碱性蛋白酶洗涤稳定性提高的研究进展

碱性蛋白酶是液体洗涤剂中使用量最大的一类酶制剂,应用于洗涤剂行业的碱性蛋白酶占碱性蛋白酶市场的60%以上。不同于粉状洗涤剂中的酶制剂被造粒所包裹,液体洗涤剂中的碱性蛋白酶直接暴露于溶液中,与洗涤剂成分如表面活性剂、洗涤助剂及漂白剂直接接触作用,使得蛋白酶洗涤稳定性下降。除此之外,蛋白酶在液体洗涤剂环境中存在普遍的自溶失活现象,对其洗涤性能造成不利影响。如何提升碱性蛋白酶的稳定性是液体洗涤剂领域中的一个热点问题。本文介绍了碱性蛋白酶的催化与失活机制,综述了几种常用于稳定碱性蛋白酶的策略,即添加稳定剂、分子改造和化学修饰,重点介绍了化学修饰中的聚乙二醇化修饰与多糖修饰,对比了两种修饰方法的过程与效果,并在最后对碱性蛋白酶稳定性提高策略进行了展望。     

DSP-PELA/SiO2微球的制备及其体外释药研究

采用自制的聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸/SiO2 PELA/SiO2)材料作为药物载体,通过溶剂挥发法制备了地塞米松磷酸钠(DSP)微球,并对微球的粒径、载药量以及体外缓释性能进行了研究.微球电镜图片显示其粒径大小分布在8μm左右,符合缓释制剂要求.体外缓释研究结果显示,PELMSiO2微球具有明显的缓释作用.     

中国专利

一种高分子微球及其制法和用途 该微球基质成分为聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)共聚物。以聚乙烯醇-聚乙二醇(PVA-PEG)混合溶液为分散介质,通过乳液分散溶剂蒸发法,在机械搅拌作用下制备出该微球。微球粒径在10/μm以下可控。微球表面光滑、颗粒规则、无粘连,对生物体网状内皮系统具有优良的靶向性,能携载药物和蛋白,可生物降解,用于药物及疫苗的靶向缓释体系。     

PELA-OmpK微球疫苗的部分特征及其对鲫鱼的口服免疫效果

目的研究聚-DL-乳酸-聚乙二醇共聚物(DL-polylactide-co-polyethylene glycol,PELA)包裹哈维弧菌(Vibrio har-veyi,Vh)重组外膜蛋白OmpK制备的微球疫苗的部分特性及其对鲫鱼(Carassius auratus gibelio)的口服免疫效果。方法用可生物降解的合成高分子材料PELA,通过乳化溶剂挥发法包裹OmpK,制备微球疫苗,Bradford法测定蛋白浓度,计算蛋白包裹率;通过扫描电镜观察微球粒径大小及其在4℃保存不同时间的形貌。取鲫鱼随机分为3组:微球疫苗组、OmpK蛋白组和空白对照组,前两组采用疫苗或蛋白拌饲投喂方式口服免疫,投喂3 d,间隔7 d,再投喂3 d加强免疫;对照组投喂不含疫苗的饲料。加强免疫4周和8周后,经腹腔注射20 LD50的Vh EcGS020802株攻击,记录各组鱼死亡数,计算相对免疫保护率。结果制备的PELA-OmpK微球疫苗中OmpK蛋白的包裹率达78%。微球粒径小于12μm,且90%微球的粒径小于5μm。4℃保存10 d微球表面光滑、圆整;保存30 d PELA微球降解,粒径较大的微球表面出现空洞;保存60 d可见大量碎片,微球表面毛糙松散,出现多个空洞。微球疫苗加强免疫鲫鱼4周和8周后,对活菌攻击的相对免疫保护率分别为70%和48%,而口服OmpK蛋白组和空白对照组鱼全部死亡。结论用PELA包裹裸疫苗制备成微球疫苗,对抗原具有一定的保护作用,PELA用作鱼类口服疫苗的投递载体是可行的。     

