里氏木霉液体发酵纤维素酶的研究

里氏木霉突变株ＲＭ－２７是一种高产纤维素酶生产菌。本文对里氏木霉ＲＭ－２７摇瓶发酵产酶条件及小型自动发酵罐工艺条件等进行了系统的研究。试验结果表明，在通风量０．２－０．６ｖｖｍ，搅拌转速为２５０－４００ｒｐｍ、发酵温度２９℃及控制发酵液ｐＨ在５．０－５．５的条件下，在２５Ｌ发酵罐上发酵１０４小时左右，其滤纸酶活和羧甲基纤维素酶活分别为３１．８和５１６０ｍｇ葡萄糖／ｍｌ，发酵滤液用硫酸铵盐析沉淀得固     

以水稻秸秆为基质里氏木霉产酶条件优化

以里氏木霉(Trichoderma reesei)为研究对象,对水稻秸秆进行糖化试验。通过单因素试验及响应面法优化里氏木霉产酶培养基及产酶条件。结果表明,里氏木霉产酶最佳培养基为：水稻秸秆15.0 g/L、(NH₄)₂SO₄ 2.0 g/L、KH₂PO₄ 3.0 g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L、吐温-80 0.5 mL/L、微量元素液10.0 mL/L、FeSO₄·7H₂O 0.005 g/L。此优化条件下,菌株的滤纸酶酶活为0.612 PFU/mL,提高了52.6%。最佳发酵条件为：发酵温度29℃,初始pH 6、接种量5.0%、转速150 r/min、发酵时间8 d。在此优化条件下,滤纸酶酶活为1.12 PFU/mL,提高了83.2%。     

里氏木霉纤维素酶降解小麦秸秆的研究

实验确定的里氏木酶纤维素酶降解小麦秸杆的最佳降解条件是：pH值5.0，温度50℃，降解36h，在此条件下可以获得57.6%的底物转化率，金属离子Mn^2 ，Fe^2 能显著地促进底物的降解，而重金属离子Pb^2 ,Al^3 则不利于秸杆的降解。     

里氏木霉固体发酵生产纤维素酶的研究

里氏木霉突变株RM—27是一株高产纤维素酶生产菌,采用固体发酵,发酵144h(培养温度29℃),其滤纸酶活和β—葡萄糖苷酶活分别为600和115mg葡萄糖/gDMh。本试验系统研究了各种营养成份和培养条件对RM-27菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基:稻草杆或小麦杆70g、麸皮30g、硫酸铵3.0g、玉米浆2.0g,加水200ml,自然pH。酶反应最适温度和pH分别为60—65℃与pH5.0。酶pH稳定性较好,在pH3.0—7.0范围内处理3h,残余酶活力在89％以上,该酶经50℃处理30min,剩余酶活力为85.6％。     

里氏木霉固体发酵生产纤维素酶的研究

以里氏木霉突变株ＲＭ－２７为纤维素酶生产菌，采用固体发酵法，２９℃发酵１４４小时，其滤纸酶活和β－葡萄糖苷酶活分别为６００ｍｇ和１１５ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。并系统研究了各种营养成份和培养条件对ＲＭ－２７菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为稻草杆或小麦杆７０ｇ、麸皮３０ｇ、硫酸铵３．０ｇ、玉米浆２．０ｇ，水２００ｍｌ，自然ｐＨ。酶反应最适温度６０￣６５℃，最适ｐＨ为５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ     

白腐菌粗酶液处理对烟梗RMP木素含量及烟草薄片物理性能的影响

利用白腐菌的粗酶液处理烟梗盘磨机械浆(RMP),研究白腐菌粗酶液的用量和处理时间对烟梗RMP中木素降解率及烟草薄片的抗张强度和柔软度的影响。结果表明,粗酶液对烟梗RMP的最佳处理条件为酶液用量15 IU/g,处理时间为3 h;在此条件下,获得的烟梗RMP的木素降解率为33.48%,抗张指数为9.13 N.m/g,柔软度为518 mN。经评吸实验感官评价,与未经粗酶液处理的烟梗RMP配抄的烟草薄片相比,经粗酶液处理的烟梗RMP配抄的烟草薄片的木质杂气减少,刺激性降低,品质得到提升。     

里氏木霉纤维素酶高产菌株发酵特性的测试

文中通过对里氏木霉进行诱变处理,并经高效的纤维素酶菌种的筛选方法,选育得到了一株抗分解代谢阻遏的突变株,使纤维素酶活力有大幅度的提高。在此基础上,对该菌株发酵特性进行了检测。     

里氏木霉与黑曲霉共同培养固态发酵生产饲用酶的研究

介绍了里氏木霉与黑曲霉共生用固态发酵工艺生产饲料用酶的方法。借助同时糖化与发酵的概念，在里氏木霉生长繁殖进入旺盛时期适时接入黑曲霉。而黑曲霉与里氏木霉共生，不仅有益于酶系的改善，而且黑曲霉的生长繁殖消耗了纤维素酶促水解所生成的葡萄糖等，有益于纤维素酶的合成。与此同时生成适量的酸性蛋白酶、果胶酶及糖化酶，提出了原料的利用价值。研究结果表明，影响酶活力的关键因素是培养基的水分及接种的时间，纤维素的量与结构亦是一个重要的因素。     

