不同品种原料乳理化特性分析

主要分析荷斯坦牛、牦牛、娟珊牛、摩拉水牛、尼里-拉菲水牛、Ⅰ代杂交水牛、高代杂交水牛等7个品种的原料乳的常规营养成分,并对原料乳中蛋白质和氨基酸组成及牛乳缓冲能力进行测定。结果显示：摩拉水牛、尼里-拉菲水牛、Ⅰ代杂交水牛和高代杂交水牛的乳脂肪含量分别为6.86%、7.99%、8.34%、8.69%,蛋白质含量分别为5.75%、5.14%、5.78%、5.58%,干物质含量分别为17.07%、18.79%、19.73%、19.88%,显著高于其他3种牛乳;牦牛和娟珊牛乳中乳糖含量分别为5.09%、5.17%,显著高于其他5种牛乳。SDS-PAGE显示：水牛乳中除含有牛乳血清蛋白(BSA)、α-酪蛋白(α-CN)、β-酪蛋白(β-CN)、κ-酪蛋白(κ-CN)、β-乳球蛋白(β-Lg)和α-乳白蛋白(α-La)主要蛋白外,还含有一些未定性蛋白;且水牛乳具有最好的缓冲性能,其次是牦牛乳和娟珊牛乳,荷斯坦牛乳缓冲性能最差。     

水牛乳蛋白质的组成

分析了摩拉水牛（M）、尼里-拉菲水牛（N）、一代杂交水牛（F1）、二代杂交水牛（F2）和高代杂交水牛（Fh）5个品代水牛的乳蛋白主要组分的相对百分比含量．同时分析了总氨基酸组成及钙、磷含量。结果表明，水牛乳蛋白的主要组分有：α-乳清蛋白（α-LA）、β-乳球蛋白（β-LG）、免疫球蛋白轻链（IgG—L）和重链（IgG—H）、αs1-酪蛋白（αs1-CN）、αs2-酪蛋白（αs2-CN），β-酪蛋白（β-CN）、κ-酪蛋白（κ—CN）、血清白蛋白（SA）和乳铁蛋白（LF）等；CN在水牛乳蛋白中占优势，与荷斯坦牛乳相比，水牛乳中CN的质量分数稍低，而且各品代水牛乳中的CN有显著性差异（P〈0．05）；乳清蛋白中β-LG含量最高；杂交水牛乳蛋白高于纯种摩拉水牛和尼里一拉菲水牛，差异显著（P〈0．05）：各品代水牛乳的氨基酸比例比较接近；不同品代水牛乳中钙、磷含量没有显著性差异。     

不同胎次及病牛牛乳中主要蛋白质成分的研究

本文分析了不同胎次、乳房炎及未知病牛牛乳中主要蛋白质成分,揭示了不同影响因素对牛乳中乳蛋白的影响。采用凝胶电泳(SDS-PAGE)结合液相色谱(HPLC)两种方法对不同牛乳中主要蛋白质进行分离检测,结果表明:两种方法都能够有效分离不同牛乳中的主要酪蛋白(αs-CN、β-CN和κ-CN)及乳清蛋白(α-La和β-Lg);SDS-PAGE法可得各蛋白组成及分子量;45 min内RPHPLC法可完成对牛乳中主要蛋白质定性及定量分析。     

高效液相色谱法测定酪蛋白组分

以Sino Chrom 300A C8柱为分离柱,对高效液相色谱法测定酪蛋白组分进行了研究。结果表明,以水(含0.1%TFA)和乙腈(含0.1%TFA)分别为流动A相和B相,采用3号梯度洗脱程序,在流速1m L/min、柱压12.3MPa、柱温40℃、检测波长214nm、自动进样4μL条件下,αs-CN、κ-CN、β-CN被有效分离,峰面积稳定性好,加样回收率高;当αsCN、κ-CN、β-CN的浓度分别为3.75g/L、3.85g/L和1.3g/L时,峰面积与进样量呈良好的线性关系。     

焦磷酸测序法分析中国荷斯坦牛、娟姗牛及水牛的乳蛋白基因多态性

目的本研究旨在分析和比较中国荷斯坦牛、娟姗牛和水牛的乳蛋白基因多态性。方法根据奶牛多态位点设计引物,采用焦磷酸测序法分析乳蛋白基因多态性,并采用高效液相色谱法进行验证。结果荷斯坦牛和娟姗牛的乳蛋白(β-casein,κ-casein和β-lactoglobulin)均存在基因多态性,而水牛仅在κ-casein上存在多态性且多态位点与另两种奶牛不同。结论中国荷斯坦牛、娟姗牛和水牛的乳蛋白基因均存在多态性,焦磷酸测序法能高通量、快速测定乳蛋白基因多态性。     

