一株耐热纤维素酶菌株的筛选及酶学性质的研究

研究从西双版纳采集的10份土壤样品,用自行设计的选择培养基,37℃恒温培养72小时,分离到18株产纤维素酶的细菌菌株。经过复筛,得到纤维素酶活性较高产酶菌株YN5。通过对其形态、生理生化特性研究,将菌株YN5初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilissp.)。对酶的性质研究表明,其最适pH值为5.0,最适温度为60℃,在pH值4.0～7.0范围内具有良好的稳定性。     

产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究

【目的】从不同来源的样品中筛选产木聚糖酶的菌株,并对其进行菌种鉴定和酶学性质研究。【方法】以自制木聚糖为唯一碳源,采用平板透明圈方法筛选产木聚糖酶的菌株,结合菌株的形态特征和16S r DNA序列分析鉴定菌种,并对菌株所产木聚糖酶进行酶学性质研究。【结果】筛选到的44株有透明圈的菌株中27株具有产木聚糖酶能力,其中B659菌株产酶能力最高;经鉴定B659菌株为同温层芽孢杆菌;B659菌株所产木聚糖酶的最适反应温度55℃,最适反应p H值6.5,在37℃、p H 8~10的条件下保温2 h,仍具有78%以上的酶活力以及较好的耐碱性。10 mmol/L K+和1mmol/L Fe~(2+)对该酶具有促进作用,Mn~(2+)、Cu~(2+)和Co~(2+)对该酶具有明显的抑制作用。【结论】筛选到具有较好耐碱性的木聚糖酶高产菌株——同温层芽孢杆菌B659。     

产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究

以木聚糖为唯一碳源,采用平板筛选和摇瓶发酵相结合的方法,从腐朽木头中分离、筛选到一株高产木聚糖酶菌株XE-13-1,根据菌株的形态特征,并结合18S rDNA序列分析,初步鉴定菌株XE-13-1为桔绿木霉（Trichoderma citrinoviride）。经测定,菌株XE-13-1所产木聚糖酶的最适反应温度为50 ℃,最适反应pH值7,具有较好的pH稳定性。在30 ℃、pH 5～10的条件下保温2 h,该酶仍具有78%以上的酶活力。Mg2+、Fe2+、K+、Zn2+对该酶具有明显的促进作用,Cu2+对该酶具有明显的抑制作用。酶学性质研究结果表明,该酶在工业应用上具有较好的前景。     

耐热子囊菌产木聚糖酶及酶学性质的研究

对 1株耐热子囊菌 (Thermoascusaurantiacus)固态发酵产木聚糖酶的工艺条件及酶学性质进行了研究。确立了适宜的产酶基质为 :麸皮 3 0 %、玉米芯 3 5 %、玉米皮 3 5 %、(NH4 ) 2 SO4 2 %、尿素 0 5 %、KH2 PO4 0 5 %、MgSO4 ·7H2 O 0 2 %、初始含水量 65～ 70 %。 45℃培养 5d ,木聚糖酶活力最高可达 1 0 3 2 1IU/g(干曲 )。该木聚糖酶最适反应温度为 70℃ ,最适pH4 8;在 pH3 0～ 7 0 ,温度低于 65℃时稳定性能较好。可被Fe2 +、Mg2 +、Zn2 +激活 ,而被Co2 +、Fe3+、Mn2 +抑制。     

一株高产木聚糖酶菌株的筛选鉴定及酶学特性研究

以木聚糖为唯一碳源,在富集培养基的基础上,通过初筛和摇瓶复筛,筛选到一株高产木聚糖酶的菌株RX-9,对菌株RX-9进行菌落形态、生理生化实验及16S rRNA序列遗传分析,该菌株的序列与Enterbacter(肠杆菌属)的多株菌具有99%以上的同源性,将该菌株归属为肠杆菌属(Enterbacter),命名为Enterbacter RX-9。对菌株所产木聚糖酶的酶学特性进行研究,发现该菌株所产的木聚糖酶在100 ℃下保温30 min,其酶活力仍达到2310.03 U/mL;当pH在7.5~9.5之间,木聚糖酶的活性基本稳定在3200 U/mL以上,表明该酶具有较好的热稳定性和pH稳定性。     

一株产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及酶学性质研究

研究以降解纤维二糖菌株为主要筛选对象,从酿造大曲样品中分离筛选获得产β-葡萄糖苷酶的真菌菌株D8,并对其进行了生物学鉴定,将其鉴定为梨头霉属(Absidia)的伞枝梨头霉菌(Lichtheimia corymbifera),并对其发酵所产β-葡萄糖苷酶酶学性质进行了研究,为其开发研究提供参考.     

