信号分子AI-2对长双歧杆菌BBMN68耐受胁迫能力的影响

双歧杆菌是一种广泛应用的益生菌,但是受到环境胁迫后,菌株活力大幅降低,影响菌株功能发挥,其中信号分子AI-2在益生菌耐受环境胁迫中发挥关键作用。文章研究了外源添加AI-2对双歧杆菌BBMN68耐受酸、胆盐及氧胁迫能力的影响。结果表明,外源添加AI-2可以显著提高BBMN68在p H4.0酸胁迫的存活率(P0.05),显著降低氧气的抑制作用(P0.05),对在0.1%浓度胆盐下的生长无显著影响(P0.05)。该研究表明,可以通过外源干预来提高长双歧杆菌的环境耐受能力。     

长双歧杆菌BBMN68寡糖利用预测与验证

长双歧杆菌BBMN68是来源于中国广西巴马长寿老人肠道的益生菌。本研究利用生物信息学技术分析该菌株寡糖糖苷水解酶基因,并利用生长试验及RT-PCR方法验证菌株对寡糖的利用。结果显示,该菌株具有多种糖苷水解酶基因,具有分解含半乳糖、葡萄糖、N-乙酰葡萄糖胺、N-乙酰半乳糖胺、果糖、甘露糖、阿拉伯糖和木糖单体的寡糖的潜质。生长试验表明,菌株可在低聚木糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚麦芽糖、低聚果糖中良好生长。RT-PCR试验结果表明,不同条件下,寡糖转运系统基因BBMN68_74,BBMN68_75,BBMN68_217与BBMN68_925等16个基因可被不同程度地诱导表达。     

长双歧杆菌BBMN68胞外多糖生物合成基因的克隆及生物信息学分析

目的:研究长双歧杆菌BBMN68胞外多糖生物合成途径和调控机制。方法:提取BBMN68胞外多糖,预测eps基因簇各基因编码蛋白功能,克隆关键基因并对其进行进化分析。结果:在CDM和MRSC培养基上,长双歧杆菌BBMN68产生胞外多糖,产量分别为100 mg/L和400 mg/L。本实验室工作人员对其进行全基因组序列测定。根据全基因组序列,分析得到eps基因簇,对该基因簇各基因编码蛋白的功能预测发现,BBMN68_1002编码1个可能具有多糖重复单元转运子功能的蛋白。BBMN68_1003、BBMN68_1006、BBMN68_1007和BMN68_1011与多糖重复单元聚合有关。BBMN68_1004、BBMN68_1008和BBMN68_1009参与糖基转移。BMN68_1010控制多糖分子链长。BBMN68_1012编码胞外多糖合成的关键酶——引导糖基转移酶(priming glycosyltransferase,Cps D),启动合成胞外多糖第1步。由Cps D基因构建的系统发育树,BBMN68与猿猴、狨猴及大猩猩的长双歧杆菌同枝,可能是饮食影响肠道细菌进化的结果。结论:本研究结果为解析长双歧杆菌BBMN68胞外多糖生物合成途径和调控机制奠定了理论基础。     

充氮包装和储藏温度对益生菌粉储藏稳定性的影响

考察了充氮包装和储藏温度对益生菌粉储藏稳定性的影响。将充氮和普通包装的动物双歧杆菌A6和长双歧杆菌BBMN68益生菌储藏于-20、4、25和37℃条件下12个月,检测其水分含量、水分活度及活菌数变化。结果表明,温度对益生菌粉稳定性影响较大,在冷冻和冷藏条件下,2种益生菌粉活菌数维持稳定,存活率均在85%以上,当储藏温度上升至常温及更高时,水分活度随着时间延长缓慢上升,而活菌数则下降较快,普通包装的A6和BBMN68益生菌粉在37℃储藏12个月益生菌存活率分别仅剩0.033%和0.013%,充氮包装的存活率分别为0.14%和0.094%,分别提升了4.2和7.2倍。所以益生菌粉最佳储藏条件是冷冻或冷藏,而充氮包装能够降低高温对稳定性的影响,特别是针对耐氧性较差的长双歧杆菌,作用效果更为显著。     

