单糖基白头翁皂苷的分离纯化

用柱层析法在氯仿和甲醇液中对白头翁皂苷酶解产物进行分离纯化,得到1种单糖基皂苷和皂苷元.经薄层层析和高效液相色谱检测确定：单糖基皂苷为3-O-α-L-阿拉伯糖-3β,23-二烃基-Δ20（29）-羽扇豆烯-28-酸,其得率为5.1%.高效液相色谱检测结果显示所得纯品纯度可达95%以上.     

朱砂根皂苷的提取

报道了朱砂根皂苷的提取实验。朱砂根经乙醇浸泡得到朱砂根皂苷,大孔吸附树脂吸附皂苷,水及低浓度乙醇洗、除杂质,70%醇洗得朱砂根皂苷,其提取得率为5.19%。经薄层层析和高效液相色谱检测,得到的朱砂根皂苷中含有4个糖基的朱砂根皂苷,即3-o-[--βD-木糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖基-(1→5)-基;β-D-葡萄糖基-(1→2)-L-阿拉伯糖基]-朱砂根皂苷元。     

朱砂根皂苷的提取

报道了朱砂根皂苷的提取实验.朱砂根经乙醇浸泡得到朱砂根皂苷,大孔吸附树脂吸附皂苷,水及低浓度乙醇洗、除杂质,70%醇洗得朱砂根皂苷,其提取得率为5.19%.经薄层层析和高效液相色谱检测,得到的朱砂根皂苷中含有4个糖基的朱砂根皂苷,即3-o-[-β-D-木糖基-（1→2）-β-D-葡萄糖基-（1→5）-基;β-D-葡萄糖基-（1→2）-L-阿拉伯糖基]-朱砂根皂苷元.     

白头翁皂苷酶解产物的分离纯化

白头翁皂苷酶解产物经硅胶柱梯度洗脱分离纯化,通过白头翁皂苷酶解产物的第28碳糖基水解反应、TLC和HPLC实验确定:酶解产物Ⅰ为白头翁皂苷Ⅳ,即3 O α L 阿拉伯糖 3β,23 二烃基 Δ20(29) 羽扇豆烯 28 酸,其得率为4.08%;酶解产物Ⅱ为白头翁皂苷Ⅴ,即3 O α L 阿拉伯糖 3β,23 二烃基 Δ20(29) 羽扇豆烯 28 O 糖基酯苷,其得率为44%;没有反应的底物为白头翁皂苷Ⅲ,即3 O [α L 鼠李糖基(1→2) α L 阿拉伯糖基] 3β,23 二烃基 Δ20(29) 羽扇豆烯 28 O [α L 鼠李糖基(1→4) β D 葡萄糖基(1→6)] β D 葡萄糖酯苷,其得率为0.5%,酶解产物Ⅲ结构有待进一步测定。HPLC(高效液相色谱)检测结果显示所得纯品纯度可达95%以上。     

白头翁皂苷酶解产物的分离纯化

白头翁皂苷酶解产物经硅胶柱梯度洗脱分离纯化。通过白头翁皂苷酶解产物的第28碳糖基水解反应、TLC和HPLC实验确定：酶解产物Ⅰ为白头翁皂苷Ⅳ，即3-O-α-L-阿拉伯糖-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-酸，其得率为4．08％；酶解产物Ⅱ为白头翁皂苷Ⅴ，即3-O-α-L-阿拉伯糖-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-O-糖基酯苷，其得率为44％；没有反应的底物为白头翁皂苷Ⅲ，即3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖基]-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷，其得率为0．5％，酶解产物Ⅲ结构有待进-步测定。HPLC(高效液相色谱)检测结果显示所得纯品纯度可达95％以上。     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱),得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测,纯化的单体皂苷1为3 (O) (β D 吡喃葡萄糖基) 薯蓣皂苷,得率为样品的33.95%,用高效液相色谱法检测其纯度为93.82%。产物2的结构和特征有待进一步研究。     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法对穿山龙薯蓣皂苷酶解产物进行分离纯化(硅胶柱中以氯仿甲醇洗脱)，得到2种单体皂苷和皂苷元。经薄层层析检测，纯化的单体皂苷1为3-(O)-(β-D-吡喃葡萄糖基)-薯蓣皂苷，得率为样品的33．95％，用高效液相色谱法检测其纯度为93．82％。产物2的结构和特征有待进一步研究。     

穿山龙薯蓣皂苷酶解产物的分离纯化

用柱层析法分离纯化穿山龙薯蓣皂苷的酶解产物,硅胶柱中的流动相为氯仿与甲醇的不同比例,经硅胶柱分离得到薯蓣皂苷酶解产物的两种单体,为产物Ⅰ和产物Ⅱ,用薄层层析法和高效液相色谱法检测,得到产物Ⅰ为3-(O)-(-βD-吡喃葡萄糖基)-薯蓣皂苷元,得率为17.85%,纯度为69.41%。同时得到产物Ⅱ,得率为1.64%。产物2为反应副产物,其结构、性质及药理作用有待于进一步研究。     

发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

生物转化法制备白头翁皂苷A3

利用微生物酶法转化白头翁总皂苷,结合硅胶柱层析法和结晶法对酶产物进行分离,制备高活性的稀有白头翁皂苷A3。将1 000g中药白头翁经乙醇浸提3次,再经脱糖、脱色处理后共得总皂苷98.6g,得率为9.86%。采用微生物Absidiasp.P00r发酵产粗酶液,对50g总皂苷进行酶反应,酶解产物经脱糖、脱色处理后,得到含白头翁皂苷A3的粗产物34.2g。通过硅胶柱层析和结晶法对产物进行分离纯化,制备得到白头翁皂苷A3单体1.56g,得率为4.56%,HPLC检测其纯度为95.4%。     

