高效液相色谱-串联质谱法检测河豚毒素的 方法研究

目的 创新性地建立了一种用高效液相色谱－串联质谱法检测水产品中的河豚毒素的方法。方法 取适量样品,在0.03M乙酸溶液中均质后超声提取样品中的河豚毒素。粗提液低速离心,取上清液加入等量甲醇充分混匀后进行高速离心。高速离心后上清液过0.22μm滤膜后待测。采用Waters ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1×100mm,1.7μm)色谱分析柱,含0.1%甲酸的MilliQ水及乙腈溶液为流动相,电喷雾正离子模式进行分析。结果 河豚毒素在5-1000 ng/mL的范围内线性关系良好,相对回收率为85.8%~93.2%,绝对回收率为47.8%~48.9%,检出限为0.4ng/mL,定量限为1 ng/mL。 结论 与以往检测TTX的LC-MS/MS方法相比,新建方法操作简单、快速、准确、灵敏并且实验成本低,为水产品中TTX的定量检测提供了有效的实用技术手段。     

超声-固相萃取高效液相色谱-串联质谱法测定红鳍东方豚中的河豚毒素

目的建立快速、准确检测红鳍东方豚中河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)的分析方法。方法样品用0.1%乙酸水溶液超声提取,C18固相萃取柱净化,用亲水性色谱柱ZIC?-c HILIC(150 mm×2.1 mm,3μm)洗脱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相。选择正离子多反应监测(MRM)模式,[M+H]+,m/z 320.3/302.2为定量离子,进行HPLC-MS/MS测定,外标法定量。结果河豚毒素在5~100 ng/m L的范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9997,回收率为82%~91%,相对标准偏差RSD为5.3%~15.7%,方法的定量限为5 ng/m L。结论该方法快速准确,灵敏度高,适用于红鳍东方豚中河豚毒素的测定。     

高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定鱼体中河豚毒素

目的建立高效液相色谱-串联四级杆质谱联用仪多反应监测技术(MRM)测定鱼体中的河豚毒素(TTX)含量的方法。方法海鱼样品用80%酸化甲醇水溶液(含0.1%乙酸)超声提取,二氯甲烷脱脂净化,超滤管离心,取滤液过膜后进行分析。目标物TTX以p H=3.5的乙腈-0.06%甲酸铵溶液(65∶35,V/V)为流动相,经HILIC色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)等梯度洗脱分离,采用电喷雾离子源,选择质谱多反应监测正离子模式,以保留时间和河豚毒素的二级质谱特征碎片离子予以双定性确证,基质标准曲线校正,外标法定量。结果河豚毒素与杂质能良好分离,在0.10~2.0 mg/kg范围内线性关系良好(r=0.997),方法检出限为0.012 mg/kg,定量限为0.041 mg/kg,加标回收率为75.7%~108.1%,相对标准偏差为1.4%~5.1%。应用该方法对20份实际样品进行检测,均未检出TTX。结论本方法准确、快捷、简便,可应用于食物中毒因子识别与鉴定。     

高效液相色谱-串联质谱法检测新鲜蔬菜中的氯酸盐残留

目的建立高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测新鲜蔬菜中氯酸盐的分析方法。方法称5 g样品,分别用5 mL乙腈提取2次,合并提取溶液,定容,无需净化步骤,选择Hypercarb多孔石墨化碳色谱柱作为固定相,1%乙酸-水溶液和1%乙酸-甲醇溶液作为流动相进行梯度洗脱色谱分离,然后采用电喷雾离子化三重四极杆串联质谱测定。结果氯酸盐在0.0025～0.2 mg/L范围内峰面积与质量浓度的线性关系良好,相关系数(r~2)大于0.999;平均回收率为72.9%～100.2%,相对标准偏差为1.8%～6.2%,氯酸盐的定量限为0.01 mg/kg。结论该方法简单快速、准确可靠、成本低廉,适合新鲜蔬菜中氯酸盐的测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时检测饮料中16种添加剂

目的建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测饮料中多种添加剂的分析方法。方法称取样品直接加入50%甲醇溶液,涡旋振荡提取5 min后经聚四氟乙烯(polytetrafluoroethylene, PTFE)滤膜过滤,滤液直接上机进行检测。本实验采用Atlantis T3色谱柱(2.1 mm×150 mm, 3μm), 10 mmol/L乙酸铵-乙腈作为流动相体系进行梯度洗脱;在电喷雾离子化(ESI)正负离子扫描模式下,以多重反应监测(multiplereactionmonitoring,MRM)为基础进行检测,通过外标法进行定量分析;最后,考察了不同浓度的溶剂对目标分析物的提取效率及不同规格的滤膜对目标分析物的吸附效应。结果此方法可快速准确检测苯甲酸等16种食品添加剂,浓度范围在0.02～1μg/mL内线性相关良好,相关系数(r)均大于0.995,平均回收率为75.92%～114.13%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为0.42%～7.69%(n=6)。结论本方法适用于同时快速检测饮料中的多种添加剂。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测蜂蜜中的 甲硝唑含量

