双酶法制备牡蛎抗氧化酶解液的工艺优化

以牡蛎肉为原料,用无花果蛋白酶和风味蛋白酶水解牡蛎肉制备抗氧化酶解液,以DPPH·清除率、氨基酸态氮含量和蛋白质回收率为指标进行单因素和正交试验,探究总酶量、pH、酶解时间和酶比对酶解效果的影响。得到双酶制备牡蛎抗氧化酶解液的最佳工艺条件为:总酶量12%,p H6.0,酶解时间3.0 h,无花果蛋白酶与风味蛋白酶的比例为5∶1(质量比);该酶解液具有较高抗氧化活性和蛋白质回收率,其氨基酸态氮含量为0.223 g/100 m L,DPPH·清除率可达89.42%、蛋白质回收率达到了79.81%。     

风味蛋白酶水解制备豌豆蛋白抗氧化酶解产物工艺条件优化

采用风味蛋白酶水解豌豆蛋白,对制备豌豆蛋白酶解产物清除DPPH.清除率进行研究;通过单因素实验和响应面回归分析,得到制备酶水解产物最佳酶解工艺条件:酶解温度48.8℃、酶解时间3.1 h、pH 5.5、加酶量4.0%、底物浓度6.0%,在此条件下,风味蛋白酶酶解产物对DPPH.清除率为60.10%。     

复合酶解金枪鱼碎肉的工艺研究

以水解度为指标,筛选出水解金枪鱼碎肉蛋白效果较好的两种酶为胰蛋白酶和木瓜蛋白酶。以这两种酶组成双酶反应体系,经正交试验得到金枪鱼碎肉蛋白最佳水解条件为:反应温度45℃、反应时间6 h、胰蛋白酶添加量15 000 U/g、木瓜蛋白酶添加量为45 000 U/g、体系pH为7.0。在此条件下,金枪鱼肉水解度可以达到15.83%。酶解液采用10 000 Da和5 000 Da超滤膜进行分离,获得>10 000 Da,5 000～10 000 Da,<5 000 Da三个组分,得率分别为7.69%,30.71%,19.23%。     

超声波辅助黄鳍金枪鱼免疫活性肽酶解工艺优化

本文以黄鳍金枪鱼肉为原料，通过超声波辅助酶解黄鳍金枪鱼肉制备免疫活性肽。以小鼠巨噬细胞相对增殖率为指标，筛选出最适蛋白酶为胰蛋白酶，并在单因素实验基础上，通过响应面优化试验确定了黄鳍金枪鱼肉的酶解条件。结果表明，酶解时间5 h、酶解温度37.6℃、超声波时间为11 min，在此条件下，小鼠巨噬细胞的相对增殖率最佳，为43.04%±2.03%，与线性回归模型的预测值相近。对最佳酶解条件下的黄鳍金枪鱼免疫活性肽进行氨基酸组成与分子量分析，其必需氨基酸为41.42%±1.24%，疏水氨基酸含量为26.49%±0.79%，分子量集中分布在4.7～6.5 kDa。研究结果为黄鳍金枪鱼的高值化利用提供了理论指导与技术支持。     

金枪鱼蒸煮液酶解工艺优化及风味海鲜调味汁的制备

以金枪鱼蒸煮液作为原料,制备风味海鲜调味汁。本实验以水解度为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰酶中筛选得到最佳酶,在单因素实验基础上,通过响应面优化酶解工艺条件,利用正交实验L₉(3⁴)研究不同酵母添加量、发酵温度、发酵时间对腥味值的影响,并确定最适杀菌条件。结果表明,以木瓜蛋白酶酶解金枪鱼蒸煮液,最佳酶解条件为:酶解时间4 h,酶解温度56 ℃,酶添加量300 U/g;酶解液经过添加酵母0.75%,在35 ℃下发酵60 min,去腥效果较佳;最佳杀菌条件为:90 ℃下灭菌30 min。研制出的金枪鱼调味汁呈黄棕色、鱼香味浓郁,氨基酸态氮含量0.68 g/100 mL,可以充分开发利用,是一种很有发展前景的天然调味品。     

鲶鱼骨酶解产物抑菌活性的酶解工艺优化

试验以鲶鱼头、鱼骨为原料,通过先匀浆后高压、先高压后匀浆、直接匀浆3种不同的预处理方法.以蛋白质含量为指标,选出一种最优的预处理方法.利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶5种酶分别在各自最适条件下对其进行水解,采用正交试验设计,以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄色葡萄球菌为供试菌种,以抑菌性为测定指标确定酶解的最佳用酶以及酶解的工艺条件.试验结果表明:对鲶鱼头、鱼骨先高压后匀浆的预处理方法得到的蛋白质含量最高;胃蛋白酶为酶解鲶鱼骨的最佳用酶;胃蛋白酶的最佳酶解工艺条件为:底物浓度为1:4,酶添加量为2000U/g,酶解时间2.5 h,酶解温度37℃,最适pH值7.0.     