羧甲基琼脂糖微球的制备及其在国产碱性蛋白酶纯化中的应用

以琼脂糖粉末为原料,利用反相悬浮原理制备琼脂糖凝胶微球。所得琼脂糖微球的粒径分布在45～165μm范围内,并对其进行了交联。以自制交联琼脂糖微球为基质,对其进行了羧甲基化反应。依据离子交换容量进行键合量的表征,综合考察了各种反应试剂的用量、反应温度、反应时间等条件对键合量的影响。将所得的羧甲基键合微球用于碱性蛋白酶粗品的分离纯化,结果表明,自制羧甲基弱阳离子交换填料对国产碱性蛋白酶具有较好的分离纯化、除色以及除味等作用,可以达到国外同类产品的效果。     

聚3-羟基丁酸酯-聚乙二醇共混改性微球的制备

以聚3-羟基丁酸酯(PHB)和聚乙二醇(PEG)共混物为原料,采用复乳化-溶剂蒸发技术制备微球.通过FTIR、DSC和SEM等手段研究了在微球基材中引入PEG对最终微球组成、结构以及表面形貌的影响.结果表明,通过该工艺可以在微球的基材中引入PEG,从而降低PHB结晶相的规整度;随着PEG/PHB质量比变化,微球结构和表面形貌差别明显,最优质量比为14时,微球的得率达到36.1%,微球表面呈多孔状态,内部为微球嵌套结构,预期可以达到较好的控释效果.     

聚乳酸-壳聚糖共聚物载药微球的制备及性能研究

为了改善聚乳酸(PLLA)的组织相容性及细胞亲和性,提高盐酸乌拉地尔生物利用率,文中在催化剂4-(二甲胺基)吡啶与N,N'-二环己基碳酰亚胺共同作用下,将含亲水基团的碱性聚电解质壳聚糖(CS)与PLLA共聚,制备了聚乳酸-壳聚糖接枝共聚物(PLCS),采用溶剂挥发法制备盐酸乌拉地尔PLCS微球并对其结构进行了表征,同时对微球的包封率和药物释放进行了测试。通过有机相加入乙醇的方法可以提高微球对药物的包封率。结果表明,当无水乙醇与三氯甲烷的体积比为1∶2时,制得的微球包封率最高,达到34.86%。体外药物释放结果表明,PLCS微球具有明显的缓释作用,其释药动力学满足Higuchi方程。     

聚乙二醇/纤维素微球的SEM分析

通过采用不同分子量的聚乙二醇(PEG)作为相变储能基,接枝共聚的方法制备了聚乙二醇/纤维素微球,通过扫描电子显微镜(SEM)对制备的聚乙二醇/纤维素微球的形貌进行了表征。研究结果表明PEG1000/纤维素微球和PEG2000/纤维素微球的部分微球粘连、团聚。     

微乳液中四氯化硅水解制备二氧化硅微球

利用阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)配制微乳体系,并利用工业生产单晶硅副产物四氯化硅制备粒径分别为45 nm和60~120 nm的二氧化硅微球。探讨了加水量、氨水浓度、四氯化硅用量、搅拌转速、反应温度对微球粒径及表面形貌的影响。研究表明,在CTAB乳液体系中,微球粒径随含水量的增加而减小,随通入四氯化硅气体量的增加而增大,且只有在碱性条件下才能得到硅球;在Triton X-100乳液体系中,微球粒径随含水量的增加呈现先减小后增大的趋势,随四氯化硅液体加入量的影响较小,碱性越高颗粒成球度越好、分散性能越好。微乳液反应过程不宜搅拌,且反应温度不易高于四氯化硅沸点。     

聚乳酸/聚乙醇酸可生物降解微球的制备及其对RNP的佐剂作用

目的　制备包裹狂犬病毒核衣壳 (RNP)的PLA/PLG可生物降解微球 ,并观察其对RNP的佐剂作用。方法　以蛋白载量、包裹率、微球形态及粒径分布作为评价微球质量的指标 ,通过变换制备条件 ,获取质量较好的微球 ;观察三种不同聚合物材料制成的RNP微球在体外 37℃条件下的水解和释放 ;比较不同微球免疫效果。结果　PLA/PLG微球作为RNP载体 ,单剂接种诱生实验动物的抗NP抗体与AL(OH) 3 佐剂两次接种的滴度接近 ,但明显好于不加佐剂的对照组。结论　PLA/PLG微球对RNP具有良好的佐剂作用。     

