苦味传递机制与苦味肽研究进展

味觉是人类的重要生理功能之一。人类能够识别五种基本味:苦味、咸味、酸味、甜味和鲜味。由食物蛋白水解产生的苦味肽成为研究热点。本文主要从苦味的信号传递机制、苦味肽结构特点、苦味肽消除或降低的方法等三个主要方面综述了苦味肽的研究进展,以期为低苦味食品开发研究提供参考。     

牦牛乳硬质干酪苦味肽的分离与特征鉴定

为了探究牦牛乳硬质干酪中苦味肽组成特征,采用氯仿-甲醇法提取苦味肽,通过Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱进行分离纯化,并利用液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS）对其分离的苦味较强组分进行特征鉴定。结果表明：经Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱分离得到3 个不同分子质量的组分,组分Ⅱ具有明显苦味。LC-MS/MS鉴定出组分Ⅱ中存在14 种苦味肽,主要为氨基酸残基数目7～17 个、分子质量小于2 000 D的小肽,苦味肽序列中存在的疏水性氨基酸主要有脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸,800～1 500 D苦味肽占64.29%,源自β-酪蛋白（β-casein,β-CN）降解产物的苦味肽占92.86%。因此,干酪成熟过程中源自β-CN的具有较强疏水性、分子质量小于2 000 D的混合多肽的积累可能对干酪苦味的产生有较大影响。     

牦牛乳硬质干酪苦味肽RK7的抗氧化活性及其机制

目的:研究从牦牛乳硬质干酪中鉴定出苦味肽RK7的抗氧化活性及其机制。方法:运用生物信息学方法计算和分析RK7的理化和生物学特性,采用固相合成技术体外人工合成RK7并测定其抗氧化活性。借助分子对接工具,基于长寿酶家族sirtuins(SIRT1-7)和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)介导的信号通路,研究RK7的抗氧化机制。结果:RK7的不稳定性指数为19.84;疏水性为42.86%;生物活性评分为0.404;小肠吸收能力(HIA)为0.9072+;血脑屏障穿透能力(BBB)为0.9701-;急性口腔毒性为0.6259;合成纯度为99.579%;当肽质量浓度在0.2～1.0 mg/mL范围内变化时,DPPH自由基清除率为12.26%～53.78%,ABTS自由基清除率为80.86%～87.86%;RK7与NAD+降解酶(3DZK)和胞质接头蛋白(2FLU)分别形成6个和5个氢键,3DZK的氨基酸残基Arg140、Asp147和2FLU的氨基酸残基Ser390、Asp394是其与RK7结合的重要活性位点。RK7和GSSH与3DZK和2FLU的结合表现出相似的分子机制,分别结合于3DZK的Site 1区域(X:-11.93,Y:-1.30,Z:0.38,R:10 ?魡)和2FLU的Site 2区域(X:8.33,Y:13.99,Z:20.41,R:9 ?魡)。研究结果为从分子水平分析、解释RK7的抗氧化性提供科学依据。     

基于计算机虚拟技术研究牦牛乳硬质干酪苦味肽的抑菌活性差异

为研究牦牛乳硬质干酪中苦味肽的抑菌活性差异及其与不同微生物菌体蛋白相互作用的氨基酸和位置信息。运用生物信息学方法计算牦牛乳硬质干酪中4种苦味肽RPKHPIK（RK7）、TPVVVPPFL（TL9）、VYPFPGPIPN（VN10）和SLVYPFPGPIPN（SN12）的分子特性,利用分子对接工具从分子层面研究肽的抑菌活性、研究肽段和不同菌体蛋白（大肠杆菌5BNS、金黄色葡萄球菌4ALM、沙门氏菌6CH3）之间相互作用的分子机制,通过BIOPEP数据库比对表征肽段抑菌活性。研究结果表明：RK7所带净电荷为3.1,疏水性氨基酸比例为42.86%;TL9所带净电荷为0,疏水性氨基酸比例为88.89%;VN10和SN12的疏水力矩分别为0.189和0.372,疏水性氨基酸比例为70.00%和66.67%。RK7和TL9均能和5BNS、4ALM、6CH3形成配体-受体复合物构象,VN10和SN12仅能和4ALM、6CH3形成配体-受体复合物构象;将RK7、TL9、VN10和SN12与抗菌肽数据库比对后发现RK7为抑菌活性已知的肽段,最高相似度为100%,TL9、VN10和SN12为潜在的具有抑菌活性的新型抗菌肽。结合肽段分子特性分析、分子对接和数据库比对预测4种苦味肽的抑菌活性,大肠杆菌抑制活性：RK7 > TL9,金黄色葡萄球菌抑制活性：RK7 > VN10 > TL9 > SN12,沙门氏菌抑制活性：RK7 > TL9 > VN10 > SN12。该研究为分子层面研究牦牛乳硬质干酪苦味肽结构特征及其抑菌活性提供了理论参考。     

