高效液相色谱- 电喷雾三级四极杆质谱测定苹果、山楂、番茄制品中棒曲霉素的研究

建立了苹果、山楂、番茄制品中棒曲霉素总量的提取方法和液相色谱串联质谱确证方法。清汁样品用乙腈稀释后直接过MycoSep 228 真菌霉素多功能净化柱;浊汁、固体样品用果胶酶水解后,再用乙酸乙酯提取样品中棒曲霉素,浓缩后经MycoSep 228 柱净化,用Atlantis dC18 色谱柱分离,液相色谱串联质谱测定,电喷雾负离子(ESI －)多反应模式下监测;实验结果表明,样品中棒曲霉素浓度在1.0～200μg/kg 范围内时与其峰面积成良好线性关系,检测低限为2.0μg/kg,3 个加标水平下回收率为76.0%～95.3%,相对标准偏差为5.4%～11.2%。该方法选择性好,灵敏度高,定性可靠,可满足苹果、山楂、番茄制品中棒曲霉素测定的要求。     

高压液相色谱法检测食品中棒曲霉素的研究

用高压液相色谱法从果品加工食品中分离和测定了一种引起果品霉烂,主要引起苹果霉烂的真菌代谢有毒产物棒曲霉素。样品经乙酸乙酯萃取后,对果汁用碳酸钠溶液纯化,对果酱用甲苯-水作洗脱剂,硅胶往层析处理,分离出棒曲霉素。文章提出了分离棒曲霉素的最佳分离条件。在C_(18) Micropak MC-H柱或μ-Bondapak柱上,用四氢呋喃-水溶液作流动相,用276nm或254nm紫外吸收波长,以反相液相色谱法测定棒曲霉素。棒曲霉素浓度与峰面积间具有良好的线性关系,回收率达90%,变异系数小于10%,最小检测约1.5—2μg/1。     

MSPD和SPE两种方法前处理苹果(汁)中棒曲霉素的比较研究

建立并比较了分别采用基质固相分散(MSPD)和氰基柱固相萃取(SPE)两种前处理技术,高效液相色谱(HPLC)检测苹果(汁)中棒曲霉素的方法。两种方法的回收率和变异系数均满足检测要求。结果表明,建立的两种方法简便、快速、准确,各有优缺点,不同的样品中棒曲霉素的前处理应采用不同的方法。      

MSPD和SPE两种方法前处理苹果(汁)中棒曲霉素的比较研究

建立并比较了分别采用基质固相分散(MSPD)和氰基柱固相萃取(SPE)两种前处理技术,高效液相色谱(HPLC)检测苹果(汁)中棒曲霉素的方法.两种方法的回收率和变异系数均满足检测要求.结果表明,建立的两种方法简便、快速、准确,各有优缺点,不同的样品中棒曲霉素的前处理应采用不同的方法.     

基于SPE-HPLC的浓缩苹果汁中棒曲霉素检测方法的研究

棒曲霉素是真菌代谢所产生的一类有毒化合物,多存在于霉烂的苹果中。最常用的检测方法是利用各种液液萃取分离步骤来提取苹果汁中的棒曲霉素。在本研究中,两种固相萃取柱:C18-SPE和亲油亲水平衡大孔聚合吸附柱(HLB),被用来萃取分离浓缩苹果汁中的棒曲霉素。高效液相色谱(HPLC)检测用反相C18色谱柱,紫外检测器,检测波长276nm。在加标10～100μg/L的水平下测得棒曲霉素回收率分别为C18-SPE 87.56%～88.4%、HLB-SPE 85.45%～88.76%、LLE 79.47%～80.1%,变异系数分别为3.28%～4.47%、4.32%～7.15%、6.28%～7.67%。     

浓缩苹果汁中棒曲霉素的来源及检测

棒曲霉素是由苹果腐烂部位的真菌类产生的次生代谢产物。由于棒曲霉素的致突变性和致畸性并可能对消费者的健康产生危害，许多国家都已经制定了相关标准以尽可能降低苹果制品中棒曲霉素的含量。本文简要介绍了近年来浓缩苹果汁中棒曲霉素常用的分析检测方法。     

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定番茄酱中棒曲霉素

采用固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(SPE-HPLC-MS/MS)建立了番茄酱中的棒曲霉素的定性定量分析方法。样品经Strata-X固相萃取净化处理,使用Agilent XDB-C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.8μm)、以乙腈-水为流动相梯度洗脱,在流速为0.12mL/min条件下分离,采用电喷雾离子化源(ESI)多反应监测(MRM)模式下检测。在最佳检测条件下,棒曲霉素在0.05～0.5mg/L检测范围内线性关系良好,相关系数大于0.9995;检出限为0.03mg/L、定量限为0.1mg/L,该方法的精密度小于1.5%,回收率在90.2%～95.6%之间。说明该法准确可靠,可应用于番茄酱中棒曲霉素含量的测定。     

氰基柱SPE-HPLC检测浓缩苹果汁中棒曲霉素的研究

借建立了SPE-HPLC检测浓缩苹果汁中棒曲霉素残留的方法.采用氰基柱固相萃取浓缩苹果汁中的棒曲霉素,经HPLC测定,样品的回收率为95.16%～120.89%,变异系数≤3.98%,最低检出浓度为0.003mg/kg.该方法较传统的LLE法简便、快速、准确,是处理浓缩苹果汁中棒曲霉素较理想的方法.     

