4-卤代苯甲酸对马铃薯多酚氧化酶的抑制效应

马铃薯在储存和加工过程中易褐变,本实验研究了3种4-卤代苯甲酸（4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸）对褐变中的关键酶——多酚氧化酶活性的抑制作用。实验表明,4-氟代苯甲酸、4-氯代苯甲酸、4-溴代苯甲酸对该酶均有明显的抑制作用,测得使该酶活力下降50%所需的抑制剂浓度（IC50）分别为0.635、0.370、0.300mmol/L。抑制动力学实验表明这三种4-卤代苯甲酸对该酶均表现为可逆的非竞争性抑制作用,其抑制常数分别为0.632、0.365、0.303mmol/L。随着卤族元素分子量的增大,对酶的空间位阻增强,导致抑制效率的显著增强。     

马铃薯中多酚氧化酶酶学特性的研究

以马铃薯为供试原料提取多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO),以邻苯二酚为底物,采用分光光度法确定其最佳波长为420 nm;研究温度、pH值、底物浓度和加热时间对该酶活性的影响,探讨了抗坏血酸、柠檬酸、氯化钙、EDTA-Na 4种抑制剂对马铃薯酶促褐变的抑制效果.结果表明:该酶的最适温度30℃,最适pH值为5.5,最适底物浓度0.05mol/L,90℃加热处理80 s时,该酶已基本失活.4种抑制剂对该酶均表现出一定的抑制效果,其中抗坏血酸的抑制效果最好,抑制效果强弱次序为抗坏血酸＞氯化钙＞柠檬酸＞EDTA-Na.     

曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶的抑制作用和抑菌实验

采用酶动力学和Lineweaver-Burk双倒数法作图研究了曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶PPO的抑制作用和机理,并通过平板菌落实验研究了曲酸对果肉的抑菌效果。结果表明,曲酸对PPO酶活有很强的抑制作用,其IC50为0.297mmol/L,表现为可逆非竞争性抑制,解离常数Ki为0.296mmol/L;果肉经0.10%曲酸浸泡后6d内具有较好的抑菌效果。      

可溶态和膜结合态马铃薯多酚氧化酶的性质对比

以大西洋马铃薯为原料,制备可溶态(s PPO)和膜结合态(mPPO)多酚氧化酶,并对两种粗酶液的酶学性质进行研究。结果表明,s PPO最适反应温度为35℃,最适p H值为7,mPPO最适反应温度为30℃,最适pH值为7。以焦性没食子酸、邻苯二酚为底物时,sPPO的米氏常数(K_m)分别为10.04 mmol/L和24.00 mmol/L,最大反应速度(V_(max))值分别为443 U/(mL·min)和965U/(m L·min),mPPO的米氏常数(K_m)分别为4.98 mmol/L和48.04 mmol/L,最大反应速度(V_(max))值分别为299 U/(mL·min)和912U/(m L·min),且对焦性没食子酸的催化效果优于邻苯二酚。6种抑制剂对比发现,Na_2SO_3对sPPO活性的抑制效果最好,Vc对mPPO活性的抑制效果最好。sPPO和mPPO的酶学特性有一定的差异,对马铃薯制品加工过程中酶促褐变的控制具有指导意义。     

不同储藏时间马铃薯中多酚氧化酶特性的研究

本文以不同储藏时间的马铃薯为原料,采用分光光度法研究了热稳定性、pH值、温度、底物浓度、酶液浓度、抑制剂对多酚氧化酶活性的影响。结果表明：新旧马铃薯的PPO最适温度为20℃,最适pH值为6．0,最适底物为邻苯二酚;新旧马铃薯最适酶液浓度为0．5mL;新马铃薯最适底物浓度为0．1mol／L,旧马铃薯最适底物浓度为0．15mol／L：新旧马铃薯PPO的强抑制剂为抗坏血酸与柠檬酸。     

不同储藏时间马铃薯中多酚氧化酶特性的研究

本文以不同储藏时间的马铃薯为原料,采用分光光度法研究了热稳定性、pH值、温度、底物浓度、酶液浓度、抑制剂对多酚氧化酶活性的影响。结果表明：新旧马铃薯的PPO最适温度为20℃,最适pH值为6．0,最适底物为邻苯二酚;新旧马铃薯最适酶液浓度为0．5mL;新马铃薯最适底物浓度为0．1mol／L,旧马铃薯最适底物浓度为0．15mol／L：新旧马铃薯PPO的强抑制剂为抗坏血酸与柠檬酸。     

超高压对马铃薯多酚氧化酶和过氧化物酶的钝化研究

研究了超高压对马铃薯多酚氧化酶和过氧化物酶的影响。结果表明:超高压处理后的多酚氧化酶,过氧化物酶活力低于对照试样的活力,超高压对酶活有影响;保压时间30 min,100～200 MPa压力范围内,多酚氧化酶和过氧化物酶被激活,压力超过200 MPa时酶的活性下降;压力为400 MPa,随着时间的延长,多酚氧化酶和过氧化物酶活性都呈下降趋势;400 MPa,10 min条件下,pH在5.5～6.0之间时酶的活性最大;超高压对马铃薯多酚氧化酶钝化的最佳方案:pH 6.0,保压时间40 min,压力400 MPa,过氧化物酶钝化的最佳方案:pH 8.0,保压时间40 min,压力为400 MPa。     

马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性研究

采用分光光度法对马铃薯中多酚氧化酶的酶学特性进行了较深入系统的研究，其中包括酶活力，酶热稳定性以及pH，抑制剂对酶活性的影响。结果表明：多酚氧化酶的最适pH为6．6，最适温度为30℃，酶热失活遵循一级动力学原理，二巯基丙醇，亚硫酸钠，半胱氨酸，抗坏血酸对酶活性有较强的抑制作用。     

