水稻愈伤组织端粒酶催化特征检测

端粒是位于染色体末端富含鸟嘌呤的双链DNA结构.端粒酶以自身的一段RNA为模板,按照碱基互补配对的方式产生端粒重复序列以延伸端粒长度,维持染色体的稳定.以水稻愈伤组织为实验材料,分离、提取端粒酶,并以不同3'端的寡核苷酸作为前导引物对体外水稻端粒酶催化特征及不同引物对酶活性的影响进行了探究.结果显示:S水稻愈伤组织端粒酶提取液在延伸前导引物时,以催化合成的TAGGGTT末端百分比含量最高,表明在催化延伸寡核苷酸的过程中,倾向于优先催化合成TAGGGTT端粒重复序列.尤其在前导引物3'末端为TT碱基和GT碱基最突出,其次是TA碱基, 而AG碱基和GG碱基不明显,推测水稻端粒酶模板RNA与前导引物的结合位点为一个碱基,偏好性为T>A>G.这些特征、特性对尚未克隆的水稻端粒酶RNA,以及对深入研究端粒末端结构及染色体遗传稳定性具有重要意义.     

人端粒酶RNA突变对HeLa细胞作用

端粒存在于真核生物染色体末端,由特定的DNA重复序列及与之特异性结合的蛋白质构成。在正常人体细胞中,每一次细胞分裂,由于DNA复制时的方向必须是从5’到3’端,因而伴随着染色体末端的端粒逐渐缩短。当端粒缩短到一定程度时,细胞开始走向凋亡。同时,端粒能在端粒酶作用下延伸,利用自身的RNA为模板合成端粒DNA。文章通过突变端粒酶RNA靠近模板的序列碱基A^61 A^62／GG以及G^63 G^64／AA,构建穿梭质粒,转染HeLa细胞,研究端粒酶位点突变对细胞生长的影响。研究结果显示不同的突变位点对HeLa细胞分裂活性有明显影响,这为深入研究肿瘤的分子遗传机制提供参考。     

水稻端粒长度测定及其遗传特性研究

端粒在保护和维持染色体完整性方面发挥了重要作用,且与细胞衰老、癌变密切相关。由于同一细胞内,不同染色体端粒长度存在差异,研究单个端粒长度的遗传特性对于深入了解端粒的作用,阐明端粒与细胞周期间的关系具有重要意义。本研究利用水稻籼亚种和粳亚种之间平均端粒长度存在明显差异的特点,结合它们的杂种F1、F2代群体,采用改良的单个端粒长度测定技术(STELA),对T02p、T02q、T04q、T09p、T10q、T11p等6个端粒长度进行了分析。结果表明:单个端粒长度与相关染色体长度存在相关性,且具有数量性状遗传特征。更重要是F1代与亲本之间有5个端粒没有显著差异,仅有T04q一个端粒呈现出超显性遗传效应,且超过极显著的水平。因此,推测调控细胞周期的端粒长度并非是整个细胞平均端粒长度,而是某些或极少数关键端粒的长度。     

水稻端粒长度测定及其遗传特性研究

端粒在保护和维持染色体完整性方面发挥了重要作用,且与细胞衰老、癌变密切相关。由于同一细胞内,不同染色体端粒长度存在差异,研究单个端粒长度的遗传特性对于深入了解端粒的作用,阐明端粒与细胞周期间的关系具有重要意义。本研究利用水稻籼亚种和粳亚种之间平均端粒长度存在明显差异的特点,结合它们的杂种F1、F2代群体,采用改良的单个端粒长度测定技术(STELA),对T02p、T02q、T04q、T09p、T10q、T11p等6个端粒长度进行了分析。结果表明:单个端粒长度与相关染色体长度存在相关性,且具有数量性状遗传特征。更重要是F1代与亲本之间有5个端粒没有显著差异,仅有T04q一个端粒呈现出超显性遗传效应,且超过极显著的水平。因此,推测调控细胞周期的端粒长度并非是整个细胞平均端粒长度,而是某些或极少数关键端粒的长度。     

