双重数字聚合酶链式反应定量检测转基因马铃薯EH92-527-1品系

目的 建立双重数字聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法精准定量检测转基因马铃薯EH92-527-1品系的方法。方法 基于马铃薯内源UGPase基因和EH92-527-1品系外源插入片段旁侧序列,设计合成引物和探针,确定反应体系和反应条件,建立转基因马铃薯EH92-527-1品系双重数字PCR定量检测方法。对方法的特异性、定量检测范围、定量检出限、检测准确度进行评估。结果 该方法特异性良好,除转基因马铃薯EH92-527-1品系外,其他物种和品系均无扩增;在线性范围内,内参基因和品系特异性基因拷贝数的相对标准偏差值介于 0.86%～22.90%（＜25%为可接受的范围）,线性决定系数R2＞0.99;品系特异性基因的定量检出限为3拷贝;不同浓度样品EH92- 527-1品系含量测定值与真实值之间的偏差分别为1.54、4.92和-1.31。结论 方法具有良好的重复性和准确度,可以用于进出口产品中转基因马铃薯EH92-527-1成分的定性定量检测。该方法的建立对于转基因马铃薯及其制品的监控监管、安全评价和风险预警具有重要意义。     

大豆及其加工食品转基因成分检测技术研究进展

随着基因工程技术在食用农产品领域的应用发展,形形色色的转基因食品应运而生。目前包括我国在内的许多国家为保护消费者的知情权和选择权,都建立了转基因食品标识管理制度。科学有效的转基因食品检测技术是实现我国转基因产品标识管理的前提。我国食品成分多样且基质复杂,针对初级农产品的转基因成分检测技术并不完全适用于工业加工食品尤其是深加工食品。这对食品监管及技术检测部门提出了新的要求。本文根据技术原理的不同分类介绍了目前几种主要的食品中转基因成分检测技术,除介绍现在已经成熟应用的技术方法外,本文还重点介绍了国内学者新近研发出的几种新技术,为研究人员进一步研发新技术提供重要参考。     

实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系

目的：建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方 法：以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序 列分别设计引物和探针,以其他多种转基因产品和非转基因小麦为对照进行特异性实验,以B73-6-1样品模拟制备 10 个含量梯度的添加样品进行灵敏度实验。结果：本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏 度可达到0.01%（m/m）。结论：该方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确地鉴定转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b 和B102-1-2品系。     

实时荧光定性聚合酶链式反应标准方法检测转基因产品的验证及应用

目的验证实验室大豆、玉米和水稻及其制品转基因检测方法,并应用于实际样品检测。方法根据GB 19495.4-2018《转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法》要求对无转基因标识的样品进行转基因成分检测。结果方法验证满意。40批次样品(大豆、玉米和水稻及其制品)中发现1批次的转基因成分检出,检出率为2.5%。结论市场中绝大部分未标示转基因成分的大豆、玉米和水稻及其制品确实未检出转基因成分,仅有极少数产品含有转基因成分,但未进行有效标识。     

Loop-Mediated Isothermal Amplification for the Event-Specific Detection of Wheat B73-6-1

To develop effective alternatives for detecting genetically modified organisms, we constructed one loop-mediated isothermal amplification (LAMP) event-specific detection method for wheat B73-6-1 in this study. This event-specific LAMP assay can be performed within 38 min without any PCR equipment and the LAMP products can be directly observed by the naked eye instead of conventional gel electrophoresis analysis. The limits of detection of these established visual LAMP assays were about six copies of haploid wheat-genomic DNA. Furthermore, the high specificity of LAMP assays was determined. High specificity and sensitivity, cost-effectiveness, and low requirement of equipment of the developed event-specific LAMP assay of B73-6-1 allow this method to be useful in transgenic wheat samples analysis, especially in highly processed products.     

基因工程和转基因食品的安全性问题

基因工程通过DNA重组技术，能够获得有特殊生物遗传性状和功能的遗传工程生物体（GMO）。基因工程技术应用于农业、食品工业，产生了转基因食品。但是这种人为改变生物体遗传特性的生物技术是否能安全地被利用，从而更好地造福人类呢？本文介绍了基因工程和转基因食品的发展和现状，总结了转基因食品带来的食品本身、生态环境和国家经济方面的安全性问题，并对转基因食品安全性的评价和管理工作进行了综述。     

