类细菌素产生菌LC47的选育及其代谢产物的初步研究

采用纸片法初筛和杯碟法复筛自黄水中分离出一株类细菌素产生菌LC47，经鉴定为布氏乳杆菌（Lactobacillus buctmeri）。在排除酸性末端产物及过氧化氢的干扰后，LC47菌株发酵液对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）等革兰氏阳性菌、大肠杆菌（Eschenchia coli）和铜绿假单胞菌（Pseudomonas pyocyanea）等革兰氏阴性菌、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）和某些真菌有强烈的抑制作用。经紫外线照射（UV）和硫酸二乙酯（DES）多轮复合诱变，LC47发酵液相对效价较未诱变前提高了216％，且具有良好的传代稳定性。通过对该菌株产类细菌素发酵条件的研究发现，以2％麦芽糖为碳源、1％大豆蛋白胨＋0．5％酵母粉为氮源，培养温度37℃，起始pH6．0～6．5，接种量1％，厌氧条件下培养48h，有微量0、Mg2^＋NH4^＋和Mn^2＋等金属离子存在，LC47所产类细菌素的抑菌活性最高。     

类细菌素高产菌YCF10的诱变选育及发酵条件的研究

以布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)CF10为出发菌株，经紫外线照射(UV)和硫酸二乙酯(DES)多轮复合诱变，获得一株高产类细菌素的目的菌YCF10，发酵液相对效价较未诱变前提高了136％，且具有良好的传代稳定性。通过对该菌株产类细菌素发酵条件的研究发现，以2％麦芽糖为碳源、1％大豆蛋白胨加0．5％酵母粉为氮源，加微量K^ ，Mg^2 和Mn^2 等金属离子，培养温度37℃，初始pH6．0～6．5，接种量1％，厌氧条件下，培养时间48h，YCF10所产类细菌素的抑菌活性最高。     

类细菌素产生菌的筛选及发酵条件的研究

用滤纸片法从酒糟与黄水中初筛得到150株抗菌物质产生菌，再用杯碟法复筛得到一株类细菌素产生菌LL18-4，经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。LL18—4产类细菌素最适条件为：以1％葡萄糖为碳源，2％牛肉膏为氮源，1％酒糟浸出液为生长因子，培养基初始pH6．5，37℃静置培养96h，最适条件下效价为164u／mL。对该类细菌素生物学特性进行初步研究，该类细菌素对蛋白酶K敏感，酸性条件下热稳定性强，中性或碱性条件下不具备热稳定性，抑菌活性pH范围是5．5-7．5。     

类细菌素高产菌CF10的筛选诱变及发酵条件的研究

采用纸片法初筛和杯碟法复筛自黄水中分离出一株抗生物质产生菌CF10,经鉴定为布氏乳杆菌(Lactobacillusbuchneri)。在排除酸性末端产物及过氧化氢的干扰后,CF10菌株发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)等革兰氏阳性菌、大肠杆菌(Escherichiacoli)和绿脓杆菌(Pseudomonaspyocyanea)等革兰氏阴性菌、K酵母(SaccharomycescerevisiaeK)和某些真菌有强烈的抑制作用。经紫外线照射(UV)和硫酸二乙酯(DES)多轮复合诱变,CF10发酵液相对效价较未诱变前提高了258%且具有良好的传代稳定性。通过对该菌株产类细菌素发酵条件的研究发现,以2%麦芽糖为碳源、1%大豆蛋白胨加0.5%酵母粉为氮源,培养温度37℃,初始pH6.0～6.5,培养时间48h,接种量1%,厌氧条件下,有微量K+、Mg2+和Mn2+等金属离子存在,CF10所产类细菌素的抑菌活性最高。     

瑞士乳杆菌AJT产细菌素的发酵条件优化

瑞士乳杆菌AJT是一株广谱抗菌活性菌株,对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌和真菌均有较好的抑制作用。通过优化试验确定其最优的培养基成分为:乳糖15.0 g/L、酵母浸出粉7.0 g/L、胰蛋白胨6.0 g/L、牛肉浸膏12.0 g/L、乙酸钠7.0g/L、柠檬酸钠7.0 g/L、磷酸氢二钾2.0 g/L、硫酸镁200 mg/L、硫酸锰40 mg/L,吐温-80 1.0 g/L,起始pH6.5;最佳培养条件:接种量2.0%,37℃培养20 h。与未优化发酵条件相比,粗提取的瑞士乳杆菌AJT细菌素对蜡状芽孢杆菌的抗菌活性提高了53.8%,对黄色镰孢的抗菌活性提高了41.5%,对大肠杆菌的抗菌活性提高了68%。     

