基于模拟酶切的酪蛋白定向酶解探究

用模拟酶切软件peptidecutter提供的39种蛋白酶,对已知序列的酪蛋白进行模拟酶切,以生成的寡肽数量为指标建立酶解肽库,选择适用酶并进行真实条件下的酶解验证,获得最适用酶;以血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的抑制率和酪蛋白磷酸肽(CPP)的氮磷摩尔比来评价ACE抑制肽的活性及CPP的纯度,超滤分离酶解液获得高纯度的ACE抑制肽和CPP。结果表明:胰蛋白酶为最适用酶,超滤后ACE抑制肽的抑制活性及CPP的纯度显著升高(p<0.01),获得了高活性的ACE抑制肽和高纯度的CPP。      

基于模拟酶切的酪蛋白定向酶解探究

用模拟酶切软件peptidecutter提供的39种蛋白酶,对已知序列的酪蛋白进行模拟酶切,以生成的寡肽数量为指标建立酶解肽库,选择适用酶并进行真实条件下的酶解验证,获得最适用酶;以血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的抑制率和酪蛋白磷酸肽(CPP)的氮磷摩尔比来评价ACE抑制肽的活性及CPP的纯度,超滤分离酶解液获得高纯度的ACE抑制肽和CPP。结果表明:胰蛋白酶为最适用酶,超滤后ACE抑制肽的抑制活性及CPP的纯度显著升高(p<0.01),获得了高活性的ACE抑制肽和高纯度的CPP。     

常温下1-甲基环丙烯和月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐对板栗贮藏保鲜的影响研究

以1-甲基环丙烯(1-MCP)和月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐(LAE)为防腐剂,以板栗的质量损失率、腐烂率、干瘪率、硬度、淀粉含量及综合评分为指标,研究2种防腐剂对板栗的保鲜效果。结果表明：1-MCP、LAE均能抑制板栗质量损失、腐烂、干瘪,提高板栗的保鲜效果。在25℃下,1-MCP用于板栗保鲜的最优质量浓度为0.70 g/m³,LAE用于板栗保鲜的最优质量浓度为0.50 g/L。将2种防腐剂的最优剂量联合对板栗进行处理,经过96 d的贮藏之后,质量损失率、腐烂率、干瘪率分别比对照组低3.89%、5.00%、8.33%,硬度和淀粉含量分别高出3.69 HA、0.01g/g。     

1-脱氧野尻霉素与糖代谢酶相互作用的分子动力学计算

1-脱氧野尻霉素(DNJ)是从桑叶中发现的一种天然生物碱,由于其结构与葡萄糖相似,可竞争性抑制糖苷酶活性,从而显著降低多糖的降解水平。本试验采用分子对接和分子动力学模拟方法,从PTP1B、PPARα、PPARγ、α-淀粉酶(α-Amylase)和α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)等蛋白中确定了DNJ的作用靶标,并阐明其作用模式。结果表明,α-Glucosidase与DNJ的结合力有绝对优势,进一步的氢键分析和能量分解结果表明,Glu268、Asp330和Asp199是关键残基,在DNJ与α-葡萄糖苷酶结合中有重要作用,其作用方式是形成稳定的氢键作用,静电力作用和极性溶剂化能是主要的结合力来源。DNJ小分子通过与上述关键残基的作用稳定结合在α-葡萄糖苷酶口袋内部,从而抑制α-葡萄糖苷酶的生物活性,发挥降血糖作用。上述研究从分子结构层面阐明了DNJ和α-Glucosidase的作用模式,为基于DNJ结构进行理想药物的设计和小分子数据库的虚拟筛选提供了参考。     

硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响

研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38头平均体质量(698±34)?kg、48月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定SCD1基因表达量,一代测序技术检测SC...     

响应曲面法优化β-酪蛋白及其A1、A2型变异体检测方法的酶解条件

利用响应曲面法优化β-酪蛋白及其A1、A2型变异体超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法的酶解条件。将酶解设备（X1）、酶解时间（X2）和酶加入量（X3）作为影响因子,以A2型β-酪蛋白(Y1)、A1型β-酪蛋白(Y2)和β-酪蛋白总量（Y3）的质量浓度为评价指标。根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,针对检测方法中酶解反应这一关键步骤,通过单因素实验优选,响应曲面法研究酶解时间（X2）和酶加入量（X3）与A2型β-酪蛋白(Y1)、A1型β-酪蛋白(Y2)和β-酪蛋白总量（Y3）之间的关系。确定最佳酶解条件为：酶解设备（X1）为水浴摇床,酶解时间（X2）为2.5 h,酶加入量（X3）为15μL。     

GC-MS结合电子鼻分析1-MCP处理对线椒低温贮藏期挥发性物质的影响

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱（head space solid-phase microextraction and gas chromatographymass spectrometry,HS-SPME-GC-MS）联用并结合电子鼻技术检测线椒的挥发性成分,研究1-甲基环丙烯（1-methylcyclopropene,1-MCP）处理对线椒在10 ℃贮藏过程中挥发性成分变化的影响。结果表明,HS-SPMEGC-MS方法共检测出52 种挥发性成分,主要为醛类、醇类和酯类物质,1-MCP处理减缓了线椒醛类、酯类、酸类物质相对含量的降低,同时抑制了醇类、烃类以及其他类挥发性物质相对含量的增加,1-MCP处理可以保持线椒良好的挥发性物质成分变化,延缓其风味的改变;用电子鼻对线椒在10 ℃贮藏期间挥发性物质进行主成分分析、负荷加载分析及线性判别分析,结果均表明,1-MCP处理对线椒挥发性物质的影响主要在贮藏期第15～35天,10 ℃贮藏线椒在第15天的挥发性成分相对含量变化较大,是其新鲜度变化的拐点。     

Maintaining quality and bioactive compounds of broccoli by combined treatment with 1‐methylcyclopropene and 6‐benzylaminopurine

BACKGOUND: Broccoli deteriorates very quickly after harvest at ambient temperature due to the loss of green colour and the consequent yellowing of florets. To search for an effective method to control quality deterioration, the effect of 1‐methylcyclopropene (1‐MCP) combined with 6‐benzylaminopurine (6‐BA) treatment on visual quality, antioxidant enzymes and bioactive compounds in broccoli florets were investigated. RESULTS: A combined treatment of 2.5 µL L^?1 1‐MCP and 200 mg L^?1 6‐BA significantly reduced the increase of lightness (L*) value, and retained a high level for the hue value (H) and chlorophyll content. Superoxide dismutase, ascobate peroxidase and catalase activities increased while the activity of peroxidase decreased during storage in treated samples in comparison with the controls. The combined treatment enhanced the biosynthesis of glucosinolate and the formation of the anticarcinogen sulforaphane, which improved the health benefit of broccoli. CONCLUSION: These results indicate that a combined treatment of 1‐MCP and 6‐BA could be a good candidate for maintaining the visual quality and enhancing the nutritional value in broccoli during storage at 15 °C. © 2012 Society of Chemical Industry