2015~2017年深圳市场小麦及其制品中转基因成分监测与分析

目的 分析2015~2017年深圳市场小麦及其制品转基因阳性率的变化, 了解深圳市场是否存在未获授权的转基因小麦污染及其本底情况。方法 依据相关国家标准对2015~2017年期间在深圳各大超市抽取的97份小麦及其制品, 进行转基因成分检测, 评估3年来深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率的变化, 并分析其变化的原因。结果 3年来共检出13份阳性小麦类样品, 小麦类样品总体阳性率为13.40%。2015~2017年, 转基因小麦及其制品转基因阳性率分别12.50%、8.11%、25.00%。不同产地、不同采样地点样品阳性率无明显差异。结论 2017年深圳市场转基因小麦及其制品转基因阳性率明显升高, 但阳性样品均为弱阳性, 提示小麦及其制品中检出的转基因阳性成分可能来源于其他转基因生物的基因污染。     

烘焙食品中转基因成分定性检测的FAPAS能力验证结果与分析

目的分析参加FAPAS烘焙食品中转基因成分定性检测能力验证的结果。方法根据FAPAS组织方提供的能力验证作业指导书、国家标准GB/T19495.3-2004转基因产品检测核酸提取纯化方法(部分步骤改进)和行业标准SN/T1204-2016《植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法》对一份烘焙食品测试样品进行转基因成分定性检测。结果该样品检出pCaMV35S、tNOS、GTS40-3-2和MON863品系(基因),未检出Bt11、Bt176、GA21、MIR604、MON810、MON88017、MON89034、MON89788、NK603和TC1507品系。结论本实验重点对核酸提取方法进行改进并严格质控,满足了烘焙食品这类加工样品转基因定性检测要求,获得能力验证结果为满意。     

广州市售豆制品转基因成分的检测与分析

为了解广州市市售豆制品的转基因情况,对广州市售散装豆制品和预包装豆制品分别进行抽样检验.采用改良十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法提取大豆DNA,利用核酸定性PCR、实时荧光PCR及环介导等温扩增技术（LAMP）对外源基因CaMV5S,NOS和EPSPS进行检测.调查共抽检豆制品207份,研究结果表明,在检测的159份散装豆制品中,87份检出转基因成分;在48份预包装豆制品中,18份检出转基因成分.散装豆制品无任何食品标签,而预包装豆制品均无转基因食品标识.     

The construction of pMD18-HT-Soybean as a calibrator plasmid and nested PCR assay for herbicide-tolerant soybeans

A multiple-target plasmid designated as pMD18-HT-Soybean, comprising part of a junction region of genetically modified soybean events A2704-12, A5547-127, MON89788 and GTS-40-3-2, and the endogenous soybean-specific lectin gene were constructed. The limit of detection for quantification of these four event-specific genes using pMD18-HT-Soybean plasmid was 20 copies. Furthermore, a nested PCR detection method was developed for the above four genetically modified soybean events. LOD value of nested PCR detection was 0.005 %. The above results demonstrated that the plasmid pMD18-HT-Soybean DNA represents a valuable alternative to genomic DNA as a calibrator for the quantification of soybean event GTS-40-3-2, MON89788, A2704-12 and A5547-127 in food and feed products. And the validated results also indicated that the developed nested PCR method can be used for identification and quantification of four genetically modified soybean events and its derivates.     

聚合酶链式反应方法检测豆制品中转基因成分的研究概述

大豆作为种植极广的农作物,在人们的生活中占据了重要位置,能加工成多种多样的产品,满足日常需要。 随着生物技术的 快速发展,转基因大豆以其高产量、低成本的优势迅速占领市场。 由于转基因产品的安全性未知,各国对其用途都有严格规定和监 管。该文从我国大豆制品的市场状况、核酸的残留、现行检测标准及实验过程中存在的问题等方面进行了总结和讨论,以期对转基因 产品的市场监管检测体系能够有所裨益。     

转基因食品及其检测技术的研究进展

基因工程通过DNA重组技术，能够获得有特殊生物遗传性状和功能的遗传工程生物体（GMO）。基因工程技术应用于农业、食品工程，产生了转基因食品。本文概述了转基因食品在国内外的发展状况，并简要介绍了转基因食品检测技术的原理、优缺点及应用情况。     

浅析肉制品中植物源性转基因成分风险

肉制品种类繁多, 是人们日常饮食中重要的组成部分。在现代肉类产品加工过程中, 为改善肉制品的品质、优化产品质量、确保营养均衡, 植物源的成份如植物蛋白、淀粉、膳食纤维、食用胶、植物油以及各种调味品等被广泛运用。伴随着当前全球范围内转基因作物的商品化, 导致肉制品中不可避免地面临植物源性转基因成分风险。本文主要对我国肉制品的现状、肉制品中植物源性成分的使用、肉制品中植物源转基因成分风险以及转基因成分检测进行了概述。旨在引起社会对来自于转基因农作物成分在肉制品下游加工环节中使用情况加以关注, 从而推动转基因食品追溯体系的建立, 进一步规范标识。     

