灵芝菌体液态深层发酵条件的优化

研究摇瓶灵芝菌体液态深层发酵温度和初始pH 值,在此基础上进行5L 发酵罐批次培养,研究发酵过程pH 值控制、溶氧控制对灵芝菌体生长和灵芝胞外多糖的影响。结果表明：发酵温度30℃,初始pH 值为6.0;过程pH 值控制策略：菌体生长前期(0～40h)控制pH 值为5.5,40～48h 控制pH 5.0,48h 后至发酵结束控制pH4.5;溶氧控制策略为：搅拌转速160r/min,通风量0.75vvm。优化后的验证实验结果：灵芝菌体生物量最高达到19.7g/L,胞外多糖最高达到3.23g/L,较优化前灵芝菌体生物量12.8g/L 和灵芝胞外多糖2.39g/L 分别提高了53.9% 和35.1%。     

以薏苡仁为基质的灵芝液体发酵——I.培养基优化

研究了以薏苡仁为基质的灵芝液体发酵,并用响应面分析法对培养基进行了优化,结果表明薏苡仁油可促进灵芝菌解体的生长及胞外多糖的生产,最适加入量为1.5%～2.0%;最适培养基组成为MgSO4 0.075%、KH2PO4 0.1%、K2HPO4 0.1%、VB110 mg/L、葡萄糖2.05%、薏苡仁3.59%.     

以薏苡仁为基质的灵芝液体发酵——Ⅰ.培养基优化

研究了以薏苡仁为基质的灵芝液体发酵,并用响应面分析法对培养基进行了优化,结果表明:薏苡仁油可促进灵芝菌解体的生长及胞外多糖的生产,最适加入量为1.5%～2.0%;最适培养基组成为:MgSO40.075%、KH2PO40.1%、K2HPO40.1%、VB110mg/L、葡萄糖2.05%、薏苡仁3.59%。     

灵芝菌在绿茶发酵中的应用

对灵芝菌在绿茶培养基与无茶培养基中摇瓶发酵时菌体生长和胞外多糖合成进行了对比研究,实验结果表明,灵芝菌生物量降低了17.08%,胞外粗多糖产量增加了42.5%。同时对灵芝菌在改善低档绿茶品质中的应用也进行了探索,低档绿茶经过灵芝菌摇瓶发酵后,茶汤主要呈味成分含量发生变化,茶多酚降解了64.8%,游离氨基酸总量增加了9.7%,酚氨比降低了67.8%,水溶性灵芝胞外多糖增加,茶汤品质得到很大改善。     

4种中药对灵芝生长与发酵的影响

通过在灵芝液体发酵培养基中分别添加甘草、山茱萸、黄芪、黄岑4种中药,研究其对灵芝生长与发酵的影响.结果表明,这4种中药对灵芝生长与发酵均有不同程度的影响.甘草和山茱萸有明显的促进作用,黄芪表现一定的促进作用和抑制作用,黄岑则有较强的抑制作用;除黄岑外,灵芝生物量及各代谢产物量达到最大值时其余3种中药的添加量范围均在4 g/L～8 g/L,其中,甘草更利于促进灵芝酸(尤其是胞外灵芝酸)的合成,山茱萸不仅能促进灵芝快速生长,而且更利于促进灵芝多糖(尤其是胞外灵芝多糖)的合成.     

不同中药水提物对蝉拟青霉液体深层发酵和产物活性的影响

通过分别向培养基中添加不同的中药水提物进行蝉拟青霉液体发酵培养,探究其对蝉拟青霉发酵过程中生物量、胞外和胞内多糖的产量及其产物活性的影响。结果表明,黄芪、薏苡仁、枸杞的水提物分别对蝉拟青霉生物量、胞外和胞内多糖的合成促进效果最为显著(p0.05),分别较对照实验提高了135.82%、48.90%、137.18%;而金银花和山楂水提物不利于蝉拟青霉的发酵培养;对于产物活性,结果显示枸杞水提物能同时显著(p0.05)提高蝉拟青霉胞外和胞内多糖对DPPH自由基的清除能力,分别为对照实验的1.17倍和1.38倍。综合比较上述结果,枸杞水提物是蝉拟青霉液体发酵的最适中药成分,其最佳添加量为10g/L。     

pH值控制灵芝发酵产生灵芝酸的研究

研究pH值对灵芝液体深层发酵产生灵芝酸的影响及提高灵芝酸类物质产量的工艺.采用pH值控制法液体深层发酵生产灵芝酸,HPLC法测定灵芝酸,硫酸-苯酚法测定灵芝多糖.胞内灵芝酸的合成与菌丝体生长呈偶联型,胞外灵芝睃彤成与菌丝体生长呈部分偶联型.菌丝体牛长及胞内灵芝酸生成的最适pH值为5.5,胞外灵芝酸产生最适pH值为4.5,本实验按优化的pH值控制条件,胞外灵芝酸产量达到0.86 g/L,比自然发酵工艺提高了34.4%;并提高了胞内灵芝酸的产量,达到0.364g/kg湿菌体.pH值控制发酵法可有效提高灵芝酸的产量.     