马铃薯多酚氧化酶酶学特性及热稳定性模型的研究

目的:研究马铃薯中多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）的部分酶学性质及热稳定性并拟合数学模型预测酶活变化过程。方法:采用紫外可见分光光度计测定马铃薯多酚氧化酶活力,利用Matlab软件拟合二元多项式热稳定性数学模型,SPSS软件对多项式模型回归分析。结果:马铃薯多酚氧化酶的最适pH为5.5,最适反应温度为40℃,最适底物浓度为8.33mmol/L,加工温度、时间与酶活残存率的函数关系为:Z=24.5439+6.1163X+3.4064Y-0.0269X2-0.2361XY-0.0351Y2-0.0002836X3+0.001326X2Y+0.0012XY2,其中R2=0.981,F=100.695,p<0.001。结论:二元三次多项式模型能够较准确的反映并预测马铃薯多酚氧化酶在热加工过程中酶活的变化趋势。      

超高压处理对紫甘薯中多酚氧化酶活力的影响

以济薯18号为原料,研究超高压结合温度处理对紫薯多酚氧化酶(PPO)活力的影响。实验压力范围100～600MPa,温度20～60℃。结果表明:在温度30℃、保压时间10min的条件下,压力在100～600MPa范围内,500MPa时紫薯多酚氧化酶的活力最高,并且高于自然酶活力;在600MPa压力下,当温度小于30℃时,酶活力随温度上升而升高,大于30℃时,随温度升高酶活力下降。另外,酶活力随保压时间的延长而减小;但在300MPa时,前20min酶活力随保压时间延长而降低,20～50min内随时间延长而升高。因此,紫薯多酚氧化酶具有较好的耐压性。对紫薯进行温度、压力、保压时间的L9(34)正交试验结果表明:在600MPa、65℃条件下处理35min后,PPO活性最弱,抑制效果最佳。     

紫薯中多酚氧化酶活性的研究及褐变控制

研究紫薯组织中多酚氧化酶(PPO)的活性,最适pH值、最适温度等特性,并在此基础上,研究加热温度、加热时间、抗坏血酸和柠檬酸添加量对PPO褐变的抑制效果。结果表明：紫薯PPO最适pH值范围为5.5～7.5,最适温度为30℃。在较好的分离淀粉的前提下,最佳抑制褐变条件是：加热温度80℃、加热时间10min、抗坏血酸添加量0.9‰、柠檬酸添加量1.2g/L。     

超声波对多酚氧化酶酶活力的影响及其机理

以多酚氧化酶(PPO)为对象,研究不同超声波条件对PPO 酶活力的影响及其机理。结果表明：PPO 酶活力随着超声时间增加而降低,随着超声波功率增大先略增大然后逐渐降低;在超声波作用下PPO 的稳定温度和pH值分别为40℃和6.8;经超声波处理后的PPO,其动力学参数米氏常数Km 增大、最大反应速率Vmax 减小;PPO 二级结构中β- 转角相对减少。     

响应面优化可溶态和膜结合态马铃薯多酚氧化酶提取工艺

以大西洋马铃薯为原料,分别用柠檬酸-磷酸盐缓冲液浸提和超声波辅助Tris-HCl缓冲液浸提法提取马铃薯中可溶态(sPPO)和膜结合态(mPPO)多酚氧化酶,以酶比活力为评价指标,在单因素实验基础上,通过响应面对sPPO和mPPO的提取工艺进行优化。结果显示:sPPO最优提取工艺为料液比1:3.2、浸提时间12 h、缓冲液pH7.1,在该条件下测定sPPO比活力平均值为(130.5±2.4) U/mg,三个因素对sPPO提取的影响大小依次为:浸提时间>料液比>缓冲液pH。mPPO最优提取工艺为料液比1:5.2、浸提时间7 h、缓冲液pH6.7,在该条件下测定mPPO比活力平均值为(686.4±7.9) U/mg,三个因素对mPPO提取的影响大小依次为:超声时间>料液比>缓冲液pH。所得响应面模型可以很好地预测和分析sPPO和mPPO提取工艺条件。     

荔枝壳中多酚氧化酶活性研究

本文对荔枝壳中多酚氧化酶(PPO)的活性及不同抑制剂的抑制效果进行研究。结果表明:荔枝壳多酚氧化酶的最佳底物浓度为0.04mol/L,最适pH为7.0,最适温度为40℃;柠檬酸、抗坏血酸、硫代硫酸钠对PPO活性表现出较好的抑制效果,三种抑制剂联合作用的最佳条件为0.01mmol/L的柠檬酸+0.04mmol/L的抗坏血酸+0.004mmol/L的硫代硫酸钠,PPO活性的抑制率达85.8%。     

青蒿多酚氧化酶的酶学特性研究

以新鲜青蒿为材料,考察不同温度、pH值、底物浓度、激活剂、抑制剂对青蒿多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）活性的影响。结果表明：温度和pH值对酶活性的影响均存在一个最适值,分别为40 ℃和6.8;在一定底物浓度范围内,酶促反应速率随底物浓度的增加而增大,其米氏常数（Km）为0.015 4 mol/L,最大反应速率（Vmax）为125 U/min;MgC12、SDS对青蒿PPO活性有一定激活作用,当MgC12浓度为0.9 mmol/L、SDS浓度为8 mmol/L时,青蒿PPO活性分别高出对照组30.3%和45.3%;当VC质量浓度为0.03 g/L、柠檬酸质量浓度为1.2 g/L、PVP质量浓度为20 g/L时抑制率分别为70.4%、83.7%、77.6%;NaHSO3在0.01～0.08 mmol/L的浓度范围内对青蒿PPO抑制作用缓慢上升。