猪肺管硫酸软骨素的提取分离与抗氧化活性研究

首先比较稀碱、全酶和稀碱-酶法结合提取猪肺管硫酸软骨素的工艺,探究猪肺管硫酸软骨素的最大得率,再采用乙醇沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephadex G-75分离纯化得到高纯度硫酸软骨素,然后采用紫外光谱、红外光谱和核磁共振技术对其进行结构鉴定,最后探讨其抗氧化活性。结果发现,全酶法提取硫酸软骨素得率最高,得率为22.10%。纯化后,97%纯度的硫酸软骨素得率28g/100g粗品。光谱、核磁共振和抗氧化数据显示,该硫酸软骨素结构与鸡胸软骨和猪喉软骨硫酸软骨素的结构和抗氧化活性相似。因此,猪肺气管软骨可以作为硫酸软骨素的优质大宗提取资源。     

人工养殖鲟鱼头中硫酸软骨素的提取工艺

对人工养殖鲟鱼头中硫酸软骨素采用稀碱法进行提取工艺的研究,以硫酸软骨素产率为考察时象,对影响产率的因素进行了单因素试验,并在此基础上通过正交试验,确定硫酸软骨素提取的最佳工艺.试验结果表明:提取硫酸软骨素的最佳工艺条件为NaOH浓度:0.06kg/L、固液比:1/5(g/mL)、浸提温度:25℃、浸提时间:20h.在此条件下硫酸软骨素的提取率为48.9%,其蛋白质和脂肪含量分别为0.980%和0.130%.     

利用金枪鱼头提取硫酸软骨素的工艺探讨

以金枪鱼头为原料,初步探讨了硫酸软骨素的提取工艺,采用稀碱-酶解,超声辅助提取的方法,考察了碱提取过程中料液比、碱浓度、超声时间、碱提温度对提取率的影响,在单因素实验的基础上,利用正交实验进行了工艺优化,得出最佳提取工艺为料液比1∶25 g/m L、碱浓度2.25%、超声时间40 min、碱提温度60℃,最大提取率为1.226%。     

匙吻鲟硫酸软骨素提取及纯化工艺研究

以匙吻鲟的软骨为原料，用稀碱-酶相结合的方法提取硫酸软骨素。用胰蛋白酶去除蛋白质，用95％的乙醇沉淀，在60℃条件下烘干得到硫酸软骨素。研究结果为：碱浓度3％，提取温度40℃，料液比1：6，胰蛋白酶用量1000：1.5，酶解温度45℃，沉淀时的pH7.0。硫酸软骨素提取率为36.52％、纯度为97％、蛋白质含量为0.075％、水分为10.52％。     

人工养殖鲟鱼头硫酸软骨素的质量分析

采用稀碱法提取人工养殖鲟鱼头中硫酸软骨素.对硫酸软骨素的纯度、葡萄糖醛酸含量、蛋白含量、脂肪含量等指标进行分析;同时对硫酸软骨素进行红外和紫外光谱测定.结果表明,人工养殖鲟鱼头中葡萄糖醛酸含量为34.67％,硫酸软骨素含量为95.04％,蛋白质含量为0.83％,脂肪含量为0.09％.硫酸软骨素的红外光谱和紫外吸收与标准品接近.     

酶法制备硫酸软骨素寡糖及其抗氧化活性

采用硫酸软骨素酶对硫酸软骨素进行酶法降解,制备硫酸软骨素寡糖。通过红外分析降解前后的硫酸软骨素以及利用质谱技术对该酶解产物进行分析,并检测酶解前后硫酸软骨素的DPPH自由基的清除能力、羟自由基清除能力和还原能力。结果显示,酶法降解硫酸软骨素对其基本结构影响不大,质谱分析结果表明,该酶解产物是二糖和四糖。抗氧化活性实验表明,硫酸软骨素寡糖对DPPH自由基、羟自由基的清除能力及其还原能力均高于硫酸软骨素。推测其可能是由于硫酸软骨素降解成硫酸软骨素寡糖后,分子量的减小、不饱和双键的形成以及还原糖的含量增加使得其活性增加。     

鮟鱇鱼加工下脚料中胶原蛋白和硫酸软骨素综合提取及结构分析

为研究鮟鱇鱼加工下脚料中胶原蛋白和硫酸软骨素的综合提取,以下脚料中鱼头为原料,经预处理、脱钙脱脂和除杂蛋白之后,采用冰醋酸和胃蛋白酶法提取鮟鱇鱼骨胶原蛋白(Pepsinsolublecollagens,PSC),接着采用稀碱-盐-酶法制备硫酸软骨素(Chondroitinsulfate,CS),提取得到鮟鱇鱼骨胶原蛋白提取率为36.43%,纯度为89.54%;硫酸软骨素得率为2.21%,纯度为90.13%。并对其进行SDS-PAGE凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、氨基酸分析、扫描电镜、高效液相色谱分析其理化性质分析。结果表明,该方法提取得到的胶原蛋白和硫酸软骨素均很好地保持了完整的天然结构且具有较高的纯度。     

