响应面法优化磁性壳状固定化脂肪酶制备工艺研究

目的 优化磁性壳状脂肪酶固定化工艺,并利用磁性固定化脂肪酶快速筛选荷叶中具有脂肪酶抑制作用的活性成分。方法 采用一锅法制备Fe₃O₄-壳聚糖作为固定化载体,采用响应面设计法优化以聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂的脂肪酶固定化工艺,确定反应pH、温度、加酶量和时间,并进行固定化脂肪酶表征与活性测定;固定化脂肪酶与荷叶样品液反应30 min后,磁分离,甲醇洗脱后采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析。结果 以固载率、酶活、酶活回收率为响应值,确定最佳制备工艺为pH 8.1、反应温度40℃、酶质量浓度2.55 mg/mL、反应时间2.3 h,固载率均值为85%、酶活均值为5.44 U/mg、酶活回收率均值为81%;利用固定化脂肪酶快速筛选发现荷叶中荷叶碱与2-羟基-1-甲氧基阿朴啡具有较高的脂肪酶抑制活性。结论 本研究优选的脂肪酶固定化制备流程简捷,脂肪酶利用率提高,易分离,有助于荷叶等药食两用原料中脂肪酶抑制成分的快速筛选研究。     

响应面法优化脂肪酶水解红花籽油工艺

以红花籽油为原料,采用不同脂肪酶水解以提高多不饱和脂肪酸水解率。研究酶添加量、酶解温度、pH、超声时间对水解率的影响,通过响应面实验结果表明:米曲霉脂肪酶酶加量300 U/g、温度39℃、pH7.0、酶解10 h为最佳工艺条件,此时酶解红花籽油的水解率最高,达到89.37%±0.19%。     

响应面法优化固定化脂肪酶催化棉籽油转化生物柴油的研究

利用响应面法对固定化脂肪酶催化棉籽油合成生物柴油的条件进行优化。以脂肪酸甲酯转化率为指标,考察了固定化脂肪酶用量（占棉籽油质量）、甲醇与棉籽油摩尔比、叔丁醇与棉籽油体积比、反应温度和反应时间对转化率的影响,确定最佳反应条件为：反应时间19.128 h,反应温度37.801℃,固定化脂肪酶用量12.070%,甲醇与棉籽油摩尔比4.949,叔丁醇与棉籽油体积比0.323。验证实验结果表明,转化率达到92.9%,与响应面法预测值94.3%的吻合程度较高。     

响应面法优化脂肪酶活性包涵体固定化条件

目的优化Serratia marcescens ECU1010脂肪酶活性包涵体的固定化条件。方法利用Plackett-Burman试验设计筛选影响固定化过程的几项因素,用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,采用Box-Behnken试验设计及Design-Expert软件对实验结果进行二次回归分析。结果戊二醛（GA）浓度,酶浓度,GA与酶用量比对固定化过程的影响较显著。通过求解回归方程得到最佳固定化条件：GA浓度0.13%（w/v）,酶浓度16.5 mg/mL,GA与酶用量比11：2。结论在优化条件下,固定化酶的酶活性可达426.6 U/L,预测值与验证实验平均值基本相符。     

响应面法优化藜麦种皮过氧化物酶固定化条件

以从藜麦种皮中提取的过氧化物酶为原材料,利用0.2%聚乙烯醇-3%海藻酸钠（PVA-CA）为载体,Ca Cl2溶液作固定剂,采用包埋法对藜麦种皮过氧化物酶进行固定。在单因素实验的基础上,利用响应面分析法对藜麦种皮过氧化酶固定化的影响因素进行了优化。优化后得到的最佳固定化条件如下:氯化钙浓度为7%,固定化时间为26 min,载体与酶液的比例为1.25∶1（m L/m L）,在此条件下实际测得固定化酶的活性为416.5 U。实测值与理论值（417.4U）相差较小,充分验证了所建模型的可靠性。      