一株产酸性α-淀粉酶菌株的筛选及酶学性质研究

从酿造大曲中筛选到高产α-淀粉酶菌株A-5-3,对其进行生物学鉴定,鉴定结果为黑曲霉;对其发酵液进行酶学性质初步研究,结果表明:该酶的最适pH值为3.6,最适温度为70℃,热稳定性良好。在pH3.0~5.0之间,具有很好的酸稳定性且为非Ca2+依赖型水解酶,在工业生产上有良好的应用前景。     

耐热耐碱木聚糖酶在大肠杆菌中的高效分泌表达及酶学性质研究

目的研究枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶基因在大肠杆菌BL2l中的高效分泌表达并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析。方法全基因合成枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因序列并进行密码子优化,经大肠杆菌BL2l表达后获得基因工程菌株,通过SDS-PAGE电泳检测、硫酸铵分级沉淀和AKTA系统分离纯化,分析表达产物的酶学性质。结果重组木聚糖酶为胞外分泌性表达,相对分子质量约43×103;酶促反应最适温度为65℃,最适p H为10.0,最适条件下酶活最高可达1201.5 IU/ml。结论成功获得高效分泌表达重组木聚糖酶的基因工程菌株,该木聚糖酶具较好的耐热性和耐碱性。     

一株产高活性多酚氧化酶菌株筛选鉴定及其酶学性质

采用变色圈法从土壤样品中分离筛选产多酚氧化酶的菌株,对其进行形态学观察、分子生物学鉴定,并对其所产多酚氧化酶的酶学性质进行研究。结果表明,筛选得到1株产多酚氧化酶活性较高的菌株,命名为ZL-2,其被鉴定为竹黄菌属（Shiraia sp.）。菌株ZL-2发酵8 d产多酚氧化酶酶活最高,达到521 U/mL。菌株ZL-2产多酚氧化酶最适底物为邻苯二酚,其最适pH值为6、最适温度为30 ℃;酶活在温度20～40 ℃及pH 3～6范围内稳定。金属离子Cu2+、Mg2+、Mn2+、Fe3+、Zn2+对多酚氧化酶都有激活作用,其中Cu2+激活作用最强;Ca2+、Al3+对酶活有一定抑制作用;L-抗坏血酸和亚硫酸氢钠对该酶抑制作用较强。     

竹鼠肠道耐碱性木聚糖酶菌株的筛选及酶学性质研究

为获得良好耐酸碱性的木聚糖酶,以解决木聚糖酶在实际工业中的应用问题。本研究以木聚糖为唯一碳源,从宜宾竹鼠肠道及粪便中,采用刚果红褪色法初筛和DNS法测定木聚糖酶活进行复筛,筛选了1株具有耐碱性木聚糖酶活性的菌株JZF,16S rDNA序列分析,鉴定为蕈状芽孢杆菌（Bacillus mycoides）,对蕈状芽孢杆菌JZF的生长曲线、产酶曲线以及产耐碱性木聚糖酶的酶学性质进行初步的探索。结果显示,该菌株于37 ℃,180 r/min培养48 h酶活达到15.17 U/mL;培养28 h后菌体量达到最大值,72 h后木聚糖酶活力达到最大值为29.65 U/mL,所产木聚糖酶最适合反应温度为50 ℃,最适pH9.0;40~60 ℃,pH8.0~9.0条件下相对酶活能保持在60%以上,金属离子Mn2+与Ca2+对该菌株的木聚糖酶有明显的促进作用,本研究所得菌株所产的木聚糖酶在碱性条件下具备良好的活性,为后续耐碱性木聚糖酶的实际应用研究提供了菌种来源与数据基础。     