长双歧杆菌BBMN68微胶囊的制备及其应用性评价

长双歧杆菌BBMN68分离自广西巴马长寿老人粪便,已证明其具有双歧杆菌普遍的生理功能。为解决其不耐酸、不耐氧的缺点,本实验采用微胶囊包埋技术,以海藻酸钠、乳清蛋白以及VE为壁材,在氮气体系中采用挤压法包埋该双歧杆菌活菌体制备湿微胶囊和冻干微胶囊。结果表明：海藻酸钠、乳清蛋白和VE质量分数分别为2%、3%和10%条件下制备的湿微胶囊在酸奶中保存21 d仍能保持106 CFU/g以上的活菌数,耐胃酸实验2.0 h时活菌数仍高达3.16×107 CFU/g,肠溶实验中微胶囊在2.0 h实现完全崩解;海藻酸钠和乳清蛋白质量分数为2%和3%,氮气环境下制备的冻干微胶囊通过恒温加速实验测定可在室温条件下贮藏长达75 d。通过微胶囊包埋技术较好地解决了长双歧杆菌BBMN68不耐酸、不耐氧的缺点,同时也提供一种新型有效的补充肠道益生菌的形式。     

青春双歧杆菌的耐氧驯化及不同低聚糖对其增殖效果的影响

为改善青春双歧杆菌在发酵产品中活菌数低、菌种功效弱的情况,对厌氧青春双歧杆菌进行耐氧驯化,采用无氧有氧交替驯化法,在驯化过程中逐渐增加青春双歧杆菌培养液的氧分压,测定青春双歧杆菌驯化前后生理特性,并对比大豆低聚糖、低聚木糖、低聚麦芽糖对青春双歧杆菌增殖的影响。结果表明,青春双歧杆菌在耐氧驯化后对氧气的敏感程度下降,有氧条件下生长能力达标,产酸能力得到提升,菌体驯化前后形态基本一致,耐氧青春双歧杆菌代谢产生的乙酸与乳酸比值较厌氧青春双歧杆菌更适宜发酵,在3种低聚糖中,低聚木糖对青春双歧杆菌增殖作用明显,可作为青春双歧杆菌良好的双歧因子。耐氧驯化后的青春双歧杆菌有着优良的生理特性,能够作为潜在的益生菌菌种深入研究其功能并可应用于发酵食品中。     

长双歧杆菌BBMN68 对便秘模型小鼠的通便作用

目的：研究长双歧杆菌活菌BBMN68 活菌液对便秘模型小鼠的润肠通便作用。方法：将Balb/c 雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和3 个剂量的给药组。给药组分别经口给予低、中、高剂量(1 × 107、1 × 108、1 × 109CFU/mL)的长双歧杆菌BBMB68 活菌液0.1mL/(kg·d)(以体质量计);空白组和模型组给予0.1mL/(kg·d)的质量分数10% 的脱脂奶溶液;阳性对照组给予1 × 108CFU/mL 动物双歧杆菌菌悬液0.1mL/(kg·d)。用复方地芬诺酯制造小鼠便秘模型,建模后各组分别给药,观察各组小鼠的首次排黑便时间、5h 内排便粒数和质量,测定粪便含水量和小肠墨汁推进率。结果：长双歧杆菌BBMN68 给药7d,可明显改善便秘小鼠首次排黑便时间、增加排黑便粒数和质量;长双歧杆菌BBMN68 给药15d 可显著提高便秘小鼠小肠墨汁推进率。表明长双歧杆菌BBMN68 具有润肠通便功能。     

提高双歧杆菌耐氧性研究进展

双歧杆菌作为一类重要的益生菌,其菌体及代谢产物已广泛应用于食品和医药等领域.由于双歧杆菌自身缺少高效的活性氧清除机制,导致对氧敏感.在生产加工及储存过程中,双歧杆菌不可避免的遭受氧胁迫,为保持其高活性并发挥益生功效,增强双歧杆菌的耐氧性极其重要.本文重点介绍双歧杆菌的耐氧机制及近年来提高双歧杆菌耐氧性的各种策略,以期为...     

