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以一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,制备了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒.本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0%,批间变异系数<15.0%,回收率为99.4%~108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应.正常参考值<10.0μg/L.该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用. 相似文献
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一株CEA单克隆抗体(McAb)用于固相包被,另一株McAb与辣根过氧化物酶偶联制备抗CEA酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了CEA酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。 本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异系数<10.0%,批间变异系数<15.0%,回收率为99.4%~108.7%,特异性鉴定显示与其它肿瘤标志物无明显交叉反应。正常参考值小于10.0μg/L。该方法具有简便、快速和准确的特点,适用于临床检测和科研应用。 相似文献
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高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒 总被引:2,自引:0,他引:2
以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %~ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3~ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用 相似文献
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黄曲霉毒素B1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 总被引:8,自引:0,他引:8
采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB1-TRFIA).以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu3 标记的羊抗兔抗体进行示踪.该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01-100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测.8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L.比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917.研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景. 相似文献
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磺胺甲恶唑酶联免疫分析法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了磺胺甲恶唑(Sulfamethoxazole,SMX)酶联免疫分析方法,用以检测动物源性食品中SMX的残留。利用辣根过氧化物酶(HRP)标记SMX,兔抗SMX抗体制备固相抗体,通过标本中的SMX和一定量酶标SMX竞争结合固相抗SMX多抗,标本中SMX的量和显色后的OD450呈负相关的原理检测标本中的SMX含量。经方法学鉴定,本方法的灵敏度为0.067μg/L,批内变异系数<10%,批间变异系数<20%。牛奶、肉类、鸡蛋、蜂蜜样品的回收率分别为94.9%~116.0%、82.0%~107.6%、81.6%~94.9%、89.0%~93.0%,符合免疫分析方法的要求。 相似文献
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人胎盘泌乳素原料经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析在相对分子量为21 000~22 000处有两条显色相近的主带,在5 000~80 000处有数条微弱杂质色带,蛋白定量分析为1.06 g/L,用放射免疫分析方法标定其免疫活性为2.187 g/L,其剂量-反应曲线与人胎盘泌乳素国际参考品(编号73/545)平行,表明该原料适于制作标准品.用含0.2%(w/V)人血清白蛋白、1%甘露醇的磷酸盐缓冲液(0.01 mol/L,pH7.4)配制的30 mg/L人胎盘泌乳素溶液按每安瓿0.5 mL分装,经冷冻干燥制备成标准品.以人胎盘泌乳素国际参考品为对照品,用放射免疫分析法对其免疫活性进行标定,均值为14.19μg/支,95%可信限为13.50~14.88 μg/支.分别以国际标准品和本标准品为对照品测定同一套人胎盘泌乳素质控血清,证明对不同剂量水平的质控血清测定均值非常接近,统计学分析上无显著差异,P>0.05. 相似文献
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研制了~(125)I标记的PGI_2稳定的代谢产物6-酮-PGF_(1α)RIA试剂盒。以碳化二亚胺法将6-酮-PGF_(1α)与BSA联接免疫家兔制备抗血清,其效价为1:32000,平衡常数为6.26×10~9L/mol,与其它前列腺素的相对百分交叉反应<1%。用氯胺T法制备~(125)I-组织胺-6-酮-PGF_(1α)标记物,比放射性活度>14.8MBq/μg(400μCi/μg),最高结合率>80%,二月内无脱碘现象。放免测定按常规法,最低检出值为2,2pg/管,检出率为97.2~102.3%,精密 度为6.62%,批内和批间C.V.分别为7.17、8.41%,Cerceo“效点系统”评分为31分,属优良。直接测定健康成人血浆6-酮-PGF_(1α)浓度为22.9±6.3pg/mL。 相似文献
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该工作对较低丰度的13C-尿素用于13C-尿素呼气试验(13C-UBT)的可行性进行了初步研究.受检者53例,随机分为三组,每组分别为16例、17例(其中无效病例一例)和20例,并分别用13C丰度为83.0%、57.0%和<0.01%的13C-尿素进行诊断幽门螺杆菌的尿素呼气试验.同时作胃镜活检和常规方案的14C-尿素呼气试验.当13C丰度分别为83.0%、57.0%和<0.01%时,13C-UBT试验结果的敏感度分别为100%(10/10)、100%(6/6)和0.0%(0/7),特异度分别为83%(5/6)、90%(9/10)和92%(12/13),准确度分别为94%(15/16)、94%(15/16)和65%(13/20).结果表明,较低丰度13C-尿素(丰度为83.0%、57.0%)与高丰度(>99%)13C-尿素的13C-尿素呼气试验结果符合率较高,应可替代高丰度(>99%)13C-尿素用于诊断幽门螺杆菌的13C-UBT,从而大大降低试剂成本;丰度<0.01%的13C-尿素(即纯12C-尿素)不能用于尿素呼气试验. 相似文献
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采用两株抗胰岛素单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯板、另一株标记辣根过氧化物酶,建立了测定人胰岛素的双抗体夹心酶联免疫分析法。方法学研究表明,本方法的灵敏度为1.7mIU/L,曲线范围5~160mIU/L,批内、批间变异系数分别小于11%、15%,回收率96.4%~111.1%;高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.998;38例健康人血清样品测定值为3.6~10.8mIU/L。该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好,r=0.97。 相似文献
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人心肌酸性铁蛋白与肝癌关系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从人心肌组织中提纯了酸性铁蛋白,免疫家兔产生抗血清,氯胺-T法制备了~(125)I-酸性铁蛋白和~(125)I-抗酸性铁蛋白H亚基单抗。分别采用平衡法和顺序饱和法建立了酸性铁蛋白放射免疫分析和酸性铁蛋白H亚基免疫放射测量分析。它们的批内CV分别为1.65%和2.44%,批间CV为9.71%和10.16%,回收率为102%和92.29%,ED_(50)为27.50μg/L和23.05μg/L。前者的可测范围为7.0~369.6μg/L,后者的灵敏度为0.736μg/L。两方法 相似文献
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