响应面法优化固定化酿酒酵母细胞制备工艺研究

酿酒酵母的固定化细胞技术能够实现可连续与重复再利用性强、并且能够实现酿酒酵母细胞的高密度培养.本研究利用海藻酸锰代替海藻酸钙作为固定化酿酒酵母的载体,采用响应面方法优化固定化工艺,为了降低海藻酸锰凝胶球的传质阻力,在凝胶球中添加适量的经过酶解的秸秆纤维素.结果表明,最佳工艺条件为海藻酸钠(SA)初始浓度为2.18％,秸秆纤维素(CS)添加量为0.21％,CaC12初始浓度为5.21％,在此BBD响应面模型优化条件下,制备固定化酿酒酵母细胞的包埋率理论值可达到88.02％.包埋率从48％提高为88.02％.表明了BBD响应面模型对于制备固定化细胞的工艺流程具有很高的的应用价值.     

基于响应面法优化脂肪酶水解涤纶织物工艺

酶处理改善涤纶织物的亲水性是目前涤纶改性中一种绿色环保的方法。本文通过改变猪胰脂肪酶(PPL)水解涤纶织物的反应条件(反应温度、反应pH、酶用量、反应时间),以及添加表面活性剂来增强PPL水解涤纶织物的效果。实验以水解产物释放量为评价指标,通过在单因素实验的基础上进行Box-Behnken优化实验。结果表明：PPL水解涤纶织物工艺中因素的影响作用大小顺序为反应时间(24 h)>表面活性剂(吐温80,2 g/L)>反应温度(60℃)>酶用量(80 U/mL)>pH(7)。经模型优化的最佳水解工艺条件为：反应温度59℃,pH 6.6,酶用量67 U/mL,反应时间31.2 h,表面活性剂质量浓度2.1 g/L,理论水解产物531.862 mg/L。最优条件下实验值与预测值的相对误差为5.3%。在此条件下,处理后织物表面的接触角下降了19.8%,力学性能良好。     

响应面法优化以纯棉浴巾为载体的脂肪酶固定化工艺

本文系统研究了以纯棉浴巾为载体的脂肪酶固定化条件,通过单因素实验确定了吸附剂聚乙烯亚胺(PEI)浓度及其pH、交联剂戊二醛(GA)浓度及其pH、交联时间和交联温度的优化范围,进而以PEI浓度、GA浓度和交联时间作为优化因素,通过三因素三水平响应面设计,得到固定化酶制备优化条件为:PEI浓度3.37 mg/mL、GA浓度...     

响应面法优化脂肪酶催化脂肪酸甲酯环氧化

以Novozyme 435脂肪酶为催化剂,在单因素实验的基础上,利用响应面法优化了脂肪酸甲酯(FAMEs)环氧化工艺.选择反应时间、脂肪酶用量和H2O2与FAMEs双键的摩尔比为自变量,环氧值为响应值,建立了脂肪酶催化FAMEs环氧化体系的二次回归模型.优化后的工艺条件为:在不加脂肪酸氧载体的条件下,FAMEs 20 g,甲苯用量30 mL,脂肪酶用量3％(以FAMEs质量计),H2O2与FAMEs双键摩尔比1.7∶1,反应温度40℃,反应时间5h.在此条件下,环氧值为4.82％,与模型预测值基本一致.     

脂肪酶的固定化及其水解天然黄油研究

利用吸附法、交联法和包埋法将脂肪酶固定在5种载体上，由吸附法制备的固定化脂肪酶活性最大，用其催化天然黄油的水解反应，短时间内水解率可达到20％左右。且有较高的可操作性，重复利用5次，活性依然保留为原来的96％。     

响应面法优化离子交换法固定化β-D-呋喃果糖苷酶

以大孔阴离子树脂D311 为载体,对日本曲霉来源的β-D- 呋喃果糖苷酶进行离子交换法固定化。研究温度、pH 值、时间、游离酶液酶活力对固定化效果的影响,并在此基础上运用响应面法对固定化条件进行优化。结果表明,最佳固定化条件为：室温、pH6.6、固定化时间4h、游离酶液酶活力为900U/mL,在此条件下,固定化β-D- 呋喃果糖苷酶生产的低聚果糖产量可达58.16%。     