碳源对里氏木霉纤维素酶诱导合成的影响

纤维素酶是诱导酶,理想的碳源应该既能提供菌种生长所需能量,又能诱导纤维素酶基因的高效表达。试验中分别以葡萄糖经过转糖苷反应后制备的复合糖(F)、微晶纤维素(C)以及上述两者(1∶2)的混合物(M)为里氏木霉(Trichoderma Reesei ZU-04)的碳源,在液态深层发酵条件下生产纤维素酶。对纤维素酶酶系组成的研究结果表明:F碳源诱导作用下,内切型-β-葡聚糖酶(Cx酶)和外切型-β-葡聚糖酶(C1酶)的活力在发酵初期上升很快,通常在40h左右达到峰值,此后活力呈下降趋势,而β-葡萄糖苷酶(CB酶)的活力始终较低;C碳源诱导作用下,Cx、C1和CB酶的活力上升在发酵初期比较缓慢,但持续时间长、后劲足;在采用M碳源的情况下,Cx、C1酶的初始合成速度较快,且2种酶的活力在较长时间内保持上升趋势。与F和C碳源相比,Cx酶活力分别提高了78.2%和51.9%,C1酶活力分别提高了20.6%和6.5%,但对CB酶的生产而言,M碳源略低于C碳源,F碳源最差。进一步研究了碳源对纤维素酶总活力(滤纸酶活力)的影响,结果显示:在采用F碳源的条件下,发酵6h即可检测到滤纸酶活力,在36h达到峰值1.6IU/mL,此后活力不再上升;在采用C碳源时,发酵初期酶活力上升缓慢,产酶周期较长,滤纸酶活力在144h达到峰值3.96IU/mL;而M碳源可结合两者优势,使纤维素酶活力和产率都能达到较高的水平。研究结果对于定向调控纤维素酶的酶系组成,提高纤维素酶的生产效率具有重要意义。     

里氏木霉对酒糟饲料的营养价值影响评价

为充分利用酒糟资源,通过固态发酵将其制成营养价值较高的发酵饲料。从粗蛋白、粗脂肪、灰分、总糖、粗纤维、氨基酸组成等方面考察了不同添加量里氏木霉(3%、5%、8%)对酒糟固态发酵前后营养价值的影响。结果表明,添加5%的里氏木霉进行固态发酵后,酒糟饲料营养价值较高。     

高产纤维素酶的里氏木霉液态发酵培养基条件优化

以天然原料作为培养基主要成分,采用Plackett-Burman(PB)、最陡爬坡和Box-Behnken(BB)试验设计及响应面(RSM)分析,对高产纤维素酶的里氏木霉液态发酵培养基进行优化.结果表明:最优发酵培养基条件为豆饼粉添加量2.140％,麸皮添加量1.88％,蛋白胨添加量0.30％,在此条件下,里氏木霉发酵...     

一株里氏木霉产纤维素酶发酵条件的研究

对里氏木霉产纤维素酶的发酵条件进行研究,结果表明:产酶最佳碳源为2‰麸皮、最佳氮源为(NH4)2SO4、培养时间96～120h、发酵瓶装液量60ml、培养温度25～30℃、培养液初始pH4.5～5.0。     

聚乙烯醇固定化酵母粗酶发酵玉米秸秆纤维素工艺研究

以聚乙烯醇(PVA)为载体将从热带假丝酵母菌制备的粗酶进行固定化,并通过响应面方法对生物质乙醇的发酵工艺进行了一系列研究.在单因素试验的基础上,确定粗酶量、底物浓度和pH值为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,以乙醇得率为响应值,进行响应面分析.结果表明,PVA法固定化热带假丝酵母粗酶的最佳条件为:粗酶量0.36g,底物浓度8%,pH 4.53:在该条件下进行固定化发酵的乙醇得率为25.84%.     

里氏木霉Rut-C30发酵热水预处理稻草产纤维素酶

为提高工业生产菌Trichoderma reesei Rut-C30产酶能力,以热水预处理稻草(hot water pretreated rice straw,HWPRS)为碳源,开展系统优化培养基与培养条件以及采用添加剂等方面的实验工作。菌株初始摇瓶发酵HWPR产纤维素酶在168 h时滤纸酶活(FPA)为1.20 U/m L。通过单因素实验与正交实验,获得最佳培养基(g/L):HWPRS 50.0、玉米浆6.0、(NH_4)_2SO_44.0、KH_2PO_41.0、尿素0.2、MgSO_4·7H_2O 0.4、CaCl_20.3;最佳培养条件:pH6.0、转速220 r/min、温度30℃、接种量φ6%;优化后菌株产酶FPA达2.69 U/m L,是优化前2倍以上。添加吐温-80能显著提高产酶,β-葡萄糖苷酶活(BG)提高26%;添加乳糖主要能提高BG酶活;实验中首次发现壳聚糖类物质能促进纤维素酶发酵,其中壳聚糖效果最明显,添加1.5 g/L壳聚糖时纤维素酶FPA与BG分别提高了10%和30%,使纤维素酶FPA、CMCase和BG分别达到3.67、8.65和1.76 U/m L。该产酶稳定性为上罐实验证实,所产纤维素酶FPA水平是初始摇瓶发酵的3倍,初步显示了其工业发酵潜力。     