1株产高温糖苷酶菌株的筛选鉴定及酶学性质研究

从云南大理市弥渡县石夹泉热泉的55℃底泥中筛选到1株高温葡萄糖苷酶的高产菌株,进行显微形态及生理生化特征、16S rRNA基因序列分析,将其初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)的1株菌,命名为Bacillus sp.Gly﹣55。对其生长条件及酶学性质进行了研究,结果表明:该菌株耐高温性较好,菌株在55℃仍能生长,菌株最适生长温度为45℃;所产葡萄糖苷酶最适酶活温度为65℃,最适反应pH值为4.0,该酶在37℃以下,能保持良好的稳定性,Zn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)、K~+、Fe~(2+)、Cu~(2+)对该酶有一定的抑制作用。     

高产木聚糖酶菌株的诱变筛选及其产酶性质

以青霉M1-1为出发菌株,经过紫外诱变和透明圈筛选得到两株遗传性状稳定的高产木聚糖酶菌株M128和M195,同时对其产酶特性进行了研究。结果表明,M128和M195所产木聚糖酶的最适pH值分别为6．0和5．0,最适反应温度分别为55℃和45℃,M128所产木聚糖酶的温度和pH稳定性以及对底物的亲和性均比M195好。     

产碱性脂肪酶菌株的筛选及酶学性质研究

从富油土壤中筛选出一株耐热碱性脂肪酶产生菌X-5,经菌落形态观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析,初步鉴定为假单胞菌。采用单因素实验研究其生长条件,研究表明该菌株最适生长温度为34℃,最适生长pH为8.0,6²6h为对数生长期,26³8h为稳定期,38h开始进入衰亡期;酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为8.5,70℃保温1h仍保留60%的酶活,具有良好的耐热性。K+、Na+对酶有激活作用,Ca2+、Mg2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+、Mn2+对酶有不同程度地抑制作用。      

木聚糖酶高产菌株的筛选及产酶条件研究

从酿造大曲中，筛选诱变出1株木聚糖酶高产菌株U6-5，菌体固态发酵产酶条件研究表明，最佳发酵培养基配方为麸皮50g，花生壳粉30g，玉米芯粉20g，NH4NO3 0．5g，水110mL，接种量3‰，最适发酵温度28℃～30℃，培养26h-28h，木聚糖酶活力达到6105U／g。该木聚糖酶具有较高的耐热性和耐储藏性能。     

一株产α-淀粉酶菌株的分离筛选、鉴定及酶学性质研究

为了更加经济、更高产量的分离出高纯酶,该实验从富含淀粉的土壤中筛选出1株高产淀粉酶的菌株LZ-10,通过菌落形态观察、生理生化特性实验、16S rDNA序列和gyrB基因序列分析对其进行鉴定。采用硫酸铵盐析,DEAE-52阴离子交换纤维素纯化,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测蛋白分子质量。结果表明,菌株LZ-10鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。纯化后的淀粉酶比活力为59.91 U/mg,纯化倍数为4.53,回收率为60.5%,分子质量为55.4 kDa。对其酶学性质进行研究,得出菌株LZ-10所产淀粉酶最大酶活力为41.6 U/mL,最适作用温度为50 ℃,在50～70 ℃温度环境下其稳定性较高;最适pH值为7.0,在pH=5.0～7.0的环境条件下稳定性较高;Ca2+、Mg2+、Na+、K+对淀粉酶有激活作用;乙二胺四乙酸（EDTA）、Fe2+、Zn2+对淀粉酶有抑制作用。     

一株产纤维素酶的耐热烟曲霉筛选及产酶条件研究

从土壤中分离和筛选到l株产纤维素酶能力较强的耐热真菌E4.通过菌株的形态特征和18S rDNA序列同源性比较,该菌株被鉴定为一种烟曲霉(Aspergillus fumigatus).实验结果表明,该菌株能在20℃以下生长,其最适和最高生长温度分别为40℃和55℃.该菌株的最佳产纤维素酶的基质为稻草,其最适产酶pH值为5.0,最适产酶温度为42℃.50℃摇瓶培养72h时可达到产酶最高峰,其羧甲基纤维素酶(CMCase)活和滤纸酶(FPA)活分别达到3.5U/mL和3.2U/mL.该菌株对稻草的降解效果较好,45℃液体摇床培养条件下在7d内对天然稻草的降解率达63.5％.     