κ-酪蛋白酶解物对双歧杆菌的促生长效果研究

研究了κ-酪蛋白的碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、凝乳酶酶解产物以及商业化酪蛋白糖巨肽(GMP)对双歧杆菌(BBMN68和Bb12)的体外促生长作用。结果表明,κ-酪蛋白的碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、凝乳酶酶解产物以及GMP对两株双歧杆菌均有促生长作用,其中作用最强的是碱性蛋白酶酶解产物,显著高于木瓜蛋白酶酶解产物、凝乳酶酶解产物和GMP的作用效果(P<0.05),并且GMP与κ-酪蛋白凝乳酶酶解产物的促生长作用无显著性差异(P>0.05)。     

F6PPK酶法分析双歧杆菌类产品中双歧杆菌活菌数

果糖-6-磷酸磷酸酮解酶(F6PPK)是双歧杆菌属细菌所特有的糖类代谢的酶。对不同菌株F6PPK酶活力测定结果表明:F6PPK酶活力可作为双歧杆菌存在的标识物。通过测定不同培养时间的双歧杆菌培养物的F6PPK酶活力及双歧杆菌活菌数,表明在两歧双歧杆菌和长双歧杆菌中,F6PPK酶活力与双歧杆菌活菌数之间存在线性关系。建立这两种双歧杆菌的F6PPK酶活力-双歧杆菌活菌数之间的工作曲线。以金双歧片剂和合生元儿童益生菌冲剂产品为例,根据该工作曲线,测定产品的F6PPK酶活力,即可计算得到产品所含双歧杆菌数量。本研究建立的F6PPK酶法分析双歧杆菌数量的方法不依赖于厌氧箱平板培养,具有快速、方便的特点,特别适用于仅含1种双歧杆菌的混合菌制品的分析。     

双歧杆菌免疫血清的制备及性质分析

通过动物免疫方法制备了长双歧(B.longum)和两歧双歧杆菌(B.bifidum)的免疫血清，经ELISA检测，血清效价达到1：1280。用此血清和乳制品中常见细菌反应，未见明显交叉反应，这一结果为双歧杆菌发酵乳制品中双歧杆菌的血清学检测提供了参考。     

Relationship between oxygen sensitivity and oxygen metabolism of Bifidobacterium species.

Bifidobacteria, which are obligate anaerobes, were studied to determine the relationship between their sensitivity to oxygen and oxygen metabolism. Among the four species tested, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium longum differed from Bifidobacterium adolescentis in sensitivity to oxygen. The former three species showed marked growth under conditions of partial aeration, whereas the growth of B. adolescentis was suppressed by low concentrations of oxygen. Bifidobacteria express reduced NAD-oxidase and -peroxidase activities, which function in a pathway for two-electron reduction of molecular oxygen, producing hydrogen peroxide and, subsequently, water. Activities of reduced NAD-oxidase and -peroxidase were inversely correlated with their sensitivities to oxygen. Bifidobacterium adolescentis exhibited lowered activities of these two enzymes; the activities were 10 to 20% of those observed with B. infantis, B. breve, and B. longum. These observations are compatible with the hypothesis that reduced NAD-oxidase and reduced NAD-peroxidase in Bifidobacterium species play a role in prevention of oxygen toxicity. Superoxide dismutase activity was also detected in Bifidobacterium species. Superoxide dismutase is probably not involved in detoxification of oxygen, because the activity of this enzyme was extremely low, and the sensitivity to oxygen varied independently of superoxide dismutase activity.     

