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以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0%,批间变异系数<15.0%,回收率为99.4%~108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值<10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用. 相似文献
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一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。 本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0%,批间变异系数<15.0%,回收率为99.4%~108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值小于10.0μg/L。该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用。 相似文献
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高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒 总被引:2,自引:0,他引:2
以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %~ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3~ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用 相似文献
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磺胺甲恶唑酶联免疫分析法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了磺胺甲恶唑(Sulfamethoxazole,SMX)酶联免疫分析方法,用以检测动物源性食品中SMX的残留。利用辣根过氧化物酶(HRP)标记SMX,兔抗SMX抗体制备固相抗体,通过标本中的SMX和一定量酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗,标本中SMX的量和显色后的OD450呈负相关的原理检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定,本方法的灵敏度为0.067μg/L,批内变异系数<10%,批间变异系数<20%。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94.9%~116.0%、82.0%~107.6%、81.6%~94.9%、89.0%~93.0%,符合免疫分析方法的要求。 相似文献
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黄曲霉毒素B1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 总被引:8,自引:0,他引:8
采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB1-TRFIA).以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu3 标记的羊抗兔抗体进行示踪.该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01-100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测.8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L.比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917.研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 相似文献
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固相包被TG,TG与辣根过氧化物酶偶联制备TG酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TG Ah酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异因数<10.0%,批间变异因数<15.0%,特异性鉴定显示与TM无明显交叉反应。正常参考值<50.0IU/mL(n=100)。该方法具有简便、快速和定量准确的特点,适用于临床检测和科研应用。 相似文献
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滤纸干血-新生儿促甲状腺素酶联免疫分析试剂盒的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),两株识别人促甲状腺素(hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了滤纸干血-新生儿促甲状腺素生物素-亲合素酶联免疫分析(NeonatalTSH-BA-ELISA)试剂盒的制备方法。本方法的灵敏度为0.5mIU/L,批内变异系数<15%,批间变异系数<20%,回收率为90.1%~103.3%。本方法所制备的试剂盒与NeonatalTSH-IR-MA(磁颗粒法)试剂盒具有良好的相关性,相关方程为y=1.01x+0.34,相关系数为r=0.873。本试剂盒无放射性,操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 相似文献
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研制了~(125)I标记的PGI_2稳定的代谢产物6-酮-PGF_(1α)RIA试剂盒。以碳化二亚胺法将6-酮-PGF_(1α)与BSA联接免疫家兔制备抗血清,其效价为1:32000,平衡常数为6.26×10~9L/mol,与其它前列腺素的相对百分交叉反应<1%。用氯胺T法制备~(125)I-组织胺-6-酮-PGF_(1α)标记物,比放射性活度>14.8MBq/μg(400μCi/μg),最高结合率>80%,二月内无脱碘现象。放免测定按常规法,最低检出值为2,2pg/管,检出率为97.2~102.3%,精密 度为6.62%,批内和批间C.V.分别为7.17、8.41%,Cerceo“效点系统”评分为31分,属优良。直接测定健康成人血浆6-酮-PGF_(1α)浓度为22.9±6.3pg/mL。 相似文献
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人胎盘泌乳素原料经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析在相对分子量为21 000~22 000处有两条显色相近的主带,在5 000~80 000处有数条微弱杂质色带,蛋白定量分析为1.06 g/L,用放射免疫分析方法标定其免疫活性为2.187 g/L,其剂量-反应曲线与人胎盘泌乳素国际参考品(编号73/545)平行,表明该原料适于制作标准品.用含0.2%(w/V)人血清白蛋白、1%甘露醇的磷酸盐缓冲液(0.01 mol/L,pH7.4)配制的30 mg/L人胎盘泌乳素溶液按每安瓿0.5 mL分装,经冷冻干燥制备成标准品.以人胎盘泌乳素国际参考品为对照品,用放射免疫分析法对其免疫活性进行标定,均值为14.19μg/支,95%可信限为13.50~14.88 μg/支.分别以国际标准品和本标准品为对照品测定同一套人胎盘泌乳素质控血清,证明对不同剂量水平的质控血清测定均值非常接近,统计学分析上无显著差异,P>0.05. 相似文献
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以间接标记法首先合成中间体对砹苯甲酸,再通过活化羧基反应联接到3H_(11)McAb上,制得~(211)At-3H_(11)McAb偶联物,放射性比度为18.5—61.1kBq/μg。ELISA法鉴定标记后的~(211)At-3H_(11)McAb的免疫活性与未标记3H_(11)McAb一致。实验表明:~(211)At-3H_(11)McAb对靶细胞杀伤效应高于~(211)At-IgG及Na~(211)At;当靶细胞先与一定量3H_(11)McAb或3G_9McAb(4μg)作用1h,可抑制~(211)At-3H_(11)McAb对靶细胞的杀伤效应,放射性比度不影响杀伤效应。 相似文献
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采用两株抗胰岛素单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯板、另一株标记辣根过氧化物酶,建立了测定人胰岛素的双抗体夹心酶联免疫分析法。方法学研究表明,本方法的灵敏度为1.7mIU/L,曲线范围5~160mIU/L,批内、批间变异系数分别小于11%、15%,回收率96.4%~111.1%;高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.998;38例健康人血清样品测定值为3.6~10.8mIU/L。该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好,r=0.97。 相似文献
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采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1~100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%~6.48%和4.61%~13.1%,回收率为95.8%~117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率<1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别<0.05%和<0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=1.10x-0.207,相关系数r=0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=1.00x+0.191,相关系数r=0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 相似文献
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以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸(T3)生物素-亲合素酶联免疫分析(T3-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%~8.3%和6.5%~10.5%,回收率为98.1%~107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。 相似文献