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测蜂蜜中的甲硝唑含量。方法取混合均匀的蜂蜜样品加入饱和氯化钠溶液混合,再经乙酸乙酯提取,经阳离子交换小柱净化。采用UPLC-MS/MS技术,以多反应监测模式检测,以外标法定量。结果甲硝唑在1~10.0μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,回收率为76%,检出限为0.1μg/kg,相对标准偏差为3.4%(n=6)。结论该方法快速、准确、灵敏,可用于蜂蜜中甲硝唑的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测减肥茶中的匹可硫酸钠

目的 为筛查减肥茶中的非法添加药物匹可硫酸钠,解决现有检测方法不适用于减肥茶样品,存在基质干扰和样品加标回收率差等问题,对现有方法前处理过程中的提取试剂、提取方法等参数进行优化,建立了减肥茶中非法添加匹可硫酸钠的高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法 样品经1 mol/L盐酸溶液提取后,经过聚酰胺固相萃取小柱净化,采用AgilentSRRHDSEclipseSPlus C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)分离,以乙腈-乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,多反应监测(MRM)模式下检测,外标法定量。结果 匹可硫酸钠在5 ng/mL～500 ng/mL时响应值与浓度呈良好线性关系,方法检出限为0.125 mg/kg,样品的加标回收率为90.4 %～99.1 %,相对标准偏差(RSD)为2.8 ％～6.9 ％。结论 本方法通过对目标物的有效净化和富集,能有效除去基质干扰,提高方法灵敏度,降低基质效应,实现了快速测定,准确定量和确证的目的,适用于减肥茶中匹可硫酸钠的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中异丙嗪

建立高效液相色谱-串联质谱法测定畜肉及内脏中异丙嗪残留量的定量检测方法。首先通过甲酸-乙腈进行试样提取,然后经HLB离子交换萃取小柱净化,最后采用多反应监测模式进行定量分析。结果表明：本方法在0.5～50 ng/mL范围内线性关系良好,线性相关系数大于0.999,检出限和定量限分别为0.1 μg/kg和0.3 μg/kg;基质添加回收范围在85.7%～102.0%之间,相对标准偏差在0.9%～7.4%之间（n=6）。该方法前处理简单、快速,可用于畜肉和内脏中异丙嗪的定量测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定保健品中甲壳素

本研究建立了保健品中甲壳素的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法。含甲壳素保健品样品经盐酸水解后生成氨基葡萄糖,吸取上清液过OASIS MCX固相萃取小柱,用水淋洗固相萃取柱并弃去全部流出液,用真空泵抽干小柱,再用5%氨水甲醇洗脱被测物,洗脱液于60℃水浴中氮气吹干,用初始流动相定容,以C18色谱柱和乙腈-0.1%甲酸水流动相体系进行梯度洗脱分离,采用电喷雾负离子多反应监测(MRM)模式测定。实验考察优化了水解条件、净化条件和仪器条件。在优化实验条件下,甲壳素水解产物在0.1~50 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9907;甲壳素的方法检出限(S/N=3)为1.5μg/g,方法定量限(S/N=10)为6.25μg/g;平均加标回收率为89.2%~92.4%,相对标准偏差(n=6)为0.25%~1.35%。该方法前处理简单、灵敏度高、选择性强、回收率高、精密度好,适用于保健品中甲壳素的测定。     

高效液相色谱法和高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中的四环素类残留量

目的 建立高效液相色谱法定量测定水产品中四环素类残留量,同时采用高效液相色谱-串联质谱法进行定性确证和定量检测。方法 具体优化了缓冲提取液浓度、固相萃取柱类型、色谱条件选择等测定环节。样品经柠檬酸缓冲液提取,固相萃取柱净化后,以液相色谱-紫外检测器进行定量检测,同时也可通过高效液相色谱-串联质谱仪进行定性和定量。结果 在10~200 ng/mL范围内线性良好(r>0.999),四环素类目标物在10、50、100 μg/kg 3个水平上进行加标回收试验,回收率为76.0%~94.5%,相对标准偏差为3.9%~7.4%,高效液相色谱法检出限为5 μg/kg,液相色谱-串联质谱法检出限为1 μg/kg。结论 该方法简便、稳定、准确,适合测定水产品中的四环素类残留量。     