焦磷酸测序法分析中国荷斯坦牛、娟姗牛及 水牛的乳蛋白基因多态性

目的 本研究旨在分析和比较中国荷斯坦牛、娟姗牛和水牛的乳蛋白基因多态性。方法 根据奶牛多态位点设计引物, 采用焦磷酸测序法分析乳蛋白基因多态性, 并采用高效液相色谱法进行验证。结果 荷斯坦牛和娟姗牛的乳蛋白(β-casein, κ-casein和β-lactoglobulin)均存在基因多态性, 而水牛仅在κ-casein上存在多态性且多态位点与另两种奶牛不同。结论 中国荷斯坦牛、娟姗牛和水牛的乳蛋白基因均存在多态性, 焦磷酸测序法能高通量、快速测定乳蛋白基因多态性。     

高效液相色谱法分析中国荷斯坦奶牛乳蛋白多态性

采用高效液相色谱法检测牛乳中6种主要乳蛋白的多态性。奶样来自102头泌乳中国荷斯坦奶牛。研究发现,酪蛋白中αs2-酪蛋白存在A型和B型两种类型,β-酪蛋白存在A1,A2,B,C和F5种类型,κ-酪蛋白存在A/E型和B型两种类型,而αs1-酪蛋白仅有1种,未发现其多态性;乳清蛋白中,β-乳球蛋白存在多态性,有A,B和C3种类型,但未发现α-乳白蛋白的多态性。研究结果表明,在本试验条件下,中国荷斯坦奶牛乳中除αs1-酪蛋白和α-乳白蛋白外,αs2-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白以及β-乳球蛋白均存在多态性,以β-酪蛋白类型最多。     

反相高效液相色谱法对南方水牛乳乳清蛋白的分离和定量分析

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对广东水牛乳乳清蛋白成分进行了分离和定量分析研究。结果表明乳清蛋白得到较好的分离且重复性良好,3种主要蛋白质(α-La、β-Lg、BSA)回归方程的线性关系>99%,且其保留时间和峰面积的RSD分别小于0.443和2.67,加标回收率范围为99.5%～101%。在相同条件下对南方水牛乳及荷斯坦牛乳进行差异性分析,表明两种乳源乳清蛋白在组分含量和遗传变异体方面均有明显的差异。     

荷斯坦牛乳蛋白多态性与乳成分的关联分析

乳蛋白多态性影响牛乳的营养成分,通过分析乳蛋白多态性对乳成分的影响,可指导企业选育优质基因型的奶牛进行生产,提高经济效益。本文使用反相高效液相色谱法对牛乳蛋白的多态性进行研究,发现在广西地区的55头荷斯坦牛乳蛋白中,除了αs2-酪蛋白、α-乳白蛋白没有多态性外,其他的蛋白皆存在多态性。通过分析荷斯坦乳蛋白多态性与乳成分的关系,发现其乳蛋白多态性对乳成分的组成有影响。     

高酮体乳的蛋白热稳定性研究

以正常乳和高酮体牛乳为原料,测定其在65°C、75°C、85°C和95°C下加热10 min的变性和聚集程度、乳清蛋白氮指数、表面巯基以及表面疏水性等,研究其在不同热处理条件下的理化性质变化及聚集行为。生乳的电泳图谱表明高酮体乳乳的β-酪蛋白(β-CN)、κ-酪蛋白(κ-CN)、α-乳白蛋白(α-LA)比例高于正常牛乳。热稳定性结果表明,热处理导致乳蛋白变性,并发生一定程度的聚集。随着处理强度的增加,乳蛋白变性程度增加。在75～95°C处理下,两种乳均发生一定程度的变性。在85°C和95°C处理下,高酮体乳蛋白表现出更差的热稳定性。     

两种牛乳κ-酪蛋白的间接ELISA定量检测研究

分别以兔血清IgG与鸡卵黄抗体(IgY)为检测抗体,建立了两种牛乳κ-酪蛋白的间接ELISA定量方法。牛乳κ-酪蛋白分别免疫新西兰大白兔和临产母鸡,经亲和层析分离纯化后得到anti-κ-CN-IgG与anti-κ-CN-IgY两种抗体。两种抗体均与β-酪蛋白、α-乳白蛋白和乳清粉存在一定交叉反应,抗体与相应抗原进行免疫吸收后得到高特异性IgG与IgY。用吸收后的anti-κ-CN-IgG建立的间接ELISA法,当标准κ-CN质量浓度在0.098~3.125 mg/L时,A450 nm值与κ-CN的质量浓度具有线性关系,变异系数小于1%,回收率在99.10%~101.1%之间;用吸收后的anti-κ-CN-IgY检测κ-CN,在0.098~6.25 mg/L时,A450 nm值与κ-CN的质量浓度成良好的线性关系,变异系数小于2%,回收率在98%~100.8%之间。当三聚氰胺掺假量在0~20%时,两种抗体均能通过κ-CN的定量检测而实现乳品的掺假检验。     