姬松茸抗氧化酶解液的制备

目的:研究制备姬松茸抗氧化酶解液的工艺条件,并分析酶解液的营养成分。方法:将木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶按m_{木瓜蛋白酶}∶m_纤维素酶∶m_果胶酶为3∶4∶4制备复合酶,酶解姬松茸子实体;采用响应面试验优化姬松茸酶解工艺。结果:复合酶水解姬松茸的最佳工艺为复合酶添加量0.5%,酶解pH 6.2,酶解温度49℃,酶解时间147 min,该条件下,当姬松茸酶解液质量浓度为2.0 mg/mL时,其对DPPH自由基的清除率为69.15%,表现出很强的抗氧化活性。酶解液中蛋白质含量为(1 013.83±25.11) mg/100 mL,粗脂肪含量为(150.17±1.21) mg/100 mL,总糖含量为(721.41±8.74) mg/100 mL,多糖含量为(138.83±1.66) mg/100 mL,游离氨基酸含量为(800.94±12.36)mg/100 mL,其中必需氨基酸占40.22%。结论:采用复合酶法制备的姬松茸酶解液具有较强的抗氧化活性和较高的营养价值,可开发为功能性食品。     

酶解罗非鱼骨提取胶原多肽的工艺优化

以罗非鱼骨为研究对象,研究其胶原蛋白酶解为胶原多肽的工艺。通过单因素和正交试验,以水解度和胶原蛋白提取率为考核指标,确定了酶解罗非鱼骨的最佳用酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为:酶解4 h,加酶量4 000U/g,pH 10.5,底物浓度4.5%。在此条件下,鱼骨的水解度为28.81%,胶原多肽提取率为45.02%。试验为深入研究和开发罗非鱼骨胶原多肽及其相关产品提供了理论和技术基础。     

双酶酶解金枪鱼加工下脚料提油工艺

以金枪鱼加工下脚料为原料,对双酶酶解法提取粗鱼油进行研究,主要考察了料液比、蛋白酶A、B添加量、反应时间以及破乳条件对粗鱼油提取率的影响。优化的工艺条件为料液比1:3,蛋白酶A、B添加量均为1.5%,反应时间各为3、2h,所得酶解液在-20℃冻结12h与40℃解冻1.5h进行破乳。在该条件下粗鱼油提取率为(6.58±0.56)%,理化指标均达到SC/T3502—2000的粗鱼油二级标准。     

金枪鱼骨营养成分分析

对金枪鱼骨的营养成分包括基本成分、氨基酸、脂肪酸及矿物元素组成进行测定,结果表明,金枪鱼骨中蛋白质、灰分、脂肪含量分别为57.2%、33.1%、8.0%;其氨基酸含量为26.6%,必需氨基酸占总氨基酸24.89%;鱼骨油中不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸分别占39.58%和56.54%,其中DHA和EPA分别为15.89%和1.79%。金枪鱼骨中含17种矿物质元素,Ca和P分别为5.27%和2.89%,另外还含有Na、Mg、Zn和Fe等多种微量元素。由此可见,金枪鱼骨营养丰富,具有很好的开发利用价值。      

鳙鱼骨酶解产物的抗氧化活性及相对分子质量分布

采用5种蛋白酶对汽爆预处理过的鳙鱼骨进行酶解,以水解度(DH)为指标,碱性蛋白酶和复合蛋白酶为试验用酶,制备不同DH(5%,10%和15%)的鱼骨酶解物,考察不同DH的酶解产物的抗氧化活性及相对分子质量分布。结果表明:酶解产物的抗氧化活性与其浓度呈一定的量效关系。在不同的抗氧化体系中,酶的种类和DH对酶解产物的抗氧化活性影响趋势不同。当DH为10%时,复合蛋白酶酶解产物对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基的清除率较高,其IC50值分别为2.85,0.99,4.91 mg/mL,酶解产物相对分子质量分布在500 u以下的达75.08%。而DH为15%时,碱性蛋白酶酶解产物的还原能力最强,在波长700 nm处,其吸光度值为0.75。酶解产物相对分子质量随DH的增大逐渐减小。本研究结果为制备具有抗氧化活性的鱼骨酶解物提供基础数据。     

