收功能。结果表明了高浓度的牛乳铁蛋白在共培养体系中不仅能够促进成骨细胞的活性,并且对破骨细胞具有抑制活性及功能的作用。     

水解蛋黄粉改善鼠骨代谢和生长的研究

以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1、大鼠破骨细胞和大鼠为实验模型,通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨溶蚀陷窝和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)荧光染色等多种骨代谢生化指标,研究源于鸡蛋蛋黄的水解蛋黄粉改善骨代谢的生理作用机制。结果表明:水解蛋黄粉通过促进成骨细胞生长、抑制破骨细胞分化与破坏、提高骨端生长板细胞活性等机制改善骨代谢、促进骨骼生长。     

邻苯二甲酸二丁酯的光敏毒性作用及机制

天然邻苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate,DBP）普遍存在于食药用胶质菌中,其潜在危害已逐渐引起人们的重视,因此,本研究探讨DBP的光敏毒性作用及机制。通过对雄性大鼠灌胃染毒（2 000 mg/kg mb DBP）并利用高效液相色谱检测DBP在大鼠体内分布和代谢情况;此外,检测大鼠肝脏和肾脏组织细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力变化;同时,对大鼠肝脏和肾脏组织的病理切片进行观察。药代动力学实验发现日光能促进DBP转化为邻苯二甲酸单丁酯（mono-n-butylphthalate,MBP）,其中肝脏和肾脏中MBP含量高于其他器官。MBP可以明显升高大鼠肝脏和肾脏中ROS和MDA含量,降低GSH含量和SOD活力,表明MBP会诱导大鼠肝脏发生脂质过氧化反应,引起早期的肝脏损伤。病理切片表明光照能增强MBP对大鼠肝脏和肾脏细胞的损伤程度。结论：DBP是光敏毒性物质,其在食品及包装材料等方面的应用应引起高度重视。     

不同蛋白酶的兔骨酶解液对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用

目的:分别选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶水解兔骨粉,研究兔骨酶解液对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用。方法:通过正交实验用MTT法检测酶解液对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用以筛选得到最佳的酶解条件。结果:胰蛋白酶酶解最佳条件为时间5h、pH8.5、酶与底物比6000U/g、温度50℃、底物蛋白浓度6%;木瓜蛋白酶酶解最佳条件为时间4h、pH5.5、酶与底物比7000U/g、温度65℃、底物蛋白浓度6%;Alcalase碱性蛋白酶酶解最佳条件为时间5h、pH9、酶与底物比6000U/g、温度50℃、底物蛋白浓度6%。其中,木瓜蛋白酶酶解兔骨制得的酶解液对小鼠脾淋巴细胞增殖作用最强,其增殖率为95.70%,胰蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶对小鼠脾淋巴细胞增殖率分别为88.49%、69.22%。结论:三种不同蛋白酶酶解兔骨,其酶解产物对小鼠脾淋巴细胞都有增殖作用。      

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用

目的：从鲫鱼卵中提取唾液酸糖蛋白,研究其对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用,并探究其作用机理。方法：采用切除大鼠双侧卵巢的方法建立骨质疏松症大鼠模型,灌胃鲫鱼卵唾液酸糖蛋白（400 mg/（kg·d））90 d后,分别检测大鼠尿液骨吸收指标（脱氧吡啶啉、钙、磷）、血清骨吸收指标（抗酒石酸酸性磷酸酶、组织蛋白酶K）、血清骨生成指标（骨源性碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型前胶原羧基端前肽）以及血清骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、核因子κB受体活化因子（receptor activator for nuclear factor-κB,RANK）、核因子κB受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL）含量。结果：鲫鱼卵唾液酸糖蛋白能显著降低骨质疏松症大鼠尿液脱氧吡啶啉（P＜0.01）、钙（P＜0.01）、磷（P＜0.01）含量和血清抗酒石酸酸性磷酸酶（P＜0.01）、组织蛋白酶K（P＜0.01）活性,防止大鼠骨吸收;显著降低血清骨源性碱性磷酸酶（P＜0.01）活性和骨钙素（P＜0.01）、Ⅰ型前胶原羧基端前肽（P＜0.01）含量,抑制大鼠高骨转换速率;显著上调OPG（P＜0.01）含量,下调RANKL（P＜0.01）含量,降低RANKL/OPG比值,抑制破骨细胞增殖分化,降低骨吸收。结论：鲫鱼卵唾液酸糖蛋白具有改善去卵巢大鼠骨质疏松症的作用,其作用机理可能与下调RANKL/OPG比值有关。     

黍稷麸皮多糖分离纯化、结构表征及抑菌活性分析

本研究通过对黍稷麸皮多糖进行分离纯化、结构表征,并研究其抑菌活性,旨在为黍稷加工副产物中营养物质的开发利用提供参考。采用碱提醇沉法提取黍稷麸皮多糖(millet bran polysaccharides,MBP),DEAE-50、Sephadex G-100柱层析分离纯化,利用HPLC色谱、红外光谱、原子力显微镜、扫描电镜、X-射线衍射等方法对黍稷麸皮多糖结构进行分析。结果表明,MBP分子量为3.479×10⁴ Da,单糖组成的摩尔比为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖:木糖=0.11:0.13:5.86:0.62:1.00:0.52,是β型吡喃多糖。MBP具有良好的热稳定性,在形态结构方面呈片层状,连接紧密,不具备晶体结构。抑菌实验得出,MBP对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2 mg/mL。综上,从黍稷麸皮中提取得到的多糖MBP具有良好的抑菌能力。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松症的实验研究

