罗非鱼骨粉制备氨基酸螯合钙及抗氧化性研究

利用罗非鱼鱼排、鱼头酶解获得鱼骨粉和复合氨基酸液,然后以罗非鱼骨粉的酸解液为钙源,与复合氨基酸液进行螯合反应制备氨基酸螯合钙,并对其抗氧化性进行研究。在单因素试验的基础上采用多元线性回归正交组合试验,以螯合率为指标,研究复合氨基酸液与罗非鱼骨粉的螯合条件。结果显示：pH7.0、反应时间90min、反应温度60℃、氨基态氮质量浓度1.6g/L,产品螯合率为57.22%。抗氧化研究结果表明,在一定的体积范围内,氨基酸螯合钙浓缩液的还原力随着其体积的增大而增大。氨基酸螯合钙浓缩液对羟自由基的清除率和对超氧阴离子自由基的抑制率分别为6.60% 和51.67%。     

鱼骨粉制备复合氨基酸螯合钙工艺研究

以鱼骨粉水解液为钙源,螯合率为指标,研究了复合氨基酸与鱼骨粉钙离子螯合条件.结果显示,鱼骨粉制备复合氨基酸螯合钙的最佳条件是:pH值为7,复合氨基酸与钙质量比为1:1,螯合时间为50 min,温度为70℃,产品螯合率为88.84%.最后通过比较螯合前后红外光谱图,证明氨基酸螯舍钙的形成.     

双酶分步酶解提取羊骨中可溶性钙

为提高羊骨的高值利用,研究了木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分步酶解提取羊骨中可溶性钙的最佳工艺条件。以羊骨粉为原料,游离钙含量为指标,通过单因素试验和响应面优化2种酶的酶解工艺,并在不同加入顺序和时间组合下进行分步水解,提取羊骨中可溶性钙。结果表明,木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的最佳酶解条件分别为酶解温度55、40℃,酶解时间均为4 h,酶解pH 6. 0、2. 5,加酶量5 000、5 300 U/g,所测实际游离钙含量是79. 02和1 008. 68 mg/100 g;在双酶各自最优酶解条件下,按先木瓜蛋白酶后胃蛋白酶的加入顺序,分别酶解3 h,游离钙含量达到了1 839. 14 mg/100 g,极显著高于单酶和其他组合(P <0. 01)。     

罗非鱼骨粉可溶性钙提取工艺的探索

罗非鱼骨经过脱脂、粉碎、酶解和干燥制成脱脂骨粉。在酶底比为3‰,PH值为4.0,酶解时间为10h是获得高骨钙转化率的最佳工艺。     

微生物发酵罗非鱼骨粉工艺条件的优化

采用乳酸菌对罗非鱼骨粉进行发酵,并对最适发酵条件进行研究。单因素试验结果表明,罗非鱼骨粉的最适发酵菌株为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),装液量为30%,料液比为1:5(m/V),最适糖类为葡萄糖,起始pH值自然;混合水平正交试验结果表明,各因素对游离Ca2+含量影响的主次顺序为:发酵时间>葡萄糖用量>接种量>发酵温度>骨粉粒径,其中发酵时间对游离Ca2+含量有显著影响(P<0.05),最优发酵条件为发酵时间8d、接种量8%、葡萄糖用量5%、温度37℃、骨粉粒径<0.075mm。     

响应面优化酶解马骨粉工艺的研究

利用碱性蛋白酶水解马骨粉,得到营养马骨多肽粉。以氮收率和水解度为指标对骨粉进行单因素实验。在单因素基础上运用Design Expert8.0Trial统计软件,以水解度为响应值,得到最佳酶解条件为:酶解温度47℃,料液比1∶7g/mL,酶解pH9,加酶量6200U/g,此时最高水解度为17.47%。结果表明,酶解可以显著提高马骨粉中蛋白质的水解度。      

鱼骨粉粒径对鱼骨粉-鱼蛋白酶解物混合物中钙生物利用率的影响

以采肉剩余的鲢鱼中骨酶解制得的蛋白肽和鱼骨粉为原料制备鱼骨粉-鱼蛋白酶解物混合物,以Wistar雄性大鼠为动物实验模型,用钙表观吸收率、钙存留率、股骨生物力学指标和骨密度等指标检测鱼骨粉粒径对鱼骨粉-鱼蛋白酶解物混合物中钙生物利用率的影响。结果表明：在相同钙摄入量下饲喂不同粒径鱼骨粉-鱼蛋白酶解物混合物的大鼠其体质量、肝体比、脾体比、肾体比无明显差异（P＞0.05）,但其钙表观吸收率、钙存留率、大鼠股骨生物力学性质、骨密度等指标有显著差异（P＜0.05）。添加小粒径鱼骨粉（d≤74 μm）的鱼骨粉-鱼蛋白酶解物混合物各项评价指标均显著高于其他实验组和碳酸钙对照组及低钙对照组,其钙表观吸收率为（47.84±3.90）%,钙存留率为（44.94±3.01）%,骨钙含量为（24.18±0.01）%,能量吸收为（7.52±0.48）kg·mm,其钙生物利用率最高。     

酶解罗非鱼下脚料制备的超微罗非鱼骨粉营养价值分析

以罗非鱼骨为原料,经超微粉碎制得鱼骨粉含蛋白质21.3%（干基计）,脂肪1.5%,灰分73.97%,骨粉中钙、磷含量分别为28.4,12 g/100 g,且Ca∶P为2.37∶1,铁的含量为26 mg/100 g,具有高蛋白、低脂肪、矿物质丰富的特点;骨粉中8种必需氨基酸总量为4.41%,占氨基酸总量的22.73%.     