高效液相色谱-串联质谱法测定芝麻菜中萝卜硫素

目的 建立高效液相色谱-串联质谱法测定芝麻菜中萝卜硫素的分析方法 。方法 芝麻菜样品加入一定量pH 6磷酸缓冲溶液,于50℃水浴下振荡水解2 h,冷却至室温后经二氯甲烷萃取,萃取液吹干后用乙腈复溶,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,经Zorbax SB C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 3.5μm)进行分离,采用电喷雾正离子多反应监测(multiple response monitoring, MRM)模式检测,外标法定量测定新鲜芝麻菜中萝卜硫素的含量。结果 萝卜硫素在10～500ng/m L质量浓度范围内线性关系良好(r2≥0.999),检出限为4.0μg/kg,定量限为13.0μg/kg,在低、中、高3水平的加标回收率为95.7%～104.0%,相对标准偏差低于1.000%。应用本研究建立的方法 对不同生长周期新鲜芝麻菜中萝卜硫素含量检测,变化趋势与文献报道结果 一致,萝卜硫素在生长过程中逐渐积累,成熟前期达到最高,到成熟后期由于植物衰老萝卜硫素含量存在下降趋势。结论 本方法 满足准确度、精密度及灵敏度等要求,适用于新鲜芝麻菜中萝卜硫素的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测糕点中6种甜味剂

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定糕点中6种常用合成甜味剂的分析方法。方法选用超纯水作为提取溶剂,涡旋和超声提取后,低温离心,取部分上清液加入正己烷除脂,Waters Atlantis■T3色谱柱、甲醇-5 mmol/L甲酸铵(含0.1%甲酸)作为流动相、亲水亲脂平衡型固相萃取柱HLB(hydrophile-lipophile balance)净化。结果6种甜味剂在质量浓度为10~200 ng/mL的曲线范围内呈良好线性关系,相关系数r均大于0.999,平均加标回收率在85.0%-98.2%之间,相对平均偏差(relative standard deviation,RSD)为1.3%~6.7%。结论该方法具有前处理简单、灵敏度高、检测速度快等优点,适合糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜的检测,但不适用于安赛蜜的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测鱼肉中5种头孢类药物

建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼肉中5 种头孢类抗生素（头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、头孢 喹肟和头孢唑啉）残留的检测方法。鱼肉基质经乙腈提取,Prime HLB（6 mL,200 mg）固相萃取小柱净化。采用 AB-4500 Qtrap液相色谱-串联质谱仪,Accucore C18 RP-MS色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）,以乙腈和体积分 数0.1%的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30 ℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描,多反 应监测模式,外标法定量。结果表明：5 种头孢类药物在0～75 μg/kg范围内线性良好,且在8 min内完全分离;5 种 头孢类药物的检出限均为0.5 μg/kg,定量限为2.0 μg/kg;在10、25、40 μg/kg加标水平下,5 种头孢类药物的批内平 均加标回收率为81.0%～111.0%,相对标准偏差为0.41%～10.50%,批间平均加标回收率为84.7%～106.0%,相对标 准偏差为0.88%～8.71%。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定啤酒中的真菌毒素

建立啤酒样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、去环氧脱氧雪腐镰刀菌烯醇、脱氧雪腐镰刀菌烯醇-3-葡萄糖苷、雪腐镰刀菌烯醇等7种真菌毒素的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。啤酒样品经过Mycosep226多功能净化柱净化后,取净化液吹干浓缩后,经Acquity UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）分离,在负离子模式下,用电喷雾电离串联质谱以多反应监测模式（MRM）进行检测分析,同位素内标法进行定量。结果表明,7种真菌毒素在2～1000μg/L浓度范围内线性关系良好（r＞0.999）,最低检出浓度为0.03μg/L,在20μg/L、200μg/L、500μg/L 3个加标水平下进行了验证试验,平均回收率为82.7%～115%,相对标准偏差为1.94%～9.87%。该方法简便、快速、准确,满足实验要求,可用于啤酒样品中真菌毒素的多残留的检测分析。     