鲜食苹果中棒曲霉素HPLC检测及前处理条件的优化

为建立快速、准确的鲜食苹果中棒曲霉素含量检测方法,试验以红富士苹果为试材,分别研究不同HPLC条件对分离效果的影响,不同提取方法及纯化技术对鲜食苹果中棒曲霉素提取效果的影响。结果表明:在流动相配比为乙腈∶水=10∶90,流速0.8 mL/min的HPLC条件下,鲜食苹果样品中棒曲霉素色谱峰达到最好的分离效果;在不同的提取方法中,直接研磨提取法获得最高的加标回收率(81.9%),PEP-SPE技术较普通液液萃取技术具有更高的加标回收率(82.42%~95.57%)及检测精密度(3.26%~4.41%),同时具有更方便、快捷的特点。综上,研究建立的PEP-SPE—HPLC技术可操作性强,结果准确,具有很好的适用性,为鲜食苹果中棒曲霉素的含量检测及有效控制提供了灵敏高效的测定方法。     

采用替代模板硅胶表面接枝制备棒曲霉素分子印迹聚合物及其性能研究

以棒曲霉素为目标分子,5-羟甲基糠醛为干扰物,6-羟基烟酸为替代模板分子,通过对硅胶表面进行硅烷化并接枝后共聚,制备基于硅胶表面修饰的分子印迹聚合物.借助红外检测和元素分析对聚合物的制备进行评价,并通过固相萃取-高效液相联用以及振荡吸附法对所得聚合物的吸附特性进行研究.试验结果表明这种分子印迹聚合物对棒曲霉素表现出特异性吸附,而对干扰物5-羟甲基糠醛吸附较少:在固相萃取中两者吸附率分别为93.97％和76.89％,振荡吸附中吸附量分别为0.654 μg/mg和0.496 μg/mg.该聚合物能被有效地应用于SPE-HPLC法测定苹果汁和相关苹果产品中的棒曲霉素.     

鲁米诺-铁氰化钾流动注射化学发光体系测定饮用水中棒曲霉素

基于棒曲霉素对鲁米诺-铁氰化钾发光体系显著的增敏作用,结合流动注射技术,建立了一种快速检测棒曲霉素的方法。在最佳实验条件下,线性范围为5×10-3～1mg/L,检出限为4.6×10-4mg/L,RSD为2.6%（n=11）。此方法具有简便快速、自动化程度高、可在线检测的特点,可用于饮用水中棒曲霉素的应急预警检测。      

响应面试验优化溶剂诱导萃取水系基质中棒曲霉素工艺及其检测分析

基于溶剂诱导萃取,使用响应面法优化水系基质中棒曲霉的提取工艺,并对4种不同水系基质的料液比(V/V)进行选择。在单因素试验基础上,以棒曲霉素转移率为指标,响应面法优化溶剂诱导萃取的条件,并在不同料液比的4种水系基质中进行加标回收实验。通过溶剂诱导分层,获得棒曲霉素的最佳萃取条件为乙腈-样品体积比7∶3、Na Cl添加量1.4?g/3 m L样品、提取温度34℃,此条件下,棒曲霉素转移率为90.47%。在此最优条件下,苹果基质的最优料液比为7∶3,浓缩苹果汁、酿酒葡萄和葡萄酒基质的最优料液比均为1∶9,加标回收率分别为91.08%、85.51%、88.74%、89.17%。同时与中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2008—2007《进出口果汁中棒曲霉毒素的检测方法高效液相色谱法》进行比较,结果显示该前处理方法溶剂使用量少、操作简单且重复性好。综上,响应面法优化溶剂诱导分相萃取棒曲霉素的结果可靠,为水系基质中棒曲霉素的萃取提供了一种全新、快速的前处理方法。     

《棒曲霉素测定方法的研究》取得成果

我院“七五”国家攻关课题《棒曲霉素测定方法的研究》已取得成果。本研究采用反相高压液相色谱法,测定了霉烂苹果为原料加工制成的果汁中的棒曲霉素。样品用乙酸乙酯萃取,分离出的乙酸乙酯层用碳酸钠溶液洗涤纯化,洗涤后的乙酸乙酯液经减压浓缩、蒸发至干,定容液作为进样试液。用键合型碳18柱作为分离柱,流动相为四     

胡萝卜及其制品中棒曲霉素测定方法的研究

该文对胡萝卜制品中棒曲霉素的分析检测方法进行了研究,建立了以液-液萃取为前处理方法,采用高效液相色谱(HPLC)分析了胡萝卜制品中棒曲霉素.主要研究结果如下:通过对乙酸乙酯提取次数、净化次数、水分含量、干燥时间的研究,优化了传统的液-液萃取测定棒曲霉素的方法.该方法处理和测定棒曲霉素回收率好,而且对胡萝卜样品和胡萝卜浆(或汁)均适用.胡萝卜样品的回收率为86.6％～98.3％;胡萝卜汁样品的回收率为86.8％～99.1％,相对标准偏差≤4.2％.     