西兰花端粒酶分离与活性测定探究

植物端粒酶以自身的RNA亚基为模板，维持着染色体末端端粒的长度，从而使植物细胞可持续分裂。本研究以西兰花花蕾为材料，采用不同分子量、不同浓度的PEG分别提取端粒酶，根据PEG吸附蛋白质的原理，从具有端粒酶活性的组织中分离并富集端粒酶。结果显示：用PEG6000提取西兰花端粒酶，且用100μg的酶量进行酶促反应时测得的端粒酶活性最高。以此为参数，经改进的TRAP法成功检测到：用0．2g PEG6000／700μL洗脱液提取出的端粒酶活性很高。这些分离、检测技术为其它植物组织中端粒酶活性的检测和评价提供了新的途径，尤其对低活性的植物端粒酶检测具有重要意义，为深入研究端粒酶RNA的序列及结构奠定了基础。     

水稻端粒酶RNA候选序列的克隆及特征解析

端粒酶是由端粒酶反转录酶和端粒酶RNA构成,端粒酶RNA中含有端粒合成所需的模板序列.现仅获得了拟南芥的端粒酶RNA序列.为了建立快速有效的富集植物端粒酶的方法并克隆水稻的端粒酶RNA序列,研究中使用不同浓度的PEG6000选择性的沉淀端粒酶萃取液中的杂蛋白.结果表明当PEG6000浓度为4％时,端粒酶活力最高,并可以有效降低核糖体28S rRNA和18S rRNA的干扰.从端粒酶蛋白液中提取RNA,并在其3′端连接接头,在模板区设计上游引物,PCR扩增获得一条292 bp的未知片段,其中含有端粒模板序列5'-AAACCCTAA-3′.将该片段及拟南芥端粒酶RNA的转录调控区进行序列比对分析发现,两者具有类似的转录调控元件.因此,初步判定292bp的目的片段为水稻端粒酶RNA的模板下游序列.     

水稻端粒酶RNA模板基因序列鉴定体系的建立

利用水稻端粒酶对端粒序列的合成作用,对模板基因序列进行定点突变,构建了pCambia1301-T突变型、pCambia 1301-Y野生型载体.经农杆菌介导,选用水稻不同品种和组织,探索候选序列的鉴定体系.结果显示,不同水稻品种诱导愈伤,差异显著,其中中花11号可快速诱导愈伤,比广陆矮4诱导时间缩短一半,用成熟胚和幼胚分别诱导愈伤,无明显差异;对突变型、野生型、正常组织进行基因组DNA端粒鉴定和端粒酶活性分析,发现突变型端粒酶活性明显高于对照.这些均表明该鉴定体系完整、可靠,为端粒酶RNA模板基因序列的鉴定建立了有效的方法.     

双主密封特殊螺纹油管接头密封性能研究

针对超深油气井中对密封性能的严格要求,基于特殊螺纹密封机理,设计一种由锥面对锥面和柱面对球面组成的双主密封特殊螺纹接头结构。采用数值模拟方法分析接头在拉伸、压缩、拉伸和内压、拉伸和内外压4种工况下,双主密封面接触应力、接触长度的变化情况,并对螺纹接头在极限载荷下的密封性能进行研究,得到接头密封能力随不同载荷的变化规律。最后对接头试样进行全尺寸试验,结果表明该双主密封特殊螺纹接头的密封性能满足使用要求。     

T-RFLP技术在厌氧氨氧化菌群结构分析中的应用

为实现对样品中厌氧氨氧化菌群落组成的快速分析,提出一种基于末端限制性片段长度多态性技术(T-RFLP)分析环境样品中厌氧氨氧化菌群结构的方法.通过对SILVA(R108)SSU Ref数据库中已知厌氧氨氧化菌16S rD-NA序列的模拟PCR和酶切分析,选取合适的PCR引物(Amx368f-Amx820r)和限制性内切酶(MspI和RsaI),使得不同厌氧氨氧化菌属对应不同末端片段长度(T-RFs),从而完成对厌氧氨氧化菌群落组成的快速分析.重复性和灵敏性检验结果表明,该方法能够有效、稳定地应用于环境样品中厌氧氨氧化菌群落组成的快速分析.     