转基因大豆加工过程DNA降解研究

转基因大豆及其加工品已进入我国市场,但其食用安全性仍存在争议。本文深入研究转基因大豆加工过程中内、外源DNA 的含量及降解程度,为其进入下游食物链的监控追溯提供有效的科学依据。     

转基因食用农产品的快速检测方法

商业化转基因农作物广泛种植,转基因农产品被大量用作食品和动物饲料。我国和全球大部分国家都实行转基因生物强制标识制度。转基因农产品的现场监督检测急需稳定可靠的快速检测手段。本文论述了主要的基因水平检测方法包括PCR、基因芯片、环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和蛋白质水平检测方法(蛋白质免疫印迹法、酶联免疫吸附法、胶体金免疫层析试纸条法)。通过比较分析上述各检测方法的优缺点,LAMP和胶体金试纸条法是当前最理想的现场快速检测方法。     

肉制品中植源性转基因成分多重荧光定量PCR检测方法的建立

为改善产品品质,肉制品加工过程中常常添加植物源性成分,当前转基因农作物的商品化及其在市场上 的广泛流通导致肉制品中被带入植源性转基因成分的风险增加。以转基因植物中常涉及的调控元件CaMV 35S启 动子、NOS终止子以及标记基因NPTⅡ为检测目标,设计相应的引物和Taq man探针,利用载体pRⅠ 101-AN DNA 为模板,通过优化反应体系和反应参数,建立肉制品中植源性转基因成分的单重和多重荧光定量聚合酶链式反应 （polymerase chain reaction,PCR）检测方法。通过比较分析,考察多重荧光定量PCR检测方法的灵敏性、重复性和准 确性,结果表明,多重荧光定量PCR检测方法灵敏度高、重复性好且与单重体系的检测结果具有很好的一致性。     

转基因作物全球发展现状及检测技术研究进展

转基因农作物的研究与应用为全人类的粮食供应问题提供了可持续发展的基础。1996~2016年,转基因农作物很好地完成了市场渗透过程,并成功进行了商业化的生产,世界范围内,越来越多的农民也开始采用转基因种子进行农产品的种植。随着耐除草剂、耐虫性、耐旱性、抗病性等多种性状的结合的转基因农作物的引入,对食品和饲料产业链中的转基因农作物进行追踪和标识的可靠并灵敏的检测方法变得越来越重要。转基因农作物适用范围广,采用速度快,在全世界范围内都引起了巨大的争议,为减轻这种争议,实施有效的监管措施来检测并保障转基因农作物的安全成为亟待解决的问题。基于DNA水平的转基因农作物的食品分析与检测技术已被广泛应用,二代测序技术(second generation sequencing technology,NGS)则提供了更为敏感、精准、安全的技术手段。本文介绍了全球范围内转基因农作物商业化的现状,并对转基因作物相关检测技术进行探讨。     

Medical and biological assessment of genetically modified corn line MON 810 resistant to European corn borer and line GA 21 resistant to glyphosate: a chemical study

Chemical analysis of genetically modified corns MON 810 resistance to European corn borer and GA 21 tolerance to glyphosphate was performed. Results of these studies showed that there is no difference between genetically modified and conventional corn products.     

我国转基因食品标识管理立法困境与出路

现行《食品安全法》对转基因食品强制标识仅作了原则性规定,致使现行规定仍过于模糊、存在疏漏,易在实践操作中出现困境。通过对转基因食品标识管理的立法进行梳理,认为我国转基因食品标识兼采以产品与过程为基础的强制标识原则,并实行偏向商谈-建构模式下的过程中心主义强制标识制度,仍存在着转基因食品定义不清、标识主体和内容模糊以及未标识责任不明确的问题,最后针对现行转基因食品标识管理立法层面存在的不足与缺漏,提出相应的完善建议。     

Screening food products for the presence of CaMV 35S promoter and NOS 3′ terminator

Biotechnology has enabled the modification of agricultural materials in a very precise way, thereby improving productivity and yields of economically important crops. There are a number of methods available for detecting genetically modified organisms (GMOs). In the present investigation, a qualitative PCR technique has been adopted in order to discriminate between genetically modified and non‐modified food products. The qualitative PCR assay employs primers specific for genetic elements that are used to generate genetically engineered agricultural crops. Two of the most common primers used for the detection of GMOs, 35S promoter and NOS 3′ terminator, have been tested over a panel of 24 food products purchased from the local market. The results indicated that, out of the 24 food products tested, three products gave positive results with the 35S promoter. The NOS 3′ primers gave negative results with all tested samples. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry