SPR生物传感器高通量检测多种食源性 致病菌的研究

目的 建立一种基于表面等离子共振技术 (Surface Plasmon Resonance technology,SPR)原理的生物传感器方法,实现11种常见致病菌的高通量检测。方法 用表面自组装技术(self-assembled monolayer,SAM)在金膜表面引入羧基,然后通过氨-羧基反应将5’端标记有氨基的探针固定在芯片表面,经多重PCR扩增出的产物变性、杂交、生物素-亲和素系统信号放大等步骤完成目的片段的检测。对所建立的多重PCR-SPR检测方法的灵敏性、特异性等技术指标进行评价。 结果 本研究建立的多重PCR-SPR检测方法具有良好的灵敏性,该芯片检测11种常见致病菌的灵敏性均达到103~104,能满足现有检测要求。通过对实验室保存的14株标准菌株和沙门氏菌等90份样品分离株进行检测,结果显示该检测方法具有较好的特异性,无交叉反应。结论 本研究建立的多重PCR-SPR 检测系统具有良好的灵敏性和特异性,完全适用于11种致病菌的高通量检测。该检测方法检测时间短、检测成本低、减少了人为因素的影响,具有良好的应用前景。     

SPR生物传感器快速检测沙门氏菌研究初探

使用集成化手持式SpreetaTM SPR传感器快速检测沙门氏菌,利用亲和素-生物素系统保证检测的准确性;利用沙门氏菌抗体的免疫吸附反应,保证结果的特异性;并引入复合抗体作为第二抗体以扩大检测的响应信号,检测到鼠伤寒沙门氏菌的浓度为105cfu/mL,整个检测过程在1h内完成,从一定程度实现了食品中病原微生物的快速检测。     

表面等离子体共振技术在农药残留检测研究中的应用

表面等离子共振(SPR)技术具有灵敏度高、操作简单、能够实时监测反应的动态过程,只需对样品进行简单的预处理,无需进行标记,也可以无需纯化各种生物组分,耗样量少,检测时间短,已被广泛应用于各个研究领域。该技术不仅可以检测分析物,而且可以测定分子间相互作用的动力学常数。目前,SPR在检测食品和环境领域中的农药残留做了大量的研究工作。本文简单介绍SPR的基本原理以及SPR生物传感器的类型,重点综述SPR生物传感器应用于农药检测中传感芯片的识别分子种类,检测方法以及目前SPR检测农药的研究现状,最后对SPR生物传感器应用于农药检测领域的发展前景作出展望。     

SPR技术检测奶粉中生物素

目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中生物素的方法。方法将生物素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的生物素结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的生物素,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standarddeviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为8.75%,该方法的检测限为0.1μg/100g,回收率为80.4%~91.2%。10个牛奶产品中生物素含量全部在固定的允许范围内。所建立的方法可以在4 h内完成样品的前处理和检测。结论该方法是一种简便、快捷的定量检测方法。     

SPR技术对奶粉中维生素B12检测方法的建立

目的 利用表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)技术, 建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法 将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面, 并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化, 检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12, 利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线, 并对市售10个奶粉样品进行检测。结果 制备的芯片稳定, 50个循环相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%, 该方法的检测限为0.006 μg/100 g, 回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论 所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测, 是一种简便、快捷的定量检测方法。     

SPR技术对奶粉中维生素B_(12)检测方法的建立

目的利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术,建立快速定量测定牛奶中维生素B12的方法。方法将钴胺素共价偶联到表面等离子共振芯片CM5表面,并对竞争结合的维生素B12结合蛋白的结合浓度及芯片的再生条件进行优化,检测芯片的稳定性。在无抗生素牛奶中添加系列质量浓度的维生素B12,利用免疫竞争抑制原理构建标准曲线,并对市售10个奶粉样品进行检测。结果制备的芯片稳定,50个循环相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10%。日间批内同一样品差异为0.54%,该方法的检测限为0.006μg/100 g,回收率为92.1%~104.1%。测得的10个牛奶产品中维生素B12含量与对应商品标签值全部在标准规定的范围内。结论所建立的方法可以在6 h内完成样品的前处理和检测,是一种简便、快捷的定量检测方法。     

SPR生物传感器高通量检测多种食源性致病菌的研究

目的建立一种基于表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance technology,SPR)原理的生物传感器方法 ,实现11种常见致病菌的高通量检测。方法用表面自组装技术(self-assembled monolayer,SAM)在金膜表面引入羧基,然后通过氨-羧基反应将5’端标记有氨基的探针固定在芯片表面,经多重PCR扩增出的产物变性、杂交、生物素-亲和素系统信号放大等步骤完成目的片段的检测。对所建立的多重PCR-SPR检测方法的灵敏性、特异性等技术指标进行评价。结果本研究建立的多重PCR-SPR检测方法具有良好的灵敏性,该芯片检测11种常见致病菌的灵敏性均达到103~104cfu/m L,能满足现有检测要求。通过对实验室保存的14株标准菌株和沙门氏菌等90份样品分离株进行检测,结果显示该检测方法具有较好的特异性,无交叉反应。结论 本研究建立的多重PCR-SPR检测系统具有良好的灵敏性和特异性,完全适用于11种致病菌的高通量检测。该检测方法检测时间短、检测成本低、减少了人为因素的影响,具有良好的应用前景。     