酶法提取人工养殖鲟鱼头中硫酸软骨素的工艺研究

旨在建立用酶法从鲟鱼头软骨中提取硫酸软骨素的工艺,采用胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的共同酶解,得到硫酸软骨素。通过单因素实验和正交实验研究,结果表明:木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶提取鲟鱼头软骨中硫酸软骨素的最佳工艺为:酶量1.00%(10mg酶/1g软骨粉),提取时间为48h,固/液比为1:14。在此条件下,硫酸软骨素的提取率为47.95%,其葡萄糖醛酸含量为33.86%,硫酸软骨素含量为95.78%,杂质蛋白含量分别为0.89%。另外对硫酸软骨素还进行了IR和UV分析。     

响应曲面法优化硫酸软骨素提取工艺条件

采用鸡胸软骨为原料,以硫酸软骨素得率为指标,对超声波辅助碱-酶法提取硫酸软骨素的工艺条件进行研究。首先,通过单因素实验确定了各因素的范围,再应用Box-Behnken中心组合实验设计建立二次多项数学模型,进行响应面分析。结果表明,超声波辅助碱-酶法提取鸡软骨中硫酸软骨素的最佳工艺条件为:碱浓度4%,酶添加量1.4g/L,料液比1000∶5923(g/mL),数据结果显著,硫酸软骨素得率为23.94%,通过紫外光谱检测确定提取物质为硫酸软骨素。     

影响氨解法RNA提取率因素的探讨与研究

啤酒废酵母是啤酒生产的重要副产物,其营养成分十分丰富,具有很高的利用价值,其中核酸(DNA和RNA)含量尤其是RNA的含量较高.据报道,从啤酒废酵母提取RNA的方法有浓盐法、混合盐法、表面活性剂法、稀碱法等,常用的有浓盐法和稀碱法两种.采用氨解法,通过正交实验和响应面法,探讨和研究了影响氨解法RNA提取率的主要因素,确定氨解法从啤酒废酵母中提取RNA的最佳工艺条件:酵母浓度10.0%,氨水浓度为1.0%,破壁温度60℃,破壁时间55min.     

罗非鱼鼻软骨中硫酸软骨素的提取工艺

以罗非鱼鼻软骨为原料,采用超声波辅助-酶解-稀碱法提取硫酸软骨素(CS)。通过单因素试验及响应面分析优化主要工艺参数。结果表明,超声、酶解和稀碱提取均对CS的提取效果有影响,优化得到的最佳超声条件为:料液比1∶5(m/V),超声时间20 min,超声温度40℃。酶解条件为:以碱性蛋白酶为水解酶,酶解p H11.0,酶加量2.0%,酶解温度55℃,酶解时间3 h。碱提取条件为:1%氢氧化钠,提取时间1 h。在此工艺条件下,硫酸软骨素的平均提取率为0.922%,纯度为90.1%。     

牦牛气管中硫酸软骨素提取工艺研究

以牦牛气管为原料,采用超声波辅助碱处理提取硫酸软骨素,研究了料液比、超声波功率、超声时间对其得率的影响,通过正交试验优化了提取工艺。结果表明,超声波辅助碱提取牦牛气管中硫酸软骨素的工艺条件为:料液比1∶6(g/m L),超声波功率为550 W,超声时间为30 min,在提取温度35℃,p H 12的条件下硫酸软骨素的得率可达18.97%。各因素对硫酸软骨素得率的影响顺序依次为:超声功率超声时间料液比。比较了TCA法、Sevage法、胰蛋白酶法的除蛋白效果,其中胰蛋白酶法效果最佳,蛋白质去除率可达85.78%,硫酸软骨素纯度达85.56%。     

弱碱盐法提取核糖核酸工艺的研究

啤酒废酵母作为啤酒生产排放的主要废弃物,核糖核酸的含量高达4.5%～8.3%.搞好综合利用具有重要的意义.提出了浓盐法与稀碱法相结合即弱碱盐法提取核糖核酸的工艺技术路线,酵母中核糖核酸的提取率达到90%以上,样品的纯度达到90.3%.     

鲟鱼硫酸软骨素提取工艺的研究

以鲟鱼软骨为原料,对鲟鱼硫酸软骨素的提取工艺进行了研究.其方法是先用稀碱提取硫酸软骨素,再用碱性蛋白酶分解去除杂蛋白,然后用乙醇沉淀,将沉淀在60℃下恒温干燥2.5h即得产品.正交试验的结果表明,最佳工艺条件下硫酸软骨素得率为35.70%,其中稀碱提取的最佳工艺为:NaOH为5%、提取温度为40℃、提取时间为4h、液料比为4mL/g;碱性蛋白酶去除杂蛋白的最佳工艺为:加酶量为2%、液固比为5 mL/g、酶解温度为45℃、最佳酶解时间为4.0h.     