罗非鱼排酶解工艺的研究

选用中性蛋白酶酶解罗非鱼排,制备蛋白水解液。以水解度为优化指标,考察初始pH值、酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间对水解度的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳工艺条件;并在最佳工艺条件下,考察水浴、高压蒸汽、超声波和微波等预处理方式对水解度的影响。结果表明:最佳工艺条件为温度49℃,加酶量1 824U/g,水解时间6h,此时罗非鱼排水解度(DH)可达33.7%;除了110℃的高压蒸汽和180w功率的超声波预处理有助于罗非鱼排的进一步水解,其它的预处理方式均不利于罗非鱼排的后续水解。     

脱脂罗非鱼骨粉直接用作食品原料的研究

将悬浮分离得到的罗非鱼鱼骨,烘干粉碎成鱼骨粉,分析其保藏期间酸价及过氧化值变化,并利用索氏抽提对鱼骨粉进行脱脂处理。采用原子发射光谱法测定脱脂鱼骨粉及不同目数鱼骨粉溶出液中钙、铁、锌、铅、镉、砷、硒的含量;将不同目数的鱼骨粉添加到曲奇饼干的原辅料中,通过感官评价确定适合制作曲奇饼干的目数。结果表明:鱼骨粉的酸价和过氧化值会随保藏时间的增长而增大,因此要在鱼骨粉生产中添加脱脂工艺;鱼骨粉中矿物质元素丰富,尤其是钙;在模拟胃液环境中,过筛目数越大,鱼骨粉中矿物质成分溶出效果越好,制成的鱼骨粉曲奇饼干,外形和感官越为理想,其中以100目及以上的脱脂罗非鱼骨粉直接用作食品原料的效果较好。      

柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉的工艺优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺;采用对比和正交实验相结合的设计方案,用柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉,以水解度、钙溶出率为特征性指标,三氯乙酸中可溶性氮含量评定水解效果。结果表明:牛骨在121℃,0.14MPa条件下,蒸煮120min全部松软,蛋白质暴露面积增加,有利于其水解;用柠檬酸水解牛骨粉,水解度与钙溶出率呈极显著相关性(P<0.01);柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉的最佳条件:柠檬酸浓度0.5mol/L、酶与底物蛋白量比(E/S)为500U/g、底物浓度11%、反应时间为6h,水解度与钙溶出率分别达33.7%和11.2%;三氯乙酸中可溶性氮含量达到97.2%,表明大部分产物为低分子肽类,溶解性高。     

响应面法优化骨素酶解制备可溶性肽工艺研究

利用响应面法分析了酶解骨素制备可溶性肽的工艺,以酶解温度、时间、pH及酶用量为影响因素,酶解液中可溶性肽含量、酶解液的苦味和鲜味为优化指标。结果显示,酶解温度和pH对可溶性肽含量、酶解液鲜味有显著影响(p0.05);拟合模型验证结果表明,所得模型在预测可溶性肽含量时具有一定可靠性;酶解骨素的最优工艺为温度60℃、时间2h、pH6、酶用量10000U/g,此时可溶性肽含量最高,酶解液的鲜味较强,无苦味。     

酶法水解棉籽蛋白的研究

采用pH-stat法测定水解度,探讨了两种蛋白酶分步水解棉籽蛋白的反应条件和影响因素。实验结果表明,先使用碱性蛋白酶Alcalase,在酶加量为750 U/g、水解温度60℃、底物浓度5%、pH为8的条件下水解300 min;灭酶后再加入中性蛋白酶AS1.398,在酶加量8 000 U/g、水解温度60℃、pH为7的条件下再水解100 min;两种酶的最终水解度达到20.08%。     

响应面法优化加酶提高罗非鱼下脚料和豆粕混合发酵水解度的工艺研究

以罗非鱼下脚料和豆粕为原料,在加入枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌发酵的前提下,添加中性蛋白酶。在单因素的基础之上,以水解度为响应值,对混合发酵的工艺条件进行中心复合设计,确立了最佳工艺条件为:中性蛋白酶添加量0.1%,发酵温度40℃,发酵时间53h。在此条件下,水解度为31.94%,比纯菌种发酵提高4.7%。      