柴胡皂苷酶解产物的分离纯化

柴胡皂苷酶解产物经硅胶柱梯度洗脱分离纯化,得到2种单体皂苷(洗脱剂为氯仿和甲醇)。经薄层层析检测,纯化的单体柴胡皂苷酶解产物Ⅰ结构推测为水解掉2个糖基的皂苷元,产物Ⅱ结构推测为水解掉1个糖基的皂苷,产物Ⅰ和产物Ⅱ得率分别为样品的20.25%、4.25%,用高效液相色谱法检测其纯度达90%以上。产物Ⅰ、Ⅱ的结构和性质有待进一步研究。     

酶法生产稀有人参皂甙及其产物成分的分析

通过实验研究从人参提取人参皂甙 ,用硅胶柱法分离人参二醇类皂甙。酶法改变人参二醇皂甙糖基 ,生产稀有人参皂甙 ,并分离提纯了其酶反应产物。结果表明 :酶反应产物中主要成分为人参皂甙Rh2 ,副产物为人参皂甙Rg3、Rg5、Rh1、Rh3、人参二醇类皂甙元 ;经硅胶柱分离酶解产物得到单体。也探讨了酶法产生各种稀有人参皂甙的机理 ,二醇类皂甙失去第 2 0碳上的糖基时 ,也会失去水分子 :Rh2生成的同时Rh2失去水分子变成Rh3皂甙 ;Rg3生成的同时 ,Rg3失去水分子变成Rg5皂甙     

酶法生产稀有人参皂甙及其产物成分的分析

通过实验研究从人参提取人参皂甙，用硅胶柱法分离人参二醇类皂甙。酶法改变人参二醇皂甙糖基，生产稀有人参皂甙，并分离提纯了其酶反应产物。结果表明：酶反应产物中主要成分为人参皂甙Rh2，副产物为人参皂甙Rg3、Rg5、Rh1、Rh3、人参二醇类皂甙元；经硅胶柱分离酶解产物得到单体。也探讨了酶法产生各种稀有人参皂甙的机理，二醇类皂甙失去第20碳上的糖基时，也会失去水分子：Rh2生成的同时Rh2失去水分子变成Rh3皂甙；Rh3生成的同时，Rg3失去水分子变成Rg5皂甙。     

把人参二醇类皂苷转化为Rg3的特种人参皂苷糖苷酶生成的细菌筛选

采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobacter sp.3、Rhodanobacter sp.14、Rhodopseudo-monas sp.18和Enterobacter sp.20菌进行了菌种筛选。其中Arthrobacter sp.3、Rhodopseudomonas sp.18和Enterobacter sp.20菌发酵生成把人参二醇类皂苷PPD转化为Rg3、Rh2和苷元的特殊人参皂苷糖苷酶,Arthrobacter sp.3菌发酵产酶速度相对快一些。Rhodanobacter sp.14发酵主要生成能把人参二醇类皂苷PPD转化为Rd的人参皂苷糖苷酶。Rhodanobacter sp.14发酵生成的人参皂苷糖苷酶对丙酮抗性较好,Arthrobacter sp.3、Rhodopseudomonas sp.18和Enterobacter sp.20菌所生成的人参皂苷糖苷酶对丙酮抗性略差。综合各因素,选取Arthrobacter sp.3为目标菌种。     

把人参二醇类皂苷转化为Rg3的特种人参皂苷糖苷酶生成的细菌筛选

采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobacter sp．3、Rhodanobacter sp．14、Rhodopseudomonas sp．18和Enterobacter sp．20菌进行了菌种筛选。其中Arthrobacter sp．3、Rhodopseudomonas sp.18和Enterobncter sp．20菌发酵生成把人参二醇类皂苷PPD转化为Rg3、Rh2和苷元的特殊人参皂苷糖苷酶，Arthrobacter sp．3菌发酵产酶速度相对快一些。Rhodanobacter sp．14发酵主要生成能把人参二醇类皂苷PPD转化为Rd的人参皂苷糖苷酶。Rhodanobacter sp．14发酵生成的人参皂苷糖苷酶对丙酮抗性较好，Arthrobacter sp．3、Rhodopseudomonas sp．18和Enterobacter sp．20菌所生成的人参皂苷糖苷酶对丙酮抗性略差。综合各因素，选取Arthrobacter sp．3为目标菌种。     

人参皂甙组分的分离方法

人参的主要活性成分人参皂甙有人参二醇类皂甙、人参三醇类皂甙和齐墩果酸皂甙３种，其中药物活性较高的微量皂甙Ｒｇ３可由人参二醇类皂甙转化而来。为得到人参二醇类皂甙，用硅胶柱法成功地从人参总皂甙中分离出三醇类皂甙、二醇类皂甙和齐墩果酸皂甙。３种洗脱剂对二醇类皂甙（含齐墩果酸）的收率为２３．５％、３５．３％和２５．６％。混合二醇类皂甙经水解再硅胶柱分离的方法可得到混合皂甙质量的３０％Ｒｇ３，使制取大量的Ｒ     

白头翁皂苷及其酶解产物的分离纯化

从白头翁中提取了皂苷作为酶反应底物,使用菌种Absidiasp.P00r产酶催化底物生成产物,使用硅胶柱层析分离纯化底物和产物。底物经体积比8.5∶1.5和8.3∶1.7的氯仿-甲醇洗脱液洗脱得到4种底物皂苷,得率分别为10.6%、13.8%、8.2%、15.3%,HPLC检测其纯度分别为83.94%、81.99%、80.18%、83.40%;产物经体积比8.5∶1.5的氯仿-甲醇洗脱液洗脱得到3种皂苷,得率分别为15.0%、7.1%、10.3%,HPLC检测其纯度分别为93.45%、91.28%、100.00%。