乳蛋白多态性和盐分布对牛乳凝乳性能的影响

研究不同基因型乳蛋白对牛乳凝乳特性的影响规律。采集1 071 头荷斯坦奶牛血样,分析κ-酪蛋白（κ-casein,κ-CN）和β-乳球蛋白（β-lactoglobulin,β-LG）的基因型,在明确基因型的基础上,采集样品开展牛乳凝乳能力评价。在初步筛选的基础上,选择凝乳性能好、凝乳性能差和不凝乳样品各至少30 份,重复3 次,开展凝乳流变学特性、蛋白多态性及矿物离子分布分析。通过动态流变仪、电感应耦合等离子体质谱仪、毛细管电泳、高效液相色谱技术分析不同凝乳等级牛乳的凝乳时间,胶体钙、镁、磷含量差异,不同基因型导致蛋白多态性及含量对牛乳凝乳能力的影响。结果显示,在所有奶牛组中,β-LG的AB基因型（占比48.48%）最常见,但AA型基因（30.97%）的原料乳凝乳效果较好;κ-CN的BB基因型（12.00%）凝乳效果较好,较AA、AB等其凝乳时间更短和凝胶强度更强。凝乳性能好的样品中CN含量及胶体钙含量较高,pH值较凝乳性能差和不凝乳样品低,凝乳时间与κ-CN含量呈反比,酪蛋白和乳清蛋白组成和基因频率的变化会影响牛乳凝乳性能的变化。     

一种利用毛细管电泳间接测定生鲜乳中添加大豆分离蛋白的方法

运用高效区带毛细管电泳法以pH2.7浓度配制为15mmol/L柠檬酸-20mmol/L柠檬酸三钠作电泳缓冲液同时测定了生鲜乳蛋白和大豆分离蛋白。结果显示β-CN峰面积和迁移时间的相对标准偏差(RSD)分别为3.01%和0.62%,κ-CN峰面积和迁移时间的RSD分别为2.03%和0.49%,大豆分离蛋白峰面积和迁移时间的RSD分别小于5.12%和0.48%,均满足定性和定量分析的要求。建立了利用蛋白峰面积比例关系间接测定生鲜乳中大豆分离蛋白的分析方法,其中β-CN和κ-CN检测限分别为0.17mg/L和0.23mg/L,回收率为99.37%和99.23%,大豆分离蛋白检测限和回收率分别为5.73mg/L和87.44%.     

水牛αS1-酪蛋白多态性对马苏里拉干酪品质的影响

目的分析水牛α_(S1)-酪蛋白多态性对马苏里拉干酪品质的影响。方法以α_(S1)-酪蛋白AB型、α_(S1)-酪蛋白BB型和混合组水牛乳样为原料分别制成全脂马苏里拉干酪,比较3组水牛乳样和干酪在组成、功能特性和微观结构等方面的差异。结果α_(S1)-酪蛋白AB型水牛乳在脂肪、蛋白质和总固形物含量上显著高于BB型。制成马苏里拉干酪后,AB型干酪的蛋白质含量显著高于BB型和混合组干酪。BB型和AB型干酪在硬度、咀嚼性和胶黏性上显著高于混合组。结论不同基因型α_(S1)-酪蛋白水牛乳的乳成分存在差异,α_(S1)-酪蛋白多态性与水牛乳马苏里拉干酪的组成、质构和融化特性等存在显著关联。     

基于脂质聚类分析的可可粉掺假检测方法研究

为从脂质指纹分析角度建立可可粉掺假检测方法,用索氏提取法提取可可粉中的可可脂,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离-蒸发光散射检测器(ELSD)检测,构建可可粉的脂质色谱指纹图谱,根据其共有特征峰的相对峰面积,应用系统聚类分析(HCA)法,对模拟分别掺入板栗壳粉与桂圆壳粉且分别掺入代可可脂和棕榈油的可可粉掺假样品进行脂质指纹分析和掺假鉴别试验。结果表明:该方法对掺入1.2%(占样品质量的百分含量)及以上代可可脂或棕榈油的掺假可可粉样品可以予以鉴别。该方法较简便、灵敏且重复性好,可用于掺入不含脂质或低脂质类杂质的伪劣样品的检测。     