表面等离子共振法传感器快速检测农药残留的研究进展

为确保农产品质量安全, 发展高灵敏检测技术对农药残留进行检测尤为重要。本文简要介绍了表面等离子共振(surface plasmon resonance, SPR)传感器的原理和增强SPR检测灵敏度的方法, 重点综述了国内外应用SPR传感器检测农药残留的研究现状, 分析了SPR检测农药残留的优势和发展趋势。     

基于SPR技术的磺胺二甲氧嘧啶高灵敏检测

磺胺类药物的过量使用会对人体造成过敏性反应,并可能具有致癌性,而磺胺二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine,SDM)在食品中磺胺类药物的使用中占有很大的比例,因此基于表面等离子体共振(Surface plasmon resonance,SPR)技术建立了奶粉样品中SDM的快速、高灵敏检测方法。通过待测样品与SPR芯片表面修饰的SDM抗体分子特异性识别引起金膜表面折射率变化,进而导致SPR角的变化以实现检测。建立SPR响应信号和SDM浓度间的标准曲线,最低检测限达到0.19 ng/m L,奶粉样品添加回收率在94.0%~98.3%。和传统方法相比,SPR技术具有较高的灵敏度、准确性且操作简便,SPR传感芯片完整性好且可重复用于实际样品检测中。     

基于DMSA自组装单分子层的SPR免疫传感器检测沙丁胺醇

本文通过双巯基丁二酸(DMSA)作为单分子层连接表面等离子体共振(SPR)免疫传感器中芯片上的抗原,并以沙丁胺醇(SAL)为检测模型,构建了DMSA-SPR免疫传感器,将其检测效果与传统的巯基丙酸(MPA)-SPR传感器进行比较。结果表明,室温下,DMSA-SPR免疫传感器的抗原抗体识别效率增强近一倍,其线性范围达到5~150 ng/mL,定量限(LOQ)达到5 ng/mL。此传感器应用于猪肉中SAL检测的回收率达到94.9%~108.0%,并与超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS/MS)检测结果具有很好的相关性。因此,该方法为提高SPR免疫传感器的灵敏度提供了新思路、新方法,并可广泛应用于其他小分子的检测。     

利用表面离子共振系统检测三种禽流感病毒 亚型的研究

目的 利用表面离子共振系统建立检测H5、H7、H9三种亚型禽流感病毒的方法。方法 取原核表达的H5、H7、H9亚型的血凝素HA蛋白偶联于CM5芯片上, 利用HBS缓冲液梯度稀释病毒参考抗原并分别与固定浓度的三种亚型的禽流感抗血清进行反应, 采用竞争法制备标准曲线并用以计算样品的浓度和确立检测灵敏度低限。对不同亚型之间及五种其他常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果 建立的表面离子共振方法在检测各亚型时相互之间无交叉反应, 未检测到其他禽源病毒的阳性响应信号, HA重组蛋白的检测极限可达0.5 μg/mL。结论 研究表明该方法可用于同步鉴别主要流行的禽流感病毒亚型。     

利用表面离子共振系统检测三种禽流感病毒亚型的研究

目的利用表面离子共振系统建立检测H5、H7、H9三种亚型禽流感病毒的方法。方法取原核表达的H5、H7、H9亚型的血凝素HA蛋白偶联于CM5芯片上,利用HBS缓冲液梯度稀释病毒参考抗原并分别与固定浓度的三种亚型的禽流感抗血清进行反应,采用竞争法制备标准曲线并用以计算样品的浓度和确立检测灵敏度低限。对不同亚型之间及五种其他常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果建立的表面离子共振方法在检测各亚型时相互之间无交叉反应,未检测到其他禽源病毒的阳性响应信号,HA重组蛋白的检测极限可达0.5μg/m L。结论研究表明该方法可用于同步鉴别主要流行的禽流感病毒亚型。     

印染CAD系统输入、输出设备分辨率的选择

本文结合印染工艺要求，介绍选择ＣＡＤ系统分辨率的一般原则，对系统的正确使用操作有指导意义。     

基于电子鼻系统的粮食霉变检测方法研究

粮食霉变是食品质量安全领域不容忽视的问题.本文研制出一套能快速检测粮食霉变程度的电子鼻系统.该系统主要包括数据采集、调理与传输单元,传感器阵列和气室以及供气动力装置三大部分.使用该系统连续7d检测红皮花生、养麦、大米、燕麦4种粮食的霉变程度,以随机共振方法处理实验数据,通过信噪比谱特征信息量化粮食霉变程度,较好地反映了粮食霉变的过程.该方法可以克服传感器基线漂移的不利影响,快速、准确地检测粮食霉变过程中的气味挥发物,并监测粮食霉变程度,应用前景较好.     