牦牛乳干酪苦味肽ACE抑制活性表征的分子机制

用生物信息学方法计算并分析牦牛乳硬质干酪中鉴定出的3种苦味肽RK7、VN10和SN12的理化特性,对肽结构做能量最小化处理,从PDB数据库获取血管紧张素转化酶(ACE)蛋白晶体的X射线衍射三维结构,通过分子对接和数据库比对评估和表征苦味肽的ACE抑制活性及其与ACE的作用机理。通过计算得出RK7、VN10和SN12的不稳定性指数分别为19.84,49.44和42.87,疏水性分别为42.86%,70.00%和66.67%。分子对接结果表明:ACE分子中的Ala356、His387、Phe391、Pro407、His410、Glu411、Ser517、Val518、Pro519残基为其与RK7和VN10结合的重要活性位点,RK7、VN10和SN12分别与ACE活性位点的氨基酸形成3,2个和0个氢键;RK7、VN10和SN12与ACE的结合表现出相似的分子机制,均结合于ACE的活性空腔内(X:35.46,Y:43.15,Z:55.47,R:9 ?魡);RK7、VN10和SN12与BIOPEP数据库中已知ACE抑制肽的最高相似度分别为57.14%,90.00%和75.00%。综合RK7、VN10和SN12与ACE活性位点氨基酸残基相互作用的情况和BIOPEP数据库比对结果预测出3种肽段的ACE抑制活性:VN10 > RK7 > SN12。本试验为理论层面和分子水平研究干酪苦味肽的ACE抑制活性提供参考。     

用亲水胶体控制强化钙的农家干酪的苦味缺陷

几种亲水胶体能掩盖农家干酪里加入钙盐所引起的苦味。农家干酪上的涂布物由亲水胶体部分替代,并用氯化钙、磷酸钙、乳酸钙、碳酸钙或柠檬酸钙来强化,而且以相等的钙含量来评估其苦味。乳酸钙是苦味最小的盐,对其作了进一步的研究。用20％阿拉伯胶、2.5％的低粘度胍尔豆胶、1.5％的卡拉胶和0.2％的(口山)吨胶等几种溶液替代了10～30％的农家干酪上的涂布物。在单个鉴定人所作的初步鉴定中发现,含有7.5mg/g孤尔豆胶和角豆荚胶的农家干酪,每百克分别加入117mg和73mg钙时没是苦味;含有7.5mg/g胍尔豆胶和角豆荚胶(1:1)混合物的农家干酪,每百克加73mg钙也没有苦味。感官分析(n=35)资料表明,加钙和胍尔豆胶的干酪,其苦味与不加钙和胍尔豆胶的对照干酪的苦味基本上无差别;但与加钙、不加胍尔豆胶的干酪相比,前者苦味小得多。添加胍尔豆胶引起了干酪综合选择性的降低,其原因是使用胍尔豆胶提取物有异味。     

蛋白短肽苦味成因与脱苦技术研究进展

蛋白短肽具有多种加工和功能特性,但其苦味限制了其在食品工业中的应用.本文论述了蛋白短肽苦味的构效关系,阐释了制备工艺对蛋白短肽苦味的影响,简介了苦味的评价方法,重点对蛋白短肽的物理方法与酶法脱苦技术进展进行了综述,并对目前存在问题的解决作了初步探讨,对开发应用前景加以展望.     