乳酸杆菌SD-22产类细菌素发酵条件的优化

为了获得最大量的类细菌素.通过单因素和正交试验优化乳酸杆茵SD-22产类细菌素的营养条件和环境条件.结果表明:产类细菌素的最佳培养条件为30℃厌氧培养48h.培养基初始pH6.5,接种量1%,种龄12h.培养基组分的最佳组合为大豆蛋白胨15 g、酵母粉15 g、牛肉膏5 g、葡萄糖2g、K2HPO4 2 g、柠檬酸氢二铵2 g、乙酸钠5 g、MgSO4·7H20 0.58 g、MnSO4·4H2O.0.25 g、吐温-80 2mL,用蒸馏水定客至1 000 mL.在此条件下培养乳杆茵SD-22,抑茵圈直径可达20.12mm.     

乳杆菌产细菌素的发酵条件及其抑菌谱的研究

本研究以从内蒙古地区传统谷物发酵食品-酸粥中筛选出的产细菌素的乳杆菌为对象,对其产细菌素的发酵条件进行优化,并确定其抑菌谱。结果表明乳杆菌SZL-1的最佳发酵条件为：接种量7%,培养基起始pH 6.0,发酵时间24h,培养温度37℃。乳杆菌SZL-1产生的细菌素抑菌谱较广,对大多数革兰氏阴性和革兰氏阳性菌都有抑菌作用,但对酵母菌无抑菌作用。     

乳酸乳球菌L9产类细菌素lactococcin GJ-9发酵条件的研究

对产类细菌素乳酸乳球菌L9的发酵条件进行了研究。结果表明 :产类细菌素最适培养基为MRS,培养基的最适初始pH值为 6 5 ;产类细菌素最适温度为 32℃ ;0 2 %Tween 80最适类细菌素的产生。并通过正交试验确定L9产类细菌素的最佳培养基为 :大豆蛋白胨 1 %、酵母膏1 5%、葡萄糖 1 2 5 %、K2 HPO40 2 %、NaAc 0 5 %、MgSO4·7H2 O 0 0 58%、柠檬酸三铵 0 2 %、MnSO4·4H2 O 0 0 0 5 %、Tween 80 0 2 % ;初始 pH6 0。经过优化 ,发酵液效价提高了 61 0 7%。     

产类细菌素乳酸菌筛选及类细菌素的特性

从泡菜中分离到一株产生类细菌素的乳酸菌,通过双层平板扩散试验测试这种类细菌素的抑菌活性,并且研究其部分生物学特性.经形态特征、生理生化特征和API试剂条鉴定,该菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).产生的类细菌素对所试菌株具有明显的抑制作用,排除有机酸、过氧化氢和糖类的干扰后,仍有抑菌活性.这种类细菌素对热、酸碱稳定,微量的K+,Mn2+,Mg2+能增强其抑菌活性,Fe2+和Cu2+能减弱活性;可被4种蛋白酶失活,表明这种类细菌素是一种蛋白质活性物质.该类细菌素的作用方式是杀菌,抑菌谱广,可抑制多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌的生长.     

植物乳酸菌类细菌素特性研究及其产生条件的优化

通过单因素实验和正交实验优化了乳酸菌产乳酸菌素的培养条件并分析了其特性。结果表明：植物性乳酸杆菌生长的最佳培养条件组合是温度30℃,培养基初始pH为6.0,接种量4%,种龄12h,厌氧条件下,培养时间40h;乳酸菌菌素对革兰氏阴性菌和酵母菌的抑菌作用最大的最佳培养条件组合是温度28℃,培养基初始pH为7.0,接种量2%,种龄10h,厌氧条件下,培养时间24h。乳酸菌菌素革兰氏阳性菌的抑菌作用最大的最佳培养条件组合是温度28℃,培养基初始pH为6.5,接种量1%,种龄6h,厌氧条件下,培养时间40h。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,该乳酸菌发酵液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌等革兰氏阴性菌具有较好的抑制作用,而且对部分真菌也有抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后发酵液抑菌活性略有下降,表明乳酸菌素为非蛋白成分或起抑菌作用的非单一物质。它具有很好的热稳定性,在酸性条件下稳定且活性高,对蛋白酶敏感性低,且具有较广的抑菌谱。     

