蛹虫草多糖对紫外线诱发蚕豆根尖细胞微核的影响

目的：研究蛹虫草多糖对紫外线诱发的蚕豆根尖细胞微核的影响。方法：采用蚕豆根尖细胞微核试验。结果：浓度为30、50、80、100μg/ml 的蛹虫草胞内、胞外多糖对蚕豆根尖微核率与阳性对照组相比均具有极显著差异(p ＜ 0.01),浓度为100μg/ml 的蛹虫草胞内、胞外多糖对根尖微核的抑制率分别为47.68%、43.04%。蛹虫草胞内、胞外多糖每种样品的不同浓度之间对微核的影响存在极显著的差异(p ＜ 0.01),且蚕豆微核率随多糖浓度的提高而降低。结论：蛹虫草胞内、胞外多糖均可有效抑制紫外线诱发的蚕豆根尖细胞微核的产生。     

虫草多糖对丝裂霉素诱发蚕豆根尖细胞微核的影响

目的:研究虫草多糖对丝裂霉素诱发的蚕豆根尖细胞微核的影响。方法:采用蚕豆根尖细胞微核试验。结果:浓度分别为100、80、50μg/ml的虫草胞内、胞外多糖对浓度为0.5μg/ml丝裂霉素诱发的蚕豆根尖微核率与阳性对照组(0.5μg/ml丝裂霉素)均具有极显著差异(p<0.01),虫草胞内、外多糖对微核的最大抑制率分别为60.48%、62.20%;浓度为30μg/ml的虫草胞内、外多糖对浓度为0.5μg/ml丝裂霉素诱发的蚕豆根尖微核率与阳性对照组(0.5μg/ml丝裂霉素)有显著的差异(p<0.05);四种浓度的胞内、外多糖之间对微核的影响至少存在显著的差异(p<0.05),且蚕豆根尖细胞微核率随多糖浓度的提高而降低。结论:虫草胞内、胞外多糖均可有效抑制丝裂霉素诱导的蚕豆根尖细胞微核的产生。     

蛹虫草水提液对Cu2+诱发蚕豆根尖微核率的影响

通过蚕豆根尖细胞微核实验,研究蛹虫草水提液对Cu2+诱发蚕豆根尖微核的影响。结果显示,当蛹虫草提取液浓度为5mg/mL以上时,对蚕豆根尖细胞自然诱导的微核产生有显著的抑制作用,对Cu2+诱导的蚕豆根尖细胞微核亦有显著的抑制作用,抑制率均可达50%以上。结论:蛹虫草水提液可有效地抑制蚕豆根尖细胞微核的产生,且抑制作用随着蛹虫草水提液浓度的增大而增强,表明蛹虫草水提取液具有抑制Cu2+遗传毒性的作用。本实验为蛹虫草作为功能性食品开发利用提供新的应用范围。     

蛹虫草水提液对Cu2+诱发蚕豆根尖微核率的影响

通过蚕豆根尖细胞微核实验,研究蛹虫草水提液对Cu2+诱发蚕豆根尖微核的影响。结果显示,当蛹虫草提取液浓度为5mg/mL以上时,对蚕豆根尖细胞自然诱导的微核产生有显著的抑制作用,对Cu2+诱导的蚕豆根尖细胞微核亦有显著的抑制作用,抑制率均可达50%以上。结论:蛹虫草水提液可有效地抑制蚕豆根尖细胞微核的产生,且抑制作用随着蛹虫草水提液浓度的增大而增强,表明蛹虫草水提取液具有抑制Cu2+遗传毒性的作用。本实验为蛹虫草作为功能性食品开发利用提供新的应用范围。      

蛹虫草胞外锌多糖抗氧化能力的研究

以蛹虫草为材料通过液体深层富锌培养获得胞外富锌多糖,测定了蛹虫草胞外富锌多糖的锌含量和抗氧化性能,即清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力。实验结果表明:蛹虫草富锌培养基内ZnSO4浓度在150μg/mL下,可以显著提高胞外锌多糖的有机锌含量(P<0.01),使有机锌含量达到0.87mg/g,比对照提高295%。有机锌对提高胞外锌多糖清除自由基的能力有显著的促进作用(P<0.01),清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力分别是对照的7.05%、23.5%和17.49%;胞外锌多糖对自由基的清除能力与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系(P<0.01)。     