负载药物替莫唑胺的纳米羟基磷灰石/聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球的缓释行为

以聚乳酸-基乙酸共聚物(PLGA)和纳米羟基磷灰石(nHA)作为生物降解材料制备了药物替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)的缓释系统.采用湿法化学工艺制备了球状和棒状的nHA粉末.将TMZ药物分子负载在nHA表面(nHA-TMZ),再通过乳化溶剂挥发法将nHA-TMZ包裹在PLGA微球中,同时研究了微球中nHA的形貌和含量对缓释微球物化性能的影响.用扫描电镜、紫外分光光度计分别测定了微球的结构、形貌、药物包封率和缓释行为.相比于不含有nHA的TMZ/PLGA缓释微球,nHA的介入能够显著提高药物的包封率,并且包封率与nHA的加入量有关.此外,药物释放实验表明包裹在微球中的nHA的形貌和溶解速率能够影响微球的缓释行为.     

α-甲基苯乙烯与丙烯腈共聚物交联纳米微球的制备及其与橡胶界面作用研究

以α-甲基苯乙烯(α-MSt)与丙烯腈(AN)为共聚单体,二乙烯基苯(DVB)为交联剂,采用乳液聚合工艺制备α-MSt与AN共聚物(MStAN)纳米微球,并对其性能进行研究。结果表明:MStAN纳米微球在二元乙丙橡胶(EPM)中的分散性较好,其表面含有一定量的悬挂双键,可参与硫化过程中的交联反应。随着交联剂DVB含量的增大,微球表面双键含量先增大后减小;随着引发剂过硫酸铵含量的增大,微球表面双键含量减小。与EPM胶料相比,MStAN/EPM复合材料的物理性能显著提高。MStAN纳米微球表面双键含量越大,其对橡胶的补强效果越好。     

复乳法制备大孔聚合物微球

研究在不使用乳化剂和致孔剂的条件下采用两亲性聚合物单甲氧基聚乙二醇聚乳酸共聚物制备大孔微球,确定了形成大孔结构的必要条件及孔径的控制方法,并对大孔微球的形成机理进行了探讨. 结果表明,两亲性聚合物单甲氧基聚乙二醇聚乳酸共聚物能较好地稳定乳液进而形成贯穿孔结构,而选用疏水性聚合物聚乳酸和聚(乳酸-羟基乙酸)时只能制备出单腔室结构的微球;当内水相与油相体积比在1:4~1:2、油相溶剂去除分两步时,能形成孔径在100 nm以上的大孔聚合物微球,大孔微球的孔径随着初乳化速率的增大而减小.     

相分离-溶胀法制备生物可降解PELA多孔纳米微球

采用相分离-溶剂去除法制备纳米尺度的单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸共聚物(PELA)微球,分析了纳米微球在溶液中的形成机理;用有机溶剂对纳米微球进行溶胀制孔,制备出具有不同孔道特征的纳米微球. 结果表明,以乙醇+丙酮为油相、去离子水为水相,油相中PELA含量6.5 g/L、水相中SDS含量1%、油与水相体积比1:6、油相中乙醇含量50%(j)条件下,所制微球粒径为78.48 nm. 溶胀时间为0.5 h时,以甲苯为溶胀剂所制PELA微球具有中空单孔结构,以二氯甲烷为溶胀剂所制PELA微球具有多孔结构. 用相同方法制备了具有孔结构的聚乳酸、聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物纳米微球,其与PELA的成孔趋势相同. 以模拟体液考察多孔PELA纳米微球的降解性能,30 d可充分降解.     