1株乳酸菌所产类细菌素Lactobacillin SD-22的初步研究

自泡菜中分离的329株乳酸菌中筛选出1株具有较广抑菌活性的菌株SD-22,经鉴定为短乳杆菌(Lac- tobacillus brevis)。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,SD-22菌株发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus),枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)等革兰氏阳性菌和大肠杆菌(Esche- richia coli),鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimuniuns)等革兰氏阴性菌具有较好的抑制作用,而且对部分真菌也有抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性略有下降,表明该活性物质为非蛋白成分或起抑菌作用的非单一物质。该活性物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为LactobacillinSD-22。它具有很好的热稳定性,在酸性条件下稳定且活性高,对蛋白酶敏感性低,且具有较广的抗菌谱。     

固定枯草芽孢杆菌发酵生产类细菌素的研究

以海藻酸钙为材料,固定枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)LL18-4,研究了不同条件下类细菌素效价的变化情况。结果表明,利用3%海藻酸钠在2%CaCl2条件下,得到固定化细胞颗粒的类细菌素效价和稳定性较好,可维持216h无破裂;对其固定化颗粒进行发酵条件的研究发现,培养温度37℃,pH值6.5,接种量1%,72h静止培养,固定菌所产类细菌素的抑菌活性高,最高效价为334.2u/mL。通过216h3批次循环的半连续培养后,固定菌活性仍能维持在260.9u/mL以上。     

嗜酸乳杆菌产类细菌素Lactobacillin NX2-6的初步研究

从内蒙古传统乳制品酸马奶中筛选出1株产生具有广谱抑菌活性物质的嗜酸乳杆菌NX2-6。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,菌株NX2-6所产生的类细菌素对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等革兰氏阴性菌及米曲霉等真菌具有较强的抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性明显下降,但仍具有较强的抑菌活性,对α-胰凝乳蛋白酶抗菌活性没有显著变化,因此表明该抗菌活性物质为蛋白类物质或非单一物质。在酸性条件下它具有很好的热稳定性,pH2.0时活性最强,中性或碱性条件下不具有抗菌活性,抑菌活性pH值范围在2.0-5.0。此抗菌物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为Lactobacillin NX2-6。菌株NX2-6产物在生防、食品具有潜在的应用价值。     

戊糖乳杆菌S1-4产抑菌物质发酵条件的优化及其抑菌谱

通过单因素及正交试验对戊糖乳杆菌S1-4产抑菌物质的发酵条件进行了优化,并其对敏感菌株的抑菌效果进行了探讨。结果表明,戊糖乳杆菌S1-4产抑菌物质的最佳培养条件为：接种量2.0%,培养基初始pH 5.5,32 ℃培养26 h,其抑菌圈平均直径可达（30.08±0.69） mm,优化前其抑菌圈平均直径为（24.41±0.25）mm,优化后抑菌活性提高了0.23 倍。菌株S1-4所产抑菌物质对所试12 种G＋和G－致病菌的生长都起到抑制作用,呈现出较广谱的抑菌特性。因此,菌株S1-4具有可作为食品生物防腐剂的潜在应用价值。     

瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性条件的优化

本实验探讨了发酵条件对瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性的影响。在单因素试验的基础上,进行正交试验,得出能产生较高抗ACE活性的最佳工艺条件是:发酵温度为37℃,发酵时间为12h,无脂乳固形物浓度12%(W/V)。     

L-亮氨酸产生菌的选育及其发酵条件优化

以黄色短杆菌TQ980 6(Met- +IleL+2 TAr+α ABr+β HLr+SGr+Rifr3 0 0 μg/mL)为出发菌株 ,经硫酸二乙酯、紫外线分别与LiCl复合诱变 ,选育出一株利福平抗性为 80 0 μg/mL的L 亮氨酸产生菌TK0 3 0 3。通过对其摇瓶发酵条件的研究和优化 ,产量由出发菌株TQ980 6的 2 2 7g/L提高至目的突变株TK0 3 0 3的 2 8 3g/L。     

木聚糖酶合成菌株的筛选及其产酶条件的研究

为得到产高酶活木聚糖酶的生产菌株,以黑曲霉A3为出发菌,经紫外线亚硝酸复合诱变处理,使所产木聚糖酶酶活由原来的9．1829U／ml增加到15．2144U／ml。实验通过发酵培养时间,碳源含量,接菌量对液体发酵产木聚糖酶的影响分析,得出产木聚糖酶的最优条件,即在加入50 Mandels液体培养基,28℃条件下,底物含量为0．045g,接种量为20ml,培养36h。