用切除大鼠卵巢方法建立骨质疏松症模型，研究大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用。结果表明：大豆异黄酮明显增加去卵巢大鼠骨密度，改进子宫指数和血清雌二醇水平及明显降低碱性磷酸酶活性，从而降低骨的转换率和增加骨密度。     

双酶复配同步提取鸭骨素工艺条件

实验以可溶性固形物含量为测定指标,在鸭骨素提取过程中,研究了碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶复配后同步酶解鸭骨的工艺,优化了复合酶的最佳配比和酶解工艺参数。通过采取双酶(碱性蛋白酶-中性蛋白酶)同步提取的方法,和通过正交试验,优化了双酶添加比例、加酶量、酶解温度、酶解时间和液料比对鸭骨素得率的影响。结果表明,当双酶比例(碱性蛋白酶∶中性蛋白酶)为4∶1,加酶量为2%,酶解温度为60℃,酶解时间为4h,液料比为60g/100g时,在此最佳工艺条件下制得的酶解液中总可溶性固形物含量为32.2%,提取效果最佳。     

具有抗氧化活性的骨蛋白肽水解条件优化的研究

对骨蛋白水解物的水解条件进行优化,并对其不同水解条件下水解物的抗氧化性进行了研究。本实验采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶三种酶,分别选择2%、5%和7%的骨蛋白底物浓度,酶与底物浓度比（[E]/[S]）分别采用0.5∶100、1∶100、1.5∶100、2∶100对骨蛋白进行水解,用pH-Stat法测定其水解度,并且将水解物应用于卵磷脂脂质氧化体系中,测定其TBARS值,研究其抗氧化性。通过测定三种酶水解产物的水解度以及在Liposome体系中的TBARS值,表明碱性蛋白酶的酶解产物具有较高的水解度和抗氧化活性,故选择碱性蛋白酶对骨蛋白进行水解;通过测定不同底物浓度、不同的[E]/[S]的酶解产物的水解度和TBARS值,得出底物浓度为7%;[E]/[S]为1∶100的酶解产物具有较高的抗氧化能力。      

酶解提取鸡鲜骨骨素工艺研究

采用正交试验法研究酶解提取鸡鲜骨骨素工艺,以操作简单、符合企业实际情况的可溶性固形物检测指标为测量指标,确定了碱性蛋白酶酶解提取鲜骨骨素工艺条件:温度60℃,时间3h,加酶量0.16%,加水量120g/100g样品。     

pH值对含机械浆浆料白度的影响

用含机械浆浆料造纸时,所得纸页期望白度偏低,因为机械浆中木素在碱性（来自碳酸钙）条件下会变黄,采用微酸性或中性造纸可使黄色减至最小。加拿大造纸工作者研究了浆料pH值、温度和贮存时间对含TMP浆料白度的影响,证实了纸机白水对抑制含机械浆浆料白度降低起一定作用。     

具有抗氧化活性的骨蛋白肽水解条件优化的研究

对骨蛋白水解物的水解条件进行优化,并对其不同水解条件下水解物的抗氧化性进行了研究.本实验采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶三种酶,分别选择2%、5%和7%的骨蛋白底物浓度,酶与底物浓度比([E]/[S])分别采用0.5:100、1:100、1.5:100、2:100对骨蛋白进行水解,用pH-Stat法测定其水解度,并且将水解物应用于卵磷脂脂质氧化体系中,测定其TBARS值,研究其抗氧化性.通过测定三种酶水解产物的水解度以及在Liposome体系中的TBARS值,表明碱性蛋白酶的酶解产物具有较高的水解度和抗氧化活性,故选择碱性蛋白酶对骨蛋白进行水解;通过测定不同底物浓度、不同的[E]/[S]的酶解产物的水解度和TBARS值,得出底物浓度为7%:[E]/[S]为1:100的酶解产物具有较高的抗氧化能力.     

乳清中乳碱性蛋白的分离与纯化

利用离子交换和葡聚糖凝胶层析等技术从制作干酪的副产物乳清中提取乳碱性蛋白。分别以洗脱速度、洗脱温度、洗脱液浓度为因素,进行L9(34)正交试验,最终得出各因素对离子交换树脂提取效果的影响主次顺序依次为洗脱速度＞洗脱温度＞洗脱液浓度;采用D072 强酸性阳离子交换树脂提取乳碱性蛋白的最佳洗脱条件为洗脱速度2.50mL/min、洗脱温度40℃、洗脱液浓度0.04mol/L。在该条件下的乳碱性蛋白提取率为7.55%。在制得的粗MBP 的基础上,利用Sephadex G-100 型葡聚糖凝胶,蛋白分离范围4000～150000D,对其进行纯化,测得最终纯度为83.55%。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用

本文研究了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoproteins of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用。以雄性SAMP6小鼠为老年性骨质疏松症动物模型,连续灌胃Ca-SGP 150d后,检测血清骨代谢生化标志物,测定小鼠股骨矿化沉积率、胫骨骨密度及松质骨微结构。结果显示,经Ca-SGP(500mg/kg·bw)干预后,小鼠血清中骨生成标志物骨源性碱性磷酸酶的活性和I型前胶原羧基端前肽、骨钙素的含量得到显著升高(p0.01),骨吸收标志物抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白酶K的活性得到显著抑制(p0.01);胫骨骨密度提高10.92%(p0.01);松质骨骨体积分数、骨小梁数目及厚度均得到显著增加(p0.01),骨小梁间隙显著缩小(p0.01);骨矿化沉积率提高98.87%,差异显著(p0.01)。该研究表明Ca-SGP可改善老年性骨质疏松症小鼠低骨转换,提高骨密度,改善骨小梁结构,促进骨矿化,为开发抗骨质疏松症药物和功能食品提供了理论支持。