α-Fe2O3空心球的溶剂热合成与表征

以FeCl3.6H2O为原料,乙醇为溶剂,采用聚乙二醇(PEG-400)辅助的溶剂热法制备了大小均匀的α-Fe2O3空心微球,其直径约为900 nm,粒径分布均匀。产物经X射线衍射仪(XRD)、扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)进行了表征。     

静电喷雾法制备聚醚砜多孔微球孔隙率的控制研究

采用静电喷雾法制备了聚醚砜(PES)多孔微球,通过加入亲水性聚合物聚乙烯醇(PEG)和聚乙二醇(PVA)来调控PES多孔微球的孔隙率,利用扫描电子显微镜和热失重法分析仪表征了PES多孔微球的形貌和孔隙率。结果表明,加入亲水性聚合物PEG和PVA均能显著提高PES多孔微球的孔隙率,且随着其添加量的增多,孔隙率呈先增大后减小的趋势;PVA对PES多孔微球孔隙率的调控效果优于PEG,当PVA添加量为3%(质量分数,下同)时,PES多孔微球孔隙率达到最高值91.35%。     

mPEG-PLGA多孔微球的制备及其对降钙素的吸附行为

以聚乙二醇-聚(乳酸-乙醇酸)共聚物(mPEG-PLGA)为材料,采用溶剂挥发法与快速膜乳化法制备了尺寸均一的mPEG-PLGA多孔微球,用其吸附降钙素,考察了降钙素浓度、吸附时间、离子浓度、温度及pH值及微球性质对吸附的影响. 结果表明,优化的吸附条件为：降钙素浓度1.0 mg/mL, pH 7.4, NaCl浓度0.2 mol/L, 14℃下吸附8 h,该条件下,微球吸附量为48.9 mg/g;吸附量与微球比表面积正相关.     

石墨烯包裹的PMMA微球改性环氧树脂的导热性

利用悬浮聚合法和改进Hummers法分别制得粒径为200~300 nm的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球和氧化石墨烯,再用化学还原方法将氧化石墨烯包裹在PMMA微球上,最后利用氧化石墨烯包裹的PMMA微球对环氧树脂进行改性,制得低氧化石墨烯含量的高导热率环氧树脂复合材料。包裹氧化石墨烯的PMMA微球改性后的环氧树脂复合材料微观形貌测试结果表明,氧化石墨烯包裹的PMMA微球均匀分散在环氧树脂基体中;环氧树脂复合材料的导热性在氧化石墨烯含量为0.1%、0.3%、0.5%、0.7%和1%时,导热率分别由纯环氧树脂的0.19 W/(m·K)提高到0.52、0.99、1.22、1.33和1.42 W/(m·K)。     

聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)微球的制备

以α-氰基丙烯酸异丁酯为原料,通过乳化法制备了聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)微球。考察了体系pH、表面活性剂浓度、单体浓度、反应时间等对微球的影响,并用激光粒度分析仪对微球粒径进行了表征,用透射电子显微镜对微球的形貌进行了观察。结果表明:在泊洛沙姆188质量分数为1.0%,α-氰基丙烯酸异丁酯体积分数为0.8%,体系pH为2.5条件下反应3 h可得粒径140 nm左右的微球。所得微球形貌规整,表面光滑,粒径分布均匀。     

缓释微球乙型肝炎疫苗的初步研究

目的　研制缓释微球乙型肝炎疫苗。方法　用聚－ＤＬ－乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ）为材料,包裹乙 型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）,制成缓释微球疫苗。微球的粒径均小于５ｕｍ,平均粒径为２．１７ｕｍ,抗原包裹量为１．２５％, 包裹率为６０－８０％。用 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测抗原,以微球疫苗免疫 ＢＡＬＢ／ｃ。小鼠。结果 ＨＢｓＡｇ的结构包裹前后是一致 的,小鼠经皮下注射单剂微球疫苗后,在第 １４ｗ,小鼠血清 ＩｇＧ滴度可达到铝佐剂疫苗相当的水平,且维持较高的滴 度。结论采用生物可降解的缓释微球作为乙肝疫苗载体系统具有潜在的优势。