谷朊粉酶解条件优化及其抗氧化活性

以溶解性为指标,采用单酶(Alcalase 2.4 L)和双酶(Alcalase 2.4 L+Flavourzyme 500 MG)2种方法水解谷朊粉,在单因素试验的基础上通过正交试验,优化了单酶和双酶水解的最佳条件,并分析了最优酶解条件下得到的2种产物的抗氧化活性、相对分子质量分布及其氨基酸组成。结果表明,单酶和双酶水解物的最大溶解性分别达到了61.38%和82.21%。水解物质量浓度为3.0 mg/m L时,单酶水解物的还原力、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别达到0.81、71.82%、56.83%和70.82%,而双酶水解物相应的指标分别达到1.01、85.33%、74.84%和84.33%。结果表明,双酶水解不仅能提高谷朊粉的溶解性,而且也能明显提高其抗氧化活性。双酶水解物中小分子肽(分子质量1 500 u)和疏水性氨基酸的质量分数分别达到61.63%和33.74%,均高于单酶水解物,表明谷朊粉酶解物的抗氧化活性与小分子肽含量、疏水性氨基酸呈现正相关。     

鲤鱼鳞酶解工艺优化及酶解液抗氧化活性研究

为得到高抗氧化活性的鲤鱼鳞胶原蛋白酶解液,试验以羟基自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2-·）清除率作为主要检测指标,通过单因素试验研究酶解温度、pH值、加酶量、底物浓度、酶解时间对鱼鳞胶原蛋白酶解液抗氧化活性和水解度的影响。在此基础上,采用响应面分析法对酶解工艺条件进行优化。得到试验最优工艺为酶解时间4.4 h,酶解温度66.0℃,pH8.5,底物浓度20 mg/mL,加酶量4%。在此条件下,酶解液的·OH清除率为80.24%,O2-·清除率为65.34%,亚铁离子（Fe2＋）螯合能力为59.73%。对比常用抗氧化剂,在O2-·清除能力方面,酶解液效果低于丁基羟基茴香醚（butylated hydroxyanisole,BHA）和抗坏血酸（P＜0.05）,但在·OH清除能力方面,酶解液已达到BHA和抗坏血酸的水平（P＞0.05）,在Fe2＋螯合能力方面,酶解液显著优于BHA和抗坏血酸（P＜0.05）。     

裂壶藻渣酶解产物的抗氧化稳定性

本实验以裂壶藻渣酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力及其还原力活性为评价指标,探讨温度、pH值、食品辅料、防腐剂、金属离子及人工胃肠道模拟环境对其抗氧化活性的影响。结果表明：在30～100 ℃的范围内温度变化对裂壶藻渣酶解产物的抗氧化活性影响不明显;在酸性环境中酶解产物可以较好地保持活性;蔗糖及NaCl对酶解产物活性影响不显著,葡萄糖在质量分数2%～10%范围内,随质量分数提高,对其活性的影响渐增;防腐剂山梨酸钾对酶解产物活性的影响略强于苯甲酸钠;金属离子对样品活性的影响大小为：Zn2+＞Cu2+＞K+＞Ca2+;体外模拟胃肠实验中,酶解产物经胃肠液处理后其活性保持率可达65%以上。     

脱脂羊脑蛋白酶解条件优化及酶解产物体外抗氧化活性

以脱脂羊脑蛋白为原料,采用响应面（response surface method,RSM）法建立脱脂羊脑蛋白的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶水解回归模型,优化酶解工艺条件,在体外研究脱脂羊脑中性蛋白酶酶解产物的抗氧化性能。结果表明：脱脂羊脑蛋白底物质量浓度为3.03 g/100 mL,酶添加量为5 653.20 U/g,温度为39.4 ℃时,脱脂羊脑蛋白水解度最高,达到（14.59±1.26）%。当脱脂羊脑蛋白水解度为（14.39±1.17）%时,酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和羟自由基（•OH）清除能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为（12.48±0.71）%时 ,酶解产物对超氧阴离子自由基（O2－•）清除能力和总还原能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为（12.48±0.71）%时,酶解产物对DPPH自由基、•OH、O2－•、亚硝酸根阴离子的IC50分别为2.49、3.13、10.37、10.89 mg/mL,酶解产物对Fe2+螯合率的IC50为7.48 mg/mL,证明脱脂羊脑蛋白酶解产物具有一定抗氧化活性。     