蓝光对蛹虫草多糖含量的影响

蛹虫草菌种在两种不同的液体培养基(其中一种添加奶粉)中经摇发酵培养后,再在静置培养过程中以蓝光照射蛹虫草菌丝体,研究蓝光照射对其产生胞内和胞外多糖含量的影响。结果表明,在不含有奶粉的液体培养基表面生长蛹虫草菌丝体,其胞外多糖和胞内多糖含量受蓝光照射的影响而降低;而在培养基中加入奶粉以后,蓝光照射时也可降低胞内多糖的相对含量,但使蛹虫草胞外多糖含量稍有增加。     

蛹虫草子实体多糖抗突变作用

研究蛹虫草多糖(CMPS)对环磷酰胺(CTX)诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核形成率及染色体畸变率的影响,探讨其抗突变作用。采用微核实验和染色体畸变实验技术,镜下观察并计数。结果显示:CMPS三个剂量组小鼠微核抑制率分别为29.75%、36.20%、44.48%,抑制率随剂量增多呈增加趋势,各剂量组与环磷酰胺组比较,均有显著性差异(p<0.05);CMPS三个剂量组染色体畸变率分别为36.7%±5.46%、20.8%±3.52%、18.1%±3.28%,畸变率随CMPS剂量增多呈下降趋势。蛹虫草多糖可降低环磷酰胺诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率,具有抗突变活性。      

蛹虫草高产胞外虫草素和虫草多糖的诱变育种

通过诱变获得高产胞外虫草素和虫草多糖的蛹虫草菌株.采用紫外线诱变(UV)、化学诱变(LiCl)、复合诱变(UV-LiCl) 3种方式对蛹虫草孢子进行诱变;发酵检测存活菌株的胞外虫草素和虫草多糖的含量.结果:以胞外虫草素为指标,3种诱变方式的最大正突变率分别为化学突变(29.2％)＞紫外突变(28.6％)＞复合诱变(26.5％);以胞外多糖为指标,最大正突变率分别为紫外诱变(35.7％)＞复合诱变(33.3％)＞化学诱变(27.0％).紫外诱变突变株Z-5-1胞外虫草素产量达0.842g/L,比出发菌株高311％;紫外诱变突变株Z-4-7胞外虫草多糖产量达5.250g/L,比出发菌株高148％.在连续培养5代后,仍具有较好的遗传稳定性.紫外诱变能获得较高的蛹虫草正突变率,同时能获得高产虫草素、虫草多糖的突变株.     

虫草多糖对环磷酰胺诱导微核的抑制作用

研究了虫草胞内、胞外多糖对环磷酰胺诱导的蚕豆根尖细胞微核的影响,结果表明,虫草胞内、胞外多糖可有效抑制环磷酰胺诱导的蚕豆根尖细胞微核的产生,其抑制作用随着虫草胞内、外多糖浓度的增大而增强,当多糖浓度为100μg/mL时,环磷酰胺诱导的蚕豆根尖细胞微核率最低,分别为7.333‰和7.556‰;抑制率达到最高,分别为53.52%和52.11%。     

不同提取方法对蛹虫草多糖抗氧化性的影响

目的:明确沸水浴、超声波和微波提取方法对蛹虫草多糖提取得率和抗氧化性的影响。方法:用3种不同方法提取蛹虫草多糖,经醇沉、脱色、脱蛋白制成精多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量,用清除羟基自由基能力测定抗氧化性,并对测定结果进行比较。结果:当多糖浓度为1.0mg/mL时,沸水浴和微波提取多糖的抗氧化性分别为95.36%和97.11%,超声波较差,为74.46%。结论:利用微波提取的蛹虫草多糖具有很好的抗氧化性,而且提取时间短,提取得率较高。     

蛹虫草子实体多糖对腹水型肝癌移植瘤超微结构的影响

目的:研究蛹虫草多糖(CMPS)对小鼠移植型腹水型肝癌(H22)体内诱导肿瘤细胞凋亡作用,探讨其抑瘤作用机制。方法:建立H22移植瘤小鼠模型,采用电镜技术观察H22荷瘤小鼠肿瘤组织的超微结构改变;免疫组织化学法检测蛹虫草多糖作用后H22肿瘤组织细胞内P53蛋白的表达情况。结果:电镜观察到蛹虫草多糖作用后H22肿瘤组织细胞有早期凋亡改变,肿瘤组织内有凋亡细胞存在;免疫组化实验结果显示,蛹虫草多糖作用后H22小鼠肿瘤组织细胞突变型P53蛋白的表达水平降低。结论:蛹虫草多糖具有诱导小鼠H22肝癌细胞凋亡作用,促凋亡作用可能与其降低H22小鼠肿瘤组织细胞内突变型P53蛋白的表达有关。      