里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及酶学性质

采用冻干浓缩,硫酸铵盐析,Sephacryl S-200 High Resolution凝胶柱层析,HiTrap Desalting凝胶柱脱盐,HiTrapTMSP(HP)离子柱层析对里氏木霉EIM-30的发酵液进行分离纯化,获得两个纯化的木聚糖酶组分,分别命名为Xylanase A和Xylanase B。纯化倍数分别为3.58和3.29,回收率分别为7.02%和28.29%。SDS-PAGE结果均为单一条带,分子质量分别为29.6 ku和20.9 ku。酶学性质研究结果表明:Xylanase A和Xylanase B的最适反应温度分别为55℃和60℃;温度低于50℃,两种酶的稳定性都很好;最适pH一样,都为5.0;pH稳定范围也一样,都为3.5⁷.0;Mn2+、Tris对Xylanase A有激活作用,Fe2+、Cu2+、SDS则对该酶有抑制作用;Mn2+对Xylanase B有激活作用,Zn2+、Ca2+、Fe2+、Cu2+、Ba2+、Mg2+及SDS则对该酶有抑制作用。     

聚乙烯醇固定化酵母粗酶发酵玉米秸秆纤维素工艺研究

以聚乙烯醇(PVA)为载体将从热带假丝酵母菌制备的粗酶进行固定化,并通过响应面方法对生物质乙醇的发酵工艺进行了一系列研究。在单因素试验的基础上,确定粗酶量、底物浓度和pH值为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,以乙醇得率为响应值,进行响应面分析。结果表明,PVA法固定化热带假丝酵母粗酶的最佳条件为:粗酶量0.36g,底物浓度8%,pH4.53;在该条件下进行固定化发酵的乙醇得率为25.84%。     

白腐真菌产木聚糖酶发酵条件的优化及酶学性质研究

通过正交实验对白腐真菌Pleurotus ostreatus SYJ042产酶条件进行了优化,研究了该酶的酶学性质。结果表明:最适发酵条件为:碳源为5%的麸皮和玉米芯(1:1),氮源为0.5%的蛋白胨,接种量为每50mL发酵液接4块菌丝块,发酵时间为8.5d。该酶的最适温度是50℃,最适pH为5.4;Zn2+、Ca2+对酶活性影响较小;Ag+、MnO2-4影响较大。     

响应面法优化里氏木霉产木聚糖酶发酵培养基

采用响应面法对里氏木霉产木聚糖酶的发酵培养基进行了优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产酶的3个主要因素:乳糖、玉米浆和KH2PO4。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件。结果表明,乳糖45.13g/L,玉米浆15.94g/L,（NH4）2SO43g/L,KH2PO42.73g/L,MgSO4·7H2O0.8g/L,无水CaCl20.6g/L,吐温-801mL/L时,木聚糖酶最大理论酶活为855.01U/mL。经5次平行实验验证,实际平均酶活与预测酶活相近,比优化之前的酶活提高了24.1%。      

白腐菌Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理对杨木SCMP性能的影响

研究了白腐菌Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理对磺化化学机械浆（SCMP）性能的影响。结果表明：Lg-9粗酶液预处理可改善SCMP的打浆性能,降低打浆能量消耗,预处理后打浆的纤维平均长度增大,细小组分含量降低,宽度稍有增大。Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理可提高SCMP白度,改善强度。Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理的漂后浆纤维平均长度较长,细小组分含量较少,粗酶液用量大于8IU/g浆时,随着粗酶液用量的增大,纤维平均长度有所降低,细小组分含量有所提高。     

在黑果腺肋花楸中共发酵里氏木霉和绿色木霉生产木聚糖酶

木聚糖酶在造纸、酿酒等方面有广泛的应用。为了获得低成本高活力的木聚糖酶,以黑果腺肋花楸作为主要培养基原料,通过单因素试验和正交试验,探索里氏木霉和绿色木霉共发酵生产木聚糖酶的培养条件。结果表明,木聚糖酶活性最高的培养条件为氮源(NH₄NO₃)质量浓度0.5 g/L,果渣质量分数25%,里氏木霉与绿色木霉的质量比3∶2,接种质量分数14%,pH 5.50,培养到第4天时,其木聚糖酶活性高达121.62 U/mL。同时还探究了无机离子添加量对木聚糖酶活性的影响,无机离子的最佳添加量是MgSO₄ 12 mg/L和MnSO₄ 1.4 mg/L。结合正交试验的最佳培养条件以及最佳无机离子添加量进行发酵后,木聚糖酶的活性高达(127.25±0.09) U/mL,与基础培养基相比,木聚糖酶产量增加了69.46%。使用里氏木霉和绿色木霉共发酵黑果腺肋花楸生产木聚糖酶在获得了高活性木聚糖酶的同时降低了成本,对木聚糖酶工业化生产有重要参考价值。