苹果汁中棒曲霉素的吸附动力学研究

研究了苹果汁中棒曲霉素在八种大孔吸附树脂上的吸附行为,并筛选出最佳吸附树脂;研究了棒曲霉素在LSA-800B大孔吸附树脂上的静态动力学、吸附等温线和动态动力学曲线以及影响动态动力学曲线的因素,并确定了LSA-800B树脂吸附棒曲霉素的最适操作条件,结果表明:在实验条件LSA-800B树脂对棒曲霉素的静态吸附平衡时间为3h;20℃时LSA-800B树脂的吸附过程可用佛伦德列希(Freundlich)吸附等温式来描述,方程为:q=0.0539C1.0278(r2=0.9907);流速、果汁中棒曲霉素的浓度、操作温度对LSA-800B树脂的动态动力学曲线都有影响。树脂柱操作的最适条件为:流速4BV/h,温度50℃。     

姜黄素光动力技术对扩展青霉生长及分泌棒曲霉素的抑制效果

该研究探究了姜黄素介导的光动力技术对扩展青霉菌丝生长及分泌棒曲霉素的影响。结果表明，固体培养扩展青霉菌丝5 d后活力旺盛，棒曲霉素分泌量增长6.5倍。仅姜黄素短暂处理可轻微抑制菌丝生长及棒曲霉素分泌；而在0.275 W/cm2光剂量下，50~300 μmol/L浓度的姜黄素可显著降低固体培养扩展青霉的菌落直径（0.84 cm）和菌丝质量（68.37 mg），同时棒曲霉素分泌抑制率约为83.85%。接种菌丝的红富士苹果经光动力处理并培养8 d后，病斑直径抑制率与姜黄素浓度呈正相关性，最大抑制率为49.38%；而棒曲霉素在果实内分布与菌丝扩展能力密切相关，病斑比重和棒曲霉素含量分别为0.09%、18.02%。综上，姜黄素介导的光动力技术可显著抑制扩展青霉菌丝生长以及棒曲霉素分泌。     

硅藻土吸附梨果汁中棒曲霉素的动力学模型研究

目的寻找一种有效去除梨果汁中棒曲霉素(patulin,PAT)的方法。方法以硅藻土作为吸附剂对梨果汁中棒曲霉素进行吸附,分析了吸附等温线,吸附热力学和动力学特征。结果在35℃下AG-3000#型硅藻土对梨果汁中棒曲霉素具有较好的吸附作用,最高吸附量为1066.152μg/g,最大吸附率为88.8%,且吸附为自发吸热过程。吸附等温线结果显示,棒曲霉素的吸附量随着棒曲霉素初始浓度的增大而增大;吸附热力学特征符合Langmiur吸附等温线模型。吸附动力学结果显示,硅藻土对梨果汁中棒曲霉素的吸附符合准二级速率方程模型。结论 AG-3000#硅藻土适合梨果汁中棒曲霉素的吸附。     

高效液相色谱法同时测定苹果中9种多酚物质

目的:利用HPLC法同时测定苹果中9种多酚物质的含量;方法:色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5 μm),以乙腈和醋酸-醋酸钠缓冲溶液为流动相,采用不同的流速和浓度梯度洗脱的分离条件,并用该方法测定印度青苹果中多酚的含量;结果:中性酚和酸性酚在该条件下得到很好的分离,分离度均大于1.5,该方法的加标回收率均在90%以上,相对标准偏差为1.2%～2.3%.结论:该方法操作条件简单,结果准确可靠.     

欧盟抬高果汁标准 国内企业难招架

由欧盟委员会通过的自2004年4月生效的果汁准入新标准已在欧盟各成员国施行,无须再转化为成员国的本国规定。果汁,特别是苹果汁及含苹果汁的酒精饮料中,棒曲霉素最大限量为50μg/kg,固体苹果产品中,棒曲霉素最大限量为25μg/kg,儿童用苹果汁和婴儿食品中,棒曲霉素最大限量为10μg/kg。欧盟新的标准对中国苹果汁出口质量提出了更高的要求。中国大约有40家苹果汁加工企业,95%以上的果汁出口。根据欧盟新的标准,目前,国内果汁企业100%达到欧盟要求还比较困难,预计两年之后,国内绝大多数企业可以达到欧盟新的标准。但专家担心这是欧盟对中国果汁…     

腐烂苹果中棒曲霉素的分布研究

为探讨腐烂苹果中棒曲霉素(patulin,Pat)的分布情况,用富士苹果作材料,高效液相色谱仪(HPLC)检测Pat 含量。结果表明：苹果腐烂程度越高,Pat 平均含量越大;腐烂部位Pat 含量最大,离腐烂部位越远,Pat含量随距离增加而降低;腐烂苹果中的Pat 大部分已经扩散至未腐烂部分。建议生产中将腐烂严重的苹果整个弃除。