产右旋糖酐酶菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究

该研究从连云港海域海泥中筛选产右旋糖酐酶菌株,对其进行形态学观察、生理生化试验及分子生物学鉴定,并对其产右旋糖酐酶的酶学性质、酶解产物组分及抗氧化活性进行研究。结果表明,筛选得到一株产右旋糖酐酶菌株GN02,其被鉴定为芽孢杆菌（Bacillus sp.）。菌株GN02产右旋糖酐酶的最适温度和pH分别为20 ℃和7.0,在25～40 ℃、pH 5.0～9.0范围具有良好的稳定性。酶解1 h的主要产物为异麦芽四糖（85.6%）和异麦芽三糖（14.3%）。酶解产物清除羟基自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和超氧阴离子自由基的半抑制浓度（IC50值）分别为0.42 mg/mL、2.98 mg/mL和11.54 mg/mL。     

产有机磷农药降解酶菌株的筛选及酶学性质研究

通过用乙酰胆碱酯酶抑制法检测有机磷农药,从土壤中分离筛选出能降解敌敌畏的7个菌株,从其中降解能力较强的菌株OPD7提取胞内酶,并进行酶学性质的研究。结果表明,该酶分解敌敌畏的最适pH为7.0,最适温度为42℃,pH稳定范围为6-8,在低于47℃时稳定;该酶也能降解乙酰甲胺磷、甲胺磷、乐果和氧化乐果。     

一株产酸性菊粉酶乳酸菌的筛选及其酶学性质研究

为获取新型食品级酸性菊粉酶,对前期构建的广西特色生榨米粉来源乳酸菌库进行了筛选、鉴定和酶学表征。采用终质量浓度为20 g/L菊粉作为唯一碳源的筛选培养基并结合菊粉酶酶活力测定,筛选出1株产酸性菊粉酶的乳酸菌,经过菌落形态观察及16S r DNA基因序列分析,鉴定为柠檬明串珠菌,命名为Leuconostoc citreum 1-1。以菊粉为底物开展酶学表征,结果表明,Leuconostoc citreum 1-1菊粉酶的最适温度为35℃,最适p H为4.0,在20～40℃,p H 3.5～9.0可保持80%的酶活力,薄层色谱法结果表明菊糖几乎100%被水解成果糖。该新型食品级酸性菊粉酶及其生产菌株L.citreum 1-1在高果糖浆生产等菊粉类果糖基资源利用领域具有良好的研究价值和应用潜力。     

一株海洋来源高效产角蛋白酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究

为获得高效产角蛋白酶的菌株,提高产酶能力,研究角蛋白酶酶学性质,该文从广西北部湾海鸭养殖羽毛废弃物土壤通过富集、初筛和复筛获得1株高效降解羽毛角蛋白的菌株Gxun-30,综合形态、生理生化和16S rDNA序列的系统进化分析结构,鉴定为拟蕈状芽孢杆菌(Bacillus paramycoides)。该菌株产酶条件及所产酶学性质研究结果为,菌株产酶最适温度35℃,发酵48 h,整根羽毛几乎完全降解,酶活性可达434.54 U/mL;所产角蛋白酶最适温度为75℃,最适pH为6.5;该酶热稳定性较好,在70℃以下,能保持酶活的稳定性;金属离子中Ca²⁺、Na⁺对该酶活性起到激活作用,而Mn²⁺、Cu²⁺对该酶有显著抑制作用;酶活性可被苯甲基磺酰氟(phenyl methy sulfonyl fluoride,PMSF)和乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)抑制,表明可能为含金属离子的丝氨酸蛋白酶类;异丙醇对酶活性有明显激活作用,相对酶活性可提高至114%...