免疫金法与ABC法在电镜包埋前染色之比较

包埋后免疫电镜术虽能精确定位抗原,但难度大。本文用胶体金标记法与ABC法对人鼻中线恶网瘤组织在树脂包埋前作抗人T细胞免疫染色,并对两种方法进行比较。简述如下:临床活检鼻中线恶网组织,经4％多聚甲醛加1％戊二醛4℃固定,振动切片(50μm),PBS冲洗,在预先硅化的载玻片上作免疫染色:鼠抗人T细胞McAb(Dako公司出品)孵育过夜;金标羊抗鼠抗体(10nm,军科院基础所出品)室温下孵育1小时,再将切片倾入小瓶,经1％锇酸后固定,常规脱水包埋及超薄切片,不作铀铅复     

电镜包埋块快速制备中污染物的实验观察

临床诊断电镜工作的开展 ,必然要求改变以往周期长的制样过程 ,而包埋块制备过程所花时间最多 ,人们用微波聚合、高温聚合等条件以缩短聚合时间 ,并在实际工作中得以应用 [1]。但常为了快速 ,而在样品固定到包埋前的处理中忽视了某些细节 ,造成包埋块制备中的人为污染 ,影响电镜观察 ,这些污染无法通过返工来弥补。本文就此污染物产生进行模拟实验与探讨。材料与方法正常小鼠乙醚麻醉后 ,快速取肾组织入 3%戊二醛 - 1 .5 %多聚甲醛的前固定液中 ,后固定液用 1 %锇酸 - 1 .5 %亚铁氰化钾 ( 1∶ 1 ) ,70 %酒精饱和铀液块染过夜 ,系列酒精、丙…     

不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响

目的:探讨不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响。方法:切取大鼠的坐骨神经及肾脏组织,经戊二醛-锇酸双重固定,乙醇、丙酮梯度脱水后,分别用Epon812和Eponate12包埋聚合,利用超薄切片机制备厚度为1.5μm的半薄切片,切片经甲苯胺蓝染色,在光镜下观察半薄切片的染色效果。结果:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后,颜色更鲜艳,微细结构更清晰,图像反差更好。结论:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后更有利于在光镜下观察组织的微细结构。     

肥大细胞电镜半薄切片染色方法

用7种不同的染色方法对环氧树脂包埋的大鼠空肠粘膜组织半薄切片中的肥大细胞进行染色和定位.光镜观察结果显示,盐酸甲苯胺蓝染色法简便快速,着色效果良好,适于肥大细胞半薄切片快速定位;硫堇、姬姆萨和中性红染色显示肥大细胞颗粒清晰,也可用于肥大细胞的观察与定位.     

微量游离细胞电镜包埋前的处理方法

微量游离细胞的电镜包埋前的处理是个较棘手的问题。若处理不当会造成在以后的操作过程中细胞逐渐丢失。有关这方面的技术已有报道 [1— 3] ,但往往存在着步骤多或细胞分散、难切片等问题。本文介绍一种微量游离细胞包埋前的处理方法 ,操作步骤简单 ,细胞集中 ,利于切片。材料与方法1 .赋型剂 :血浆或 1 0 %牛血清白蛋白 ( 0 .5 ml塑料管分装 ,可冰箱冷冻储备 )。2 .标本前处理 :1原先混悬在液体中的标本可直接装在锥形离心管中 ,在 1 0 0 0～ 1 5 0 0 r/min离心 5～ 1 0 min后 ,吸尽上清液 ,加入血浆或 1 0 %牛血清白蛋白 1～ 2滴 ,然后用…     