干酪中生物活性肽的研究进展

文章阐述了干酪中生物活性肽的产生,归纳了干酪中常见的几种生物活性肽的类型及研究进展,综述了干酪中生物活性肽在生物利用度以及对肠道菌群影响方面的研究进展,并对干酪中生物活性肽的研究前景进行了总结与展望。     

苦味肽的形成及脱苦方法的研究

蛋白质水解后其溶解性、热稳定性以及营养特性得到了改善，但同时却形成了大量的苦味肽。本文综述了苦味肽的形成、影响苦味的主要因素及主要的脱苦方法。     

发酵剂对牦牛乳硬质干酪蛋白降解和苦味关系的影响

用甘肃天祝新鲜牦牛乳为原料分别添加嗜温、嗜热和混合发酵剂制作硬质干酪,以pH 4.6-可溶性氮（soluble nitrogen,SN）、12%三氯乙酸氮（trichloroacrtic acid-N,TCA-N）、游离氨基酸（free amino acid,FAA）含量和疏水性肽/亲水性肽（S/Q）为蛋白水解度指标,研究3 种牦牛乳硬质干酪在6 个月内成熟过程中苦味和蛋白质降解之间的关系。结果表明：3 种干酪在成熟过程中pH 4.6-SN、12% TCA-N和FAA含量均呈上升趋势,苦味值与pH 4.6-SN、12% TCA-N和FAA含量成正相关,相关系数分别为0.400、0.412和0.458。3 种干酪成熟过程中S/Q的变化趋势和程度不同,嗜温发酵剂干酪中S/Q呈现降低趋势;嗜热和混合发酵剂干酪中S/Q均呈现先降低后增大的趋势,但在这两种干酪中S/Q的变化程度不同,嗜热发酵剂干酪在1～3 个月S/Q略有降低,在3～6 个月S/Q快速增大,而混合发酵剂干酪正好相反。S/Q与苦味值成极显著正相关（r=0.895）,S/Q可很好地反映干酪中苦味的强弱。而干酪中苦味强弱与蛋白质降解强弱密切相关,对蛋白降解程度越大的发酵剂制作的干酪越容易产生苦味,其中,嗜热发酵剂对干酪蛋白降解程度最大,混合发酵剂次之,嗜温发酵剂最小。     

降低灵芝保健饮料中苦味的方法

对包埋剂的用量对灵芝饮料苦味的影响进行了试验研究，结果表明加入灵芝抽取液的２－５％的环糊精，能有效地把灵芝的苦味降低到４０％左右，从而获得人们乐于接受的天然保健饮料。     

仿制干酪的研究进展

仿制干酪是使用非乳来源的蛋白质、脂肪部分或全部替代乳蛋白和乳脂肪制作而成的具有干酪特征可以满足特定要求的产品。文章简介了仿制干酪的原理及分类,重点阐述了干酪类似物、植脂干酪和大豆干酪的研究发现和成果。不断发展的仿制干酪在食品工业中具有巨大的发展潜力和广泛的应用前景。     

Formation of bitter peptides in cheese and from casein]

Whereas a slightly bitter taste is desirable in certain foods, it is an off-flavour in cheese which may even lead to unfitness for consumption. Bitter principles from cheese have been found to be peptides with molecular weights ranging from 2000 to 3000. For the purpose of further characterization, bitter peptides were isolated from enzymatic casein hydrolysates as well as from bitter cheese and purified. 30 proteases from different origins proved to be able to form peptides with bitter taste of varying intensity from casein. Present experience shows that the formation of bitter peptides during casein hydrolysis can be inhibited only to a very small measure. Bitter peptides are extrmely resistant to proteases, which is probably attributable to their high contents of hydrophobic amino acids and hydrophobic bonds. The detection of only N- or C-terminal amino acid in each of 11 different bitter peptides shows that peptide chains are present and not cyclic peptides as repeatedly assumed. It must be aimed at avoiding the cheese defect "bitter" by using appropriate starter cultures and rennet substitutes as little disposed as possible to produce bitter peptides.     