基于间接竞争法的表面等离子共振免疫传感技术检测雌二醇

建立一种基于间接竞争法的表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)免疫传感技术检测雌二醇(estradiol,E_2),这种方法无需标记,可以实时监测竞争过程。在间接竞争实验中,E_2和E_2的单克隆抗体(monoclonal antibody,E_2-m Ab)等体积混合后共同竞争被固定在了SPR传感器的芯片表面的E_2-牛血清白蛋白包被原(E_2-bovine serum albumin,E_2-BSA),SPR产生的信号和E_2的质量浓度呈反比。优化实验参数如抗体质量浓度、再生次数等,最后再用全脂牛奶做E_2的加标实验。实验的线性范围为15.63~500 ng/m L,最低检出限为11.13 ng/m L。本研究的SPR免疫传感技术构建了一种通用的方法,可以用来无标记检测其他不同的小分子。     

利用捕获法建立筛选鸭坦布苏病毒适配单抗的 表面离子共振方法

目的以表面离子共振(surface plasmon resonance,SPR)系统为技术平台,利用捕获法建立检测鸭坦布苏病毒适配单抗的SPR方法,并对抗坦布苏病毒单克隆抗体的亲和力及抗原抗体结合的动力学进行研究。方法将鼠抗抗体偶联于CM5芯片上,采用Kinetics程序将HBS缓冲液梯度稀释的不同浓度的单克隆抗体进行捕获反应,拟合解离曲线计算不同单抗的K_D值并确立检测灵敏度低限并对其他不同亚型及5种常见禽类病毒抗体进行特异性检测试验。结果测得3株单抗的K_D值分别为1.50×10~(-13)、1.16×10~(-11)、7.85×10~(-12),建立的表面离子共振方法在检测其他禽源病毒时无阳性响应信号,坦布苏重组E蛋白的检测极限达0.625nmol/L。结论该方法可用于快速筛选检测坦布苏病毒的稳定适配单抗,并可有效获知其亲和力数据,为大规模推广建立免疫筛查方法奠定基础。     

基于分子印迹的表面等离子共振传感器在食品安全检测中的应用

分子印迹聚合物与表面等离子共振传感器相结合,可用于分子间相互作用和结合特性的研究。该文综述基于分子印迹的表面等离子共振传感器的原理和技术优势,总结食品中农兽药残留、生物毒素以及其他污染物检测的最新研究进展,展望其在食品安全检测中的发展前景,为其开发和应用提供研究思路和理论参考。     

棉花中异性纤维的图像多分辨率差分检测方法

针对棉花异性纤维难以检测的问题,提出了一种基于多分辨率尺度图像差分的检测方法。首先,通过小波多层分解实现检测图像中的不同频率信息成份的分离;然后,对不同分辨率的子图之间进行差分提高异性纤维与原棉信息的对比度;在此基础上,采用最大类间方差法对多分辨率差分子图进行二值化分割出异性纤维的信息;最后,通过对分割后的子图进行信息的融合,实现了对异性纤维检测。实验表明,该方法能够有效抑制棉花背景信息,最大限度的提取异性纤维的信息,异性纤维检测的准确率以上达到90%。     

利用表面等离子谐振生物传感器检测磺胺二甲嘧啶的方法研究

动物源性食品中的兽药残留对人类的健康具有潜在的危害。这项研究利用SPR生物传感器免疫法检测磺胺二甲嘧啶。实验对抗原在芯片表面的固定条件以及抗体的浓度进行了优化,实验中所构建的标准曲线的检测限(LOD)约为0.7ng/ml,检测范围为0.7～10ng/ml。对抗体的特异性和稳定性进行了研究。SPR-2004传感器为中国科学院电子学研究所自行研制的生化分析仪,为单通道双参数型,可以通过使用参照表面来消除折射率和基质效应的影响,从而提高数据的准确性,并缩短检测时间。     

适配体调控高SERS活性金纳米检测多菌灵

利用柠檬酸三钠还原氯金酸(HAuCl4)制备具有较高表面增强拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering,SERS)活性的金纳米(gold nanoparticles,AuNPs)溶胶作为基底,结合适配体与靶向物质特异性结合的性质,建立一个稳定性和重现性好的检测靶物质多菌灵(carben...