蛹虫草胞外多糖的提取纯化及免疫活性研究

目的提取纯化蛹虫草发酵液中的胞外多糖,初步研究其结构及免疫活性。方法乙醇沉淀多糖,用Sevag法除去蛋白质、透析法除去小分子物质,经CM-52纤维素柱层析后得纯品。用紫外光谱测定多糖纯度,用凝胶柱层析法测定相对分子质量,高效毛细管电泳和红外光谱分析其分子结构,检测胞外多糖对小鼠巨噬细胞系RAW264.7产生NO的影响。结果蛹虫草胞外多糖经脱蛋白、CM-52纤维素柱层析后可获得单一对称峰的纯多糖,相对分子质量为3.49&#215;10^4,含羟基、糖醛结构和羰基结构,单糖基之一为甘露糖。多糖可显著刺激巨噬细胞分泌NO,具有活化免疫细胞、增强机体免疫力的作用。结论该方法可获得高纯度蛹虫草胞外多糖,并证明它对巨噬细胞有活化作用。     

蛹虫草基质多糖纳米硒复合物的制备研究

以多糖为软模板,可以制备高效低毒的纳米硒-多糖复合物。本文以废弃的蛹虫草培养基质中提取的水溶性多糖为原料,研究了蛹虫草基质多糖纳米硒复合物的制备工艺及抗肿瘤活性。实验结果表明,在多糖浓度为10 mg/m L、亚硒酸浓度为0.4 mol/L、混合时间为4 h、滴加速度为1.5 r/min的条件下,可以制备出形貌理想、粒径适宜、稳定性良好的蛹虫草基质多糖纳米硒复合物。该复合物对Caco-2肿瘤细胞的生长具有一定抑制效果,且对细胞毒作用呈现出剂量依赖效应。      

不同固态培养基对蛹虫草子实体品质的影响

通过测定不同固态培养基培养蛹虫草子实体的生长情况,虫草素、虫草酸、虫草多糖含量,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率及2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基清除能力,研究不固态培养基对蛹虫草子实体品质的影响。结果表明,不同固体培养基培养蛹虫草子实体的活性物质与抗氧化活性差异显著（P＜0.05）,其中小米+麦麸培养基培养蛹虫草子实体的生长情况较佳,出芽时间最快,为12 d,子实体最长,为（6.50±0.15） cm,鲜质量最重,为（8.58±0.07） g,其虫草素和虫草酸含量最高,分别为（6.53±0.06） mg/g和（7.66±0.21） mg/g;薏仁米培养基培养蛹虫草子实体虫草多糖含量最高,为（59.07±1.89） mg/g,薏仁米＋麦麸培养基抗氧化活性最强,DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率分别为（66.84±0.77）%、（68.28±0.26）%。     

冬虫夏草与蛹虫草原生质体融合初探

采用正交设计和双灭活标记方法对冬虫夏草与蛹虫草进行原生质体融合研究,获得融合子。结果表明：最适融合条件为：40% PEG 与0.08mol/L Ca2+ 的混合溶液(pH7.0)助融,35℃融合20min,融合率为2.74 × 10-5;并用形态学、颉颃实验及分子生物学方法初步探讨了双亲和融合子三者之间的亲缘关系。     

一种蛹虫草多糖的结构特征及体外抗氧化活性

采用分子筛层析法从人工培养蛹虫草子实体中分离纯化得到一种多糖W-CBP80Ⅰ,进而分别采用凝胶渗透色谱（GPC）、气-质联用（GC-MS）、红外光谱（IR）、核磁共振(¹H NMR和¹³C NMR)研究其理化性质和结构特征。结果表明:W-CBP80Ⅰ含有α-糖苷键,并主要由甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成。它主要成分为低分子量多糖,分子量为8.93×10³。此外,W-CBP80Ⅰ具有体外清除DPPH,羟基和超氧阴离子自由基活性。