真菌产人参皂苷葡萄糖苷酶基因的调取

根据已知的人参皂苷糖苷酶(GluGF)的N端氨基酸序列设计简并引物,从Absidia Sp.R84g菌株的总RNA出发,应用RACE技术,快速扩增测序得到cDNA3′末端与cDNA5′末端的未知序列,利用扩增测序所得到的cDNA5′末端和cDNA3′末端的序列设计引物,进行二次RT-PCR扩增并测序得到GluGF基因的全序列。回收PCR产物测序,得到GluGF基因的序列全长为2149 bp,其中5′UTR长度为82 bp,3′UTR长度为114 bp,GluGF的CDS区序列全长为1 923 bp,所编码的氨基酸序列的长度为640个氨基酸。     

Banach代数中的行列式理论

探讨了 Banach 代数中的行列式理论.给出了具有单位元的迹 Banach 代数具有行列式的充要条件.     

非织造布滤料性能及过滤过程的研究进展

对近年来非织造布滤料的研究进展做了简要综述,介绍了内部结构的研究及表征、过滤性能及其影响因素、过滤过程的计算机模拟,指出进一步发展所需要解决的问题。     

Towards Excellence in Science Chinese Academy of Sciences

<正>May 26,2014,BeijingScience is a human enterprise in the pursuit of knowledge.The scientific revolution that occurred in the 17th Century initiated the advances of modern science.The scientific knowledge system created by human beings,the tremendous productivity brought about by science,and the spirit,methodologies and norms formulated in scientific practice since the 17~(th)Century have long become essential elements of     

SCIENCE CHINA Technological Sciences SUBJECT INDEX TO VOLUME 57(2014)

<正>~~     

单面约束系统的微分变分原理与运动方程

研究单面约束力学系统的微分变分原理和运动方程。方法利用Ｄ＇Ａｌｅｍｂｅｒｔ原理建立Ｄ＇Ａｌｅｍｂｅｒｔ－Ｌａｇｒａｎｇｅ原理．Ｊｏｕｒｄａｉｎ原理和Ｇａｕｓｓ原理,结果与结论得到系统的微分变分原理和带乘子的Ｅｕｌｅｒ－Ｌａｇｒａｎｇｅ形式,Ｎｉｅｌｓｅｎ形式和Ａｐｐｅｌｌ形式的运动方程。     

q-树的重构性

q 是一个正整数,所谓 q-树的图是递归定义的:最小的 q-树是完全图 K_q,一个 n+1阶的 q-树是通过在 n 阶 q-树上加上一个新点并连接这点与 n 阶 q-树中任意 q 个互相邻接的点而获得,其中 n≥q.1-树我们通常称为树.在本文中,证明了对任意正整数 q,q-树是可重构的.     

β-环糊精-毛细管区带电泳分离扑尔敏对映体

采用毛细管区带电泳模式,以β-环糊精为手性选择剂分离了药物扑尔敏的光学对映体.考察了在不同背景电解质 pH 值尤其是较低 pH 值下环糊精浓度对对映体表观淌度差的影响,并研究了有机改性剂尿素在分离中的作用.     

层状球形夹杂复合材料的弹性模量

利用层状球形夹杂在无限大基体中的局部化关系及平均应力场理论,给出了一种方法来分析含 n 种层状球形夹杂所构成复合材料的弹性模量.对于文献给出的空心玻璃球和高分子基构成的复合材料,该理论的预测与实验吻合很好.当表层稍失时,该理论退化为传统的 Mori-Tanaka平均应力场理论.     

CVD涂层硬质合金刀具的失效机理

通过系统的实验研究和理论分析,揭示了 CVD(化学气相沉积)涂层硬质合金刀具在磨损和破损状态下的不同的失效机理,并在机理分析的基础上,阐明了涂层硬质合金刀具对于切削条件的特殊适应性.