响应面试验优化微波辅助固定化胰蛋白酶工艺

在微波辅助的条件下,以环氧树脂为载体固定化胰蛋白酶。通过单因素试验和响应面分析法确定了微波辅助固定化胰蛋白酶的最佳条件:微波温度30℃、给酶量41 mg/g、p H 6.2、微波时间10 min。在此条件下制备的固定化胰蛋白酶活力为322.56 U/g树脂,高于传统振荡方法制备的固定化酶活力,将原来20 h的固定化时间缩短到几分钟,并且固定化酶具有良好的稳定性,由此可见微波辅助固定化酶是一种高效的固定化方法。     

响应面法对Protamex酶解醇法大豆浓缩蛋白的优化

采用Protamex 蛋白酶对醇法大豆浓缩蛋白进行酶法改性,以氮溶解指数(NSI)为指标,确定酶法改性对提高蛋白溶解度的有效性。在单因素试验基础上采用四因素三水平的响应面分析方法对酶解条件进行优化。确定酶解最佳工艺条件为：pH6.6,温度54℃、底物浓度6%、酶浓度5.5%,此条件下酶解5h,NSI 可达84.45%。     

响应曲面法优化琼胶水解条件

采用酸水解法对琼胶进行降解并结合苯酚- 硫酸法测定琼胶低聚糖的含量。在单因素试验的基础上,利用响应曲面法优化水解工艺,建立盐酸浓度(X1)、水解时间(X2 ) 和固液比(X3 ) 与水解率( Y ) 之间的数学模型：Y =81.5933＋0.7175X1＋1.8938X2＋2.7313X3－3.1567X12－3.3042X22－3.3092X32－0.6625X1X2＋0.0475X1X3－0.8000X2X3,确定琼胶水解的最佳工艺条件,即盐酸浓度0.105mol/L、水解时间96min、固液比4.5:100(g/mL),在此最佳工艺条件下进行水解,琼胶水解率为81.43%。     

响应面法优化微波辅助提取松籽油的工艺研究

以松籽为原料,研究微波辅助提取松籽油的最佳工艺条件。在单因素试验基础上,选取微波功率、提取时间以及料液比为影响因素,以松籽油提取率为响应值,采用回归旋转设计建立数学模型,进行响应面分析;并采用GC-MS对松籽油脂肪酸组成进行分析。结果表明,最佳工艺为松籽经粉碎过40目筛,无水乙醇和石油醚(60~90℃)体积比1:2,在微波功率480 W、提取时间19 min、液料比10:1条件下,松籽油得率可达57.79%。松籽油中的脂肪酸组成以不饱和脂肪酸为主,其中亚油酸和油酸含量分别达到43.90%和22.03%。微波辅助提取松籽油是一种有效的油脂提取方法。     

响应面法优化苦菜蛋白质提取工艺

以苦菜为原料,采用盐溶、酸热综合方法提取苦菜蛋白质,以苦菜蛋白质提取量为指标,通过单因素试验分别考察pH、料液比、提取温度、提取时间等4个因素对苦菜蛋白质提取量的影响程度。结果表明,试验因素影响顺序依次为料液比>提取温度>提取时间>pH。苦菜蛋白质最佳提取工艺条件为pH 3.2,料液比1∶26 g/mL,提取温度65℃,提取时间2.5 h,在此条件下,苦菜蛋白质的提取量为3.54 mg/g,可为苦菜蛋白质生产应用提供参考。     

响应面法优化发酵糙米脂肪酶活性的工艺研究

以糙米为主要原料,通过接种复合微生物进行发酵糙米的生产.采用响应面法设计试验,以脂肪酶活性为指标,确定了糙米发酵的最适条件.试验结果表明,发酵糙米生产工艺的最优条件为:发酵时间4.53 h,发酵温度26.81℃,接种量3.47%,菌种配比(乳酸菌与酵母菌)为2:1.21.