乳制品中双歧杆菌的快速检测

通过动物免疫方法制备了鼠抗长双歧 (B .longum)和两歧双歧杆菌 (B .bifidum)的免疫血清及兔抗长双歧 (B .longum)和两歧双歧杆菌 (B .bifidum)的免疫血清 ,经双夹心ELISA法对双歧杆菌发酵乳制品中双歧杆菌检测 ,检测最低浓度可达 1 0 7cfu/mL ,仅耗时 8h ,用此血清和乳制品中常见细菌反应 ,未见明显交叉反应 ,这一结果为双歧杆菌发酵乳制品中双歧杆菌的血清学快速检测提供了参考     

Bifidobacterial growth–promoting effect of yak milk κ‐casein hydrolysates produced with different proteases

The growth‐promoting effects of κ‐casein hydrolysates produced by four different proteases (trypsin, alcalase, papain and chymosin) on bifidobacteria (Bb12 and BBMN68) viability were evaluated. Results showed that the obtained κ‐casein hydrolysates possessed better property for improving the viability of Bb12 and BBMN68 than native κ‐casein. The bifidobacterium viability and pH drop were dependent on the added hydrolysates. The addition of κ‐casein hydrolysates improved the viability of Bb12 and BBMN68 to a variable extent. The κ‐casein hydrolysate produced with papain (KCHP) is the best for Bb12 and κ‐casein hydrolysate produced with trypsin (KCHT) is the best for BBMN68. Proper amino acid profiles improved the viability of Bb12 and BBMN68. The bifidobacterial growth‐promoting capacity of κ‐casein hydrolysate may be due to its high content of Ala, Met, Tyr, Phe and Arg residues, especially Tyr which is richer in para‐κ‐casein than in casein glycomacropeptide (GMP). In addition, the sialic acid content of κ‐casein hydrolysate produced with the tested proteases did not show a direct relationship with its bifidobacterial growth–promoting effect. The obtained peptides possessed growth‐promoting activity for Bb12 and BBMN68 existed in para‐κ‐casein.     

利用SOS显色反应评价长寿老人源乳酸菌对4-NQO基因毒性的抑制作用

详细报道了应用SOS显色反应评价巴马长寿老人源乳杆菌和双歧杆菌抑制基因毒性物质4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)的方法。4-NQO(0.1mmol/L)与待测乳酸菌(108～109CFU/ml)37℃共培养180min,6株唾液乳杆菌和2双歧杆菌培养上清液均可抑制4-NQO的基因毒性作用,不同菌株之间在抑制能力上存在菌株差异性。其中以分离自长寿老人粪便的Lactobacillus salivarius subsp.salivarius24DB、2JC、BCHONG和Bifidobacterium animalis subsp.lactis BBMN BBMN1、BBMN2的基因毒性清除率分别为92.91%、88.55%、89.81%、80.86%和83.54%,初步讨论了益生菌对4-NQO的抑制机理。     

双歧杆菌BBMN01体内免疫刺激功能研究

通过动物实验研究了从长寿老人肠道分离出的一株双歧杆菌BBMN01的免疫刺激功能.将活菌以不同剂量给小鼠灌胃3周后,通过迟发型变态(DTH)反应,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,半数溶血值(HC50),以及乳酸脱氢酶(LDH)实验来验证活菌对小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬功能以及自然杀上赴钚缘拇俳饔?与对照组比较,双歧杆菌各剂量组均能提高小鼠淋巴细胞转化能力、小鼠巨噬细胞吞噬能力和小鼠NK细胞活性,中、高剂量双歧杆菌组能提高小鼠的半数溶血值.表明双歧杆菌BBMN01对动物体具有免疫刺激功能.     

双歧酸乳最佳发酵条件的研究

双歧杆菌作为一种益生菌,其促进人体健康的有益作用越来越受到人们的重视,双歧杆菌乳制品利用双歧杆菌的益生作用在功能性乳制品的研发过程中也占有重要的一席之地.该文主要研究双歧杆菌酸乳的发酵条件,利用正交试验优化双歧杆菌与乳酸菌混合发酵的工艺条件,确定双歧杆菌和乳酸菌在牛乳中混合发酵的适宜接种量4％、发酵温度40℃、菌种配比(保加利亚乳杆菌∶嗜热链球菌∶双歧杆菌)3∶2∶1.