抗氧化剂的超高效液相色谱-串联质谱法测定

研究了油炸食品中化学合成酚类抗氧化剂--丁基羟基茴香醚(BHA)、二叔丁基对甲酚(BHT)、没食子酸丙酯(PG)、特丁基对苯二酚(TBHQ)的检测,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定,以反相C18为分离柱,乙腈-甲醇水体系为流动相进行梯度洗脱,采用负离子检测模式,外标法定量。4种抗氧化剂呈良好线性关系(R2=0.9953~0.9998),PG方法检出限为2.0μg/kg,BHA、TBHQ检出限为200μg/kg,BHT检出限为500μg/kg。回收率为79%~96%,相对标准偏差为0.9%~5.3%,方法准确、灵敏、重现性好,可用于油炸食品中抗氧化剂的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测鲜冻肉中违禁注水药物

建立鲜冻肉中同时检测阿托品、利多卡因、普鲁卡因、山莨菪碱、东莨菪碱、沙丁胺醇6?种违禁注水药物残留的高效液相色谱-串联质谱法。样品经磷酸盐缓冲液提取,HLB固相萃取小柱净化,采用多反应监测模式检测,外标法定量分析。结果表明：6?种药物在0.25～50?ng/mL范围内线性关系良好,线性相关系数均大于0.99,检出限和定量限分别为0.5?μg/kg和2.0?μg/kg;回收率在78.07%～96.76%之间,精密度的相对标准偏差在0.4%～2.1%之间（n=6）。该方法前处理简单、快速、准确、灵敏,可以满足实际检测分析的需要。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中国劲酒中 甜菜碱含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定中国劲酒中甜菜碱。方法采用Agilent SB-C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸-甲醇溶液(85:15,V:V)为流动相,流速为0.2 mL/min。质谱采用电喷雾正电离源模式(electronic spray ion,ESI+)和多反应监测模式(multiple reactions monitoring,MRM)监测,监测离子m/z分别为1 1 8.2/53.2和118.2/42.3,以外标法定量。结果甜菜碱在3.99~39.9μg/g范围内具有良好的线性关系,相关系数大于0.999,检出限为0.1μg/g,平均回收率为99.5%,相对标准偏差为0.46%(n=9)。结论本法简便易行、结果准确、重现性好,可适用于中国劲酒中甜菜碱的含量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测油脂样品中18种邻苯二甲酸酯含量

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测油脂样品中18种邻苯二甲酸酯的含量。方法采用乙腈提取油脂样品中的邻苯二甲酸酯,经Waters Acquilty UPLC BEH Cl8色谱柱分离,以0.1%甲酸和0.1%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱;质谱采用电喷雾正电离-和多反应监测模式测定,Waters PFCs Isolator kit消除分析系统背景干扰。结果DEHP、DNOP、DNP、DINP及DIDP在50~2000μg/L范围内线性关系良好,其余13种邻苯二甲酸酯(DMP、DEP、DBP、DIBP、DMEP、BMPP、DEEP、DPP、DHXP、BBP、DBEP、DCHP和DPh P)在5~200μg/L范围内线性关系良好,高、中、低3水平加标回收率在65.1%~120%范围内,RSD为1.0%~9.3%,检出限为1.0~31μg/kg(DIDP、DINP为125μg/kg)。结论本方法操作简单、快速、准确,可适用于油脂样品中18种邻苯二甲酸酯的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中的甲基乙二醛

目的建立一种蜂蜜中甲基乙二醛的高效液相色谱-串联质谱法的测定方法。方法采用高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中的甲基乙二醛,蜂蜜样品直接用水提取,2,3-二氨基萘为衍生化试剂,常温下避光反应8 h以上,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,色谱柱分离,通过质谱电喷雾离子源,正离子模式进行定性和定量分析。结果甲基乙二醛的线性范围为0.05~1.0μg/m L,相关系数0.999以上,线性良好,检出限为0.2 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。回收率92.4%~97.5%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于1.3%。结论该方法的精密度、回收率均满足要求,适用于大批量样品的快速检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定母乳中的 N-乙酰神经氨酸

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定母乳中N-乙酰神经氨酸的分析方法。方法用盐酸对样品进行酸水解释放出母乳中的结合态N-乙酰神经氨酸,高速离心后,采用C_(18)柱进行分离。以0.1%甲酸-乙腈溶液和0.1%甲酸-水溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾质谱检测,正离子多反应监测模式(MRM)进行定性和定量分析。结果在优化的条件下,N-乙酰神经氨酸在0.01~0.5 mg/L范围线性关系良好(r=0.9997)。以10、50、100 mg/kg 3个添加水平进行加标回收试验,N-乙酰神经氨酸的平均回收率为95.0%~98.7%,相对标准偏差为11.6%~14.5%,N-乙酰神经氨酸的检出限为0.21μg/kg。结论该方法简单、快速、重复性好、灵敏度高,可广泛用于母乳中N-乙酰神经氨酸的测定。