用常规透射电镜观察半薄切片——铀—铅—铜浸染技术的应用

在常规透射电镜中,超薄切片的厚度一般不超过0.1微米,否则就看不清样品的细节。但是,使用特殊的标本本浸染方法,选择性地对某些细胞结构染色,就可以在一般透射电镜下观察半薄切片。本实验采用铀—铅—铜浸染技术,选择性地染色一部分细胞器,在75—100KV透射电镜下观察0.25—0.5微米的半薄切片。结果表明,这一技术在超微结构研究中有一定实用意义。实验方法:用2％戊二醛灌注大鼠,取肝、肾、十二指肠和睾丸等组织,切成1立方毫米小块。组织块经缓冲液漂洗后,在42℃下先放入5％醋酸铀水溶液(PH3.5)浸染1小时,再在硝酸铅—硫酸铜—枸椽酸钠溶液中浸染1小时,然后在4℃下用1％饿酸后固定12小时、常规环氧树脂包埋,最后将组织块切成0.25—0.5微米半薄切片,在透射电镜下观察。     

电镜在水产动物病毒感染诊断中的应用

病毒对水产动物造成的危害极大。据农业部统计 ,1 990年全国对虾养殖约有 1 /3的面积发生病害。在福建省 ,对虾暴发性病害的死亡率高达 80 %以上 ,造成对虾产量直线下降 ,经济损失数亿元之巨[1] 。在水产养殖规模日益扩大之时 ,研究水产动物病毒病的检测与防治具有重要的现实意义。1 993年至 1 999年 ,我们从福建省各地送检水产动物活体取出各种内脏组织块 ,切成 1 mm×1 mm× 0 .5 mm小块 ,3%戊二醛固定 2 h,PBS洗涤 3次 ,1 %锇酸固定 2 h( 4℃ ) ,PBS洗涤 3次 ,酒精、丙酮系列脱水 ,6 1 8环氧树脂包埋 ,超薄切片 ,醋酸铀、柠蒙酸铅染色…     

补肾益精中药对老年大鼠胸腺延缓衰老作用的超微结构观察

应用补肾益精中药(固真方)喂饲雄性老年大鼠,观察用药后胸腺超微结构的变化。动物分三组:青年组,16月令;老年组,22月令;中药组,22月令,从18月令开始每日饲喂中药持续四个月。三组动物杀死后迅速取出胸腺,以常规电镜制样技术进行固定、脱水、包埋、超薄切片、染色,电镜观察。老年胸腺与青年胸腺比较,胸腺组织内上皮性网状细胞与淋巴细胞皆显示超微结构显著变化。细胞核周间隙扩张,细胞质内细胞器变性,线粒体肿胀,嵴断裂或消失,基质电子密度降低,粗面内质网减少並有脱颗粒现象,内质网池扩张,次级溶酶体数量增加[图1]。而中药组(固真方)老年动物胸腺组织上皮性网状细胞与     

微波辐射超薄切片快速染色法

本文介绍一个微波辐射超薄切片快速染色法。该方法与常规染色方法相比具有以下突出优点:染色速度快且操作简便,整个染色过程可在数分钟内完成;经微波辐射染色处理的动植物组织切片染色均匀,污染少,反差比常规染色法稍强。动植物组织切片微波辐射染色的最佳辐射时间有所不同,铀染色动植物组织切片最佳辐射时间均为30秒;铅染色动物组织切片最佳辐射时间为30秒,而植物组织切片为20秒。染色液经微波辐射后的温度应控制在20～40℃。     

适合光镜和电镜诊断肾小球疾病的固定剂选择

目的：为了使已经石蜡包埋的肾穿组织脱蜡后进行电镜观察,关键是选择适当的固定剂。方法：在石蜡包埋前,肾穿组织分别用甲醛、戊二醛及戊二醛、锇酸双固定。根据光镜和电镜观察结果,选择能兼顾光镜和电镜的固定剂。结果：甲醛固定不能有效保存肾穿组织的超微结构,锇酸的固定能有效地保存超微结构,但严重影响了光镜切片的染色;而戊二醛与甲醛相比,较好地保存了肾穿组织的超微结构,同时又不影响光镜切片的染色。结论：在石蜡包