响应面法优化罗非鱼下脚料硫酸软骨素提取工艺的研究

以罗非鱼加工下脚料为原料,对硫酸软骨素的提取工艺进行了研究。其方法是在稀碱-酶解法的基础上,再利用超声波辅助提取,采用响应面分析法对主要工艺参数进行优化并得到回归模型。结果表明,最佳的优化工艺为:超声时间为23min、碱浓度为2.4%、料液比为1∶7.9,此工艺下硫酸软骨素的提取率为0.627%,回归模型的预测值与验证值的相对误差为2.64%,表明该回归方程与实际情况拟合较好。     

啤酒废酵母提取核糖核酸工艺的研究

啤酒酵母中核糖核酸的含量高达4．5％～8.3％,核糖核酸是生产核酸和核苷类药物的原料,啤酒废酵母作为啤酒生产排放的主要废弃物,具有重要的利用价值。本文对浓盐法和碱法提取啤酒废酵母中的核糖核酸技术进行了研究,并对这2种方法进行了比较和优化,提出了浓盐法与稀碱法相结合提取核糖核酸的工艺技术路线,酵母中核糖核酸的提取率达90％以上,样品的纯度达90．3％。     

不同硫酸软骨素对口腔癌KB细胞的抑制作用

以鲟鱼软骨和鸡软骨为原料,采用碱提-酶解-醇沉的工艺流程提取硫酸软骨素后,利用Sephadex G-50凝胶色谱及Sephacryl S-300 HR凝胶色谱对硫酸软骨素进行纯化,并通过高效凝胶渗透色谱法进行分子质量测定与纯度鉴定。采用MTT法检测硫酸软骨素对口腔癌KB细胞增殖活性的影响,并采用流式细胞术检测口腔癌KB细胞凋亡情况。研究结果表明鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素粗制品得率分别为23.80%和25.23%。经高效液相凝胶渗透色谱分析可得纯化的鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素均为高纯度多糖,且鲟鱼软骨硫酸软骨素的平均分子量比鸡软骨硫酸软骨素的大。以体外抗肿瘤的方法研究硫酸软骨素粗提物和纯化样品对口腔癌KB细胞的抑制作用,结果所得鲟鱼软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为80.18μg/m L和58.78μg/m L;鸡软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为68.55μg/m L和53.71μg/m L。流式细胞术表明硫酸软骨素能够诱导KB细胞发生凋亡,细胞凋亡率与药物的浓度呈剂量依赖关系,且鸡软骨硫酸软骨素诱导KB细胞凋亡率高于鲟鱼软骨硫酸软骨素。     

响应面法优化鲨鱼硫酸软骨素的提取条件

采用响应面分析法,研究不同提取条件(温度、时间、碱浓度)对鲨鱼硫酸软骨素(ChS)得率的影响,建立提取条件与得率之间的数学模型,并进一步研究不同的超声波处理时间对硫酸软骨素提取率和纯度的影响,确定适宜的硫酸软骨素提取条件。结果：1)采用响应面分析法建立提取条件与硫酸软骨素得率的数学模型为ChS(%)＝14.56 － 0.34x2 － 0.34x1x2 － 0.82x12 － 1.45x22 － 0.47x32,其中碱提温度对硫酸软骨素得率影响最为显著,其次为碱液浓度;2)通过响应面交互作用分析与优化,鲨鱼硫酸软骨素适宜的碱提条件为碱液浓度4%、碱提温度35℃、碱提时间3h,ChS 得率为14.50%;3)在优化的碱提条件处理之前利用超声波处理20min,硫酸软骨素得率可提高到18.07%,纯度为91.58%。     

罗非鱼头中硫酸软骨素的提取工艺研究

利用稀碱法对广西罗非鱼头中的硫酸软骨素进行提取工艺的研究,通过比较硫酸咔唑比色法和高效液相色谱法的分析结果,确定高效液相色谱法为硫酸软骨素的检测方法,以硫酸软骨素的得率为考察对象,对影响硫酸软骨素产品粗提率的因素进行单因素试验,并通过正交试验确定罗非鱼头中硫酸软骨素的最佳提取工艺。试验结果表明:提取硫酸软骨素的最佳工艺条件为NaOH浓度1%,料液比1∶5(g/ml),提取温度40℃,提取时间20h。在此条件下硫酸软骨素粗提率为1.67±0.15%。     

鲟龙鱼硫酸软骨素提取工艺优化研究

利用响应曲面法优化提取西伯利亚鲟龙鱼软骨组织提取硫酸软骨素的工艺条件。研究了碱浓度、沉淀时间、乙醇体积对硫酸软骨素提取率的影响,在单因素实验基础上采用Box-Behnken中心组合实验,以碱质量浓度、沉淀时间、乙醇体积为影响因素,以提取率为响应值建立二元多次方程,通过响应面分析法得到优化组合。结果表明,最佳工艺条件为:Na OH 0.5mol/L、乙醇体积1倍、沉淀时间20min,提取得硫酸软骨素产率为57.21%,预测值产率为59.31%。