鱼骨泥酶解工艺优化及酶解液呈味特性研究

以鳕鱼骨制备的超微细鱼骨泥为对象,研究鱼骨泥酶解的最佳工艺条件,以水解度为指标,在单因素的基础上,利用响应面优化酶解工艺,并根据电子鼻、电子舌、气相离子迁移色谱（GC-IMS）、游离氨基酸检测结果,分析酶解对鱼骨泥呈味特性的影响。结果表明,鱼骨泥最佳酶解工艺为:选用风味蛋白酶,酶解时间5 h,加酶量1.0%,料液比1:1,在此条件下水解度可达43.8%。电子鼻分析结果显示,酶解液中芳香物质增多,烷烃、氨类等具有不良风味的化合物含量降低;电子舌分析结果显示,酶解液酸味提升,苦味减少,整体呈味特性良好、滋味丰富。鱼骨泥和酶解液中共检测出29种风味物质,其中鱼骨泥中主要挥发性风味物质是醛类和酮类,酶解液中主要呈味物质是酮类和酯类,挥发性风味物质的种类及含量差异显著。酶解增加了呈味氨基酸的含量,赋予了酶解液良好的风味。     

贻贝的可控酶解及其酶解液的抗氧化活性

用Alcalase对贻贝进行酶解能够得到具有抗氧化活性的酶解物。通过控制酶解时间分别得到水解度(hydrolysis degree,DH)为12%、18%、24%和30%的4种酶解物,研究其抗氧化活性。结果表明,酶解物的还原力和羟基自由基清除率均随DH升高而升高,但在DH 24%~30%范围升高极缓;其DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率和脂质过氧化抑制率均随DH升高而呈现先增后降的趋势,最高清除率均出现在DH 24%处。DH为24%的贻贝Alcalase酶解物具有最佳的抗氧化活性。     

油菜蜂花粉酶解物抗氧化性能的研究

对油菜蜂花粉酶解物和水提物进行了体外抗氧化实验。结果表明,花粉酶解物具有良好的抗氧化功能,在50mg/ml浓度下对超氧阴离子自由基、羟自由基和脂质过氧化的抑制率分别达到87．4%、61．2%和95．9%。比较酶解物和水提物抗氧化性能可知,酶解物清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力明显高于水提物,在50mg／ml时,对羟自由基的抑制率比水提物高约30%,清除超氧阴离子自由基的能力高约20%,而抑制脂质过氧化的能力与水提物之间无明显差异。     

甲鱼酶解产物抗氧化功能的研究

目的甲鱼具有很高的营养价值和药用价值.本文研究了甲鱼酶解产物的功能性质,从而科学认识甲鱼的营养保健功能.方法分别采用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶对甲鱼蛋白进行酶解,研究3种蛋白酶酶解产物在不同酶解时间的抗氧化功能特性和部分水解特性.结果甲鱼木瓜蛋白酶酶解7h时,OH·清除率达到最高值72.39%,O2-·清除率80.16%,总还原能力0.542,DPPH·清除率在酶解6 h时达到最大值116.50%.甲鱼胰蛋白酶酶解产物的OH·清除率在解酶4 h时达到最高值60.07%,O2-·清除率在酶解6 h时达到最大值68.80%,总还原能力为0.569,DPPH·清除率在酶解5h时达到最大值102.52%.甲鱼枯草杆菌蛋白酶酶解产物的OH.清除率在酶解5 h时达到最高值70.72%,在酶解6 h时O2-·清除率达到最高值50.92%,总还原能力为0.532,DPPH·清除率在酶解4 h时达到最大值75.43%.结论随着酶解时间的延长,甲鱼酶解液的氨基态氮量、水解度、多肽含量、溶解度都呈增大的趋势,肽分子平均链长均不断地减小.甲鱼木瓜蛋白酶酶解产物的抗氧化性最好.