超声波辅助酶法提取骨明胶研究

以脱脂脱矿骨粉为原料,利用超声波辅助胃蛋白酶法提取骨明胶。比较了骨素酶解前、酶解中以及酶解后经不同超声时间和功率处理对明胶得率的影响,单因素实验结果表明:骨素酶解前和酶解中经超声处理,明胶得率显著提高。在骨素酶解前和酶解中分别经250 W、20 min和250 W、10 min的超声处理,明胶的得率分别为81.35%和83.32%,与未经超声处理组相比,明胶得率分别提高了9.96%和11.93%,而骨素酶解后在300 W超声功率下处理10 min,明胶得率仅为71.59%,与未超声处理组71.39%接近。SEM图片显示,酶解前和酶解中经超声处理,会使骨素表面出现孔隙,而酶解后超声处理则会使骨素表面更加光滑,表明酶解前和酶解中超声处理对骨素具有疏松作用。SDS-PAGE结果显示,超声波辅助酶法提取明胶,对明胶分子量分布没有影响。超声波辅助酶法提取,提高了骨明胶的得率,可为工业上骨明胶的生产提供有益的参考和借鉴。      

猪骨泥功能性双菌发酵

为充分利用含有大量不易消化吸收的蛋白质、钙磷盐等营养物质的废弃猪骨,利用枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌,采用液态发酵法对猪骨泥进行功能性发酵,旨在同时提高骨泥中易于吸收且具有功能的小分子蛋白、多肽及可溶性钙的含量,强化发酵骨泥的功能性。分别对单菌和双菌发酵骨泥的水解度、鲜味氨基酸和可溶性钙含量进行分析,并考察了骨泥发酵前后的表观变化。结果表明:双菌发酵后骨泥水解度达到42.5%,鲜味氨基酸含量达到2.01 mg/mL,可溶性钙含量达到1.16 mg/mL,比单菌发酵更有优势。双菌发酵蛋白酶系多样,水解更加充分,同时还能提高骨泥可溶性钙的含量,为猪骨深度开发提供依据。     

饲养大鲵蛋白水解工艺研究

采用酶法水解大鲵蛋白制备蛋白粉,以水解度为指标,通过单因素试验和正交设计试验,研究了饲养大鲵蛋白的水解条件。结果表明:采用碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=1:3(g/g)为试验用酶,水解的最佳条件为料液比1:7、酶浓度2400 U/g、pH7.5、水解时间5 h、水解温度55℃,该条件下水解度可达36.18%。     

Enzymatic hydrolysis of soy proteins and the hydrolysates utilisation

Soy proteins are very important protein source for human being and livestock. Enzymatic hydrolysis of soy protein can enhance or reduce its functional properties and improve its nutritious value. Soy protein hydrolysates were primarily used as functional food ingredients, flavour and nutritious enhancers, protein substitute, and clinical products. Conditions for hydrolysis were usually mild, whereas recently high pressure treatment attracted more interest. Degree of hydrolysis (DH) was usually between 1% and 39.5%. The main problem associated with proteolytic hydrolysis of soy protein was production of bitter taste, hydrolysates coagulation and high cost of enzymes. Bitterness reduction can be achieved by control of DH, selective separation of bitter peptides from hydrolysates, treatment of hydrolysates with exo‐peptidases, addition of various components [adenosine monophosphate (AMP), some amino acids, monosodium glutamate (MSG), etc.] to block or mask the bitter taste, and modification of taste signalling. Hydrolysates coagulation can be resolved by selecting appropriate enzymes and by applying immobilisation technology the production cost can be reduced. Enzymatic hydrolysis also enhances bioactivity of soy proteins through conversion of glycosides to aglycones, increasing antioxidant and immunoregulatory properties. Finally, future works have been discussed.     

鲶鱼骨肉泥的酶解工艺优化

利用鲶鱼副产物（鱼头、鱼皮、鱼骨和碎肉等）制备的骨肉泥为实验对象,以多肽得率和钙溶出率为考察指标进行Box-Behnken响应面实验设计,探究胃蛋白酶的酶解时间、加酶量和液料比三因素对酶解效果的影响。通过所得的结果和二次多项回归方程确立了最优的工艺条件:液料比（水∶骨肉泥,m∶m）是6.73∶1,胃蛋白酶的加酶量7000 U/g,酶解温度37℃,p H为3.0,酶解时间6 h。此条件酶解骨肉泥得到的酶解液中,多肽得率为43.07%,钙溶出率为44.62%。      

罗非鱼肉双酶分步酶解制备Maillard反应基液的研究

以罗非鱼下脚料为原料,对其进行双酶分步酶解来制备Maillard反应基液。以氨基酸态氮含量(Cn)、TCA可溶性蛋白(短肽)含量(Cp)的变化为指标对酶解过程进行分析,结合酶解液的感官评定,认为Flavourzyme和Protame、Flavourzyme和Alcalase2.4L两个组合的复合酶解效果较好。对其进行工艺改进以后,两者酶解液的Cn值分别达到0.4%和0.35%。