反向高效液相色谱法分离检测乳粉中的酪蛋白

以C8色谱柱为分离柱,利用反相高效液相色谱法,在流速1.0 mL/min,检测波长220 nm,柱温25℃,0.1%TFA水溶液为A流动相;100%乙腈溶液为B流动相的梯度洗脱条件下对乳粉中酪蛋白的4种组分(α_(S1)-酪蛋白、α_(S2)-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白)分离检测。结果表明,该法具有良好的线性关系,重复性好,加标回收率高,对全脂牛乳粉、羊乳粉等乳粉中酪蛋白组分的分离测定有很好的效果。     

水牛乳资源及其理化特性研究进展

水牛乳主要分布于亚洲,是亚洲发展中国家的重要乳源。与荷斯坦牛乳相比,水牛乳含有较高含量的脂肪、乳糖、蛋白质、灰分、钙、维生素A以及较低含量的维生素E;水牛乳的酪蛋白胶束比牛乳要大且富含矿物质。该综述旨在介绍水牛乳资源的分布及各国学者对水牛乳理化特性研究,特别是国外学者对当地不同品种水牛乳理化特性的研究,为我国水牛乳发展及研究提供一些基础资料。     

不同品种水牛乳中矿物元素的测定与分析

为阐明不同奶水牛品种的水牛乳在不同泌乳期的微量元素变化,采集了我国摩拉水牛、尼里-拉菲水牛、以及上述两种水牛加本地水牛(即三品种杂交水牛,以下简称"三杂水牛")在泌乳第15,45,150和200 d的乳样,同时采集了荷斯坦奶牛和娟姗牛的乳样,用ICP-AES法分析乳中几种常量和微量元素的质量浓度。结果表明,水牛乳中矿物元素除钾和钠外,各种矿物元素质量浓度均高于荷斯坦和娟姗牛。以平均值计,水牛乳钙、铁、锌的质量浓度分别是荷斯坦牛乳的1.7,13.0和1.7倍。泌乳期是影响水牛乳矿物元素质量浓度的主要因素,其中以早期和末期质量浓度较高。各品种水牛乳间矿物元素质量浓度无显著差异,但尼里-拉菲水牛乳总体偏低。     

基于指纹图谱和化学计量分析的鳕鱼肝油软胶囊掺假植物油鉴定

目的 建立一种基于脂肪酸气相色谱(gas chromatography, GC) 指纹图谱技术结合化学计量分析的鳕鱼肝油软胶囊中掺假植物油的鉴定方法。方法 采用GC法测定不同来源鳕鱼肝油软胶囊脂肪酸指纹图谱, 经拟合后构建对照指纹图谱, 并进行样品相似度评价。模拟制备鳕鱼肝油软胶囊中掺入不同种类、不同比例植物油的掺假样品, 以其中14个共有脂肪酸峰的相对峰面积作为数据源, 输入SIMCA-P数据分析软件进行主成分分析(principal component analysis, PCA)及掺假模型建立。结果 获得鳕鱼肝油软胶囊GC对照指纹图谱及三维掺假识别模型, 44批样品经相似度评价发现有2批拟似掺假植物油, 将拟似样品色谱数据标准化后导入SIMCA-P软件, 显示2批样品均掺了大豆油, 掺假比例约为15%和35%。结论 脂肪酸GC指纹图谱结合化学计量分析为鳕鱼肝油软胶囊中掺假植物油的鉴定提供一种可靠准确的检测手段, 可快速有效识别鳕鱼肝油掺假行为。     

毛细管区带电泳在牛乳蛋白掺假检测中的应用及方法优化

目的:利用毛细管区带电泳技术,进行牛乳掺假检测,解决原料乳收购环节,快速判定是否有非乳源蛋白的掺杂的难题。方法:本文通过优化毛细管区带电泳分离条件中的缓冲体系及其pH、进样条件、毛细管长度、分离电压,最终建立适于牛乳蛋白的最佳检测条件。结果:适于牛乳蛋白的最佳检测条件为60 cm毛细管柱,pH2.75的磷酸盐缓冲液,6.895 kPa、10 s的压力进样方式及25 kV的分离电压。利用优化的方法建立牛乳蛋白中14种毛细管区带电泳图谱,以及常见的掺假蛋白——大豆分离蛋白和水解胶原蛋白的检测方法,明确其在原料乳中的特征定性峰、定量回归方程(相关性指数均大于0.996)及其最低检测限(4.5%和4.8%)。结论:本文通过优化牛乳蛋白的毛细管区带电泳分离条件,最终建立起牛乳蛋白的毛细管区带电泳图谱,并将其应用于原料乳蛋白组成和原料乳蛋白掺杂测定,为原料乳收购环节的乳蛋白掺假检测提供一种快速、可靠的方法。