乳蛋白水解物中的苦肽研究

论述了苦肽的苦味与疏水度和结构的关系,以及苦味呈味机制,在此基础上,总结并探讨了乳蛋白水解物和乳酪中的苦肽,同时重点概述了酶法脱除乳蛋白解物苦味的方法。     

干酪风味的研究

对国内外干酪风味的研究现状和最新成果进行了综述,列举并比较了目前国内外用于干酪风味物质提取、分析和鉴定的先进方法,为干酪风味分析方法的选择和发展提供了参考,使对干酪风味组成的深入了解、模拟并改善干酪风味成为可能。     

Differences in the peptide profile of raw and pasteurised ovine milk cheese and implications for its bioactive potential

Cheese produced using raw ovine milk (R) or pasteurised ovine milk (P) was subjected to peptide extraction, characterisation by mass spectrometry and bioinformatic analysis with the aim of assessing the impact of milk pasteurisation on the final peptide profile. In total, 187 peptides arising from β-casein, α_S1-casein, and α_S2-casein were identified. Upon label-free quantitation, 58 peptides were found to be significantly different in the two preparations; 38 were more abundant in R and 20 were more abundant in P. Of these, 27 were unique to R and 10 were unique to P. Bioinformatic analysis by EnzymePredictor provided insights into the influence of milk pasteurisation on susceptibility of cheese proteins to proteolytic enzymes during ripening. Finally, BIOPEP analysis predicted a biological activity for 37 of the 187 identified sequences (20%), with a significantly higher abundance of peptides with immunomodulating and ACE-inhibitor properties in R cheeses.     

Effect of ripening time on peptide dynamics and bioactive peptide composition in Tulum cheese

Skin bag Tulum cheeses traditionally produced in the Central Taurus region of Turkey were studied to identify peptide profiles by liquid chromatography–tandem mass spectrometry over 180 d of ripening. After mass spectrometry analysis, 203 peptides were identified: 59 from α_S1-casein (CN), 11 from α_S2-CN, 129 from β-CN, and 4 from κ-CN. Numbers of α_S1- and β-CN-derived peptides increased with increasing number of ripening days due to the dependence of newly formed peptides on proteolysis. However, similar increases were not observed for α_S2- and κ-CN-derived peptides. Most identified peptides consisted of β-CN-derived peptides, followed by α_S1-, α_S2-, and κ-CN-derived peptides. Among these, bioactive peptides were found, including antihypertensive, antibacterial, antioxidant, dipeptidyl peptidase-4 inhibitory, metal chelating, skin regenerating, glucagon-like peptide-1 secretion enhancing, opioid, cathepsin B inhibitory, prolyl endopeptidase inhibitory, immunomodulatory, brain function improving, antiamnesic, antihypercholesterolemic, anti-inflammatory, and anticarcinogenic peptides.     

苦肠碱法脱苦工艺优化及其对苦肠品质的影响

以苦肠为试验材料,通过单因素试验考察了小苏打和苏打添加量、作用温度和作用时间对苦肠脱苦效果的影响,在此基础上采用响应面分析优化小苏打脱苦工艺条件,并研究了脱苦处理对苦肠品质的影响。结果表明,小苏打添加量、作用时间和作用温度对苦肠中胆汁酸的脱除效果具有重要影响。在小苏打添加量为4%,作用时间为40 min,作用温度为40 ℃的条件下,苦肠中胆汁酸实际脱除率可达40.47%,苦味值可达14.03,与模型预测值接近。经脱苦条件优化后,苦肠中胆汁酸的含量显著降低,口感上无明显苦味。苦肠的水分含量上升,胶原蛋白含量下降,肌纤维断裂,结构疏松。     

干酪融化性测量方法及其研究进展

当干酪作为辅料应用在快餐食品中时,融化性是其主要评价指标之一。因此建立统一的融化性测量技术是十分重要的。本文介绍了测量干酪融化性的两类测量方法,即传统测量法和客观测量法,阐述了各种方法的优缺点及发展情况,并对干酪融化性测量技术的发展进行了展望。