pH值及溶解氧对灵芝多糖深层液态发酵的影响与控制

探讨了 pH值及溶解氧 (DO)对灵芝多糖深层液态发酵的影响和控制措施。结果表明 ,灵芝胞内多糖的生成与菌丝体的生长呈偶联型 ,胞外多糖的形成与菌丝体生长呈部分偶联型。菌丝体生长及胞内多糖产生的最适 pH值为 5 4 ,胞外多糖产生的最适 pH值为 4 6。菌丝体生长最适溶氧和胞外多糖生成最适溶氧基本一致 ,在 80 0 %左右 ,溶氧超过这一水平 ,不利于胞外多糖的形成。据此设计出灵芝多糖发酵 pH和DO优化控制条件 ,在此优化条件下进行发酵 ,灵芝菌丝体生物量、胞内多糖量、胞外多糖量较未经优化控制的发酵分别提高 57%、51%、31% ,总灵芝多糖产量提高了 33%     

天麻和苦荞复配液对灰树花胞外多糖合成的影响及其发酵动力学研究

通过向灰树花发酵体系中单一添加天麻醇提物、苦荞醇提物及两种提取物的复配液,研究其对灰树花菌体生长和胞外多糖合成的影响,同时对添加复配液后发酵体系中的残糖(还原糖)含量、pH值的动态变化进行研究。结果表明:当复配液中天麻醇提物添加量为7 g/L、苦荞醇提物添加量为5 g/L时效果较佳,相比空白组(未添加提取物)和单一添加组(天麻、苦荞),胞外多糖产量分别增加了49.08%、13.76%、33.88%,菌丝体生物量分别增加了51.10%、11.35%、26.69%,均显著地高于空白组(P<0.01)和单一添加组(P<0.05)。发酵动力学研究表明,灰树花菌体生长和胞外多糖产量在第7天达到峰值,复配组相对于空白组能消耗更多的碳源物质促进胞外多糖的合成。因此,天麻和苦荞中的有效成分能够显著促进灰树花菌体生长与胞外多糖的合成。     

党参提取液对白灵菇深层发酵多糖的影响

研究了在白灵菇液态深层发酵过程中添加入不同浓度的党参水提取液对发酵多糖的动态影响。通过测定胞内多糖、胞外多糖以及pH值、生物量、菌丝球密度、菌丝球直径和发酵液黏度等一系列发酵指标的变化,结果显示,在发酵培养液中加入25mg/L、50mg/mL、75mg/mL的党参水提取液,对白灵菇发酵多糖及生物量均有促进作用,尤其是添加50mg/mL的党参水提取液时效果最显著,白灵菇发酵胞内多糖得率、胞外多糖得率及生物量质量分数分别可达10.5%、8.02%和1.4g/100mL。     

灵芝多糖的复合酶法提取工艺优化

以灵芝子实体为原料,采用复合酶法(纤维素酶、半纤维素酶、木瓜蛋白酶)提取灵芝多糖,并分析工艺条件对多糖提取率的影响。在正交试验确定复合酶比例的基础上,采用响应面法对复合酶法提取灵芝多糖的提取条件进行了优化,得到最优工艺条件。研究结果表明,复合酶比例为:纤维素酶3.5%、半纤维素酶4.0%、木瓜蛋白酶3.0%;最佳酶解提取条件为:酶解处理pH值、温度和时间分别为5.70、50℃和81 min,在此条件下灵芝多糖的提取率为3.73%。     

灵芝发酵麸皮粗多糖的组成及抗氧化活性分析

为研究灵芝发酵麸皮粗多糖组成及抗氧化活性,对比分析了灵芝发酵前后麸皮粗多糖的体外抗氧化活性和组分,并通过高效液相色谱、傅里叶红外光谱初探灵芝发酵麸皮粗多糖的结构。结果表明:灵芝发酵麸皮粗多糖（GWBP）在4.0 g/L浓度下的DPPH、羟基自由基清除率和还原力分别为91.37%、95.74%和0.92,显著高于未发酵麸皮粗多糖（WBP）（P<0.05）。GWBP组分中黄酮、多酚、蛋白含量分别为5.41、12.74和206.41 mg/g,显著高于WBP（P<0.05）。GWBP是一种吡喃糖,主要由葡萄糖、木糖和核糖等组成,分子量为4.172×103 Da。灵芝液态发酵可以提高麸皮粗多糖的抗氧化活性,改变粗多糖的组成成分。本研究为灵芝发酵麸皮粗多糖天然抗氧化的开发提供参考。     

灵芝多糖研究综述

灵芝,在我国作为药物有2000多年历史,临床和药理研究表明,灵芝具有多种生理活性与药理作用;而灵芝多糖则是其最主要有效成分,尤其它还具有抗肿瘤活性功能。该文综述近年有关灵芝多糖结构、生物学功能、生产及应用等方面实验研究概况。     

利用生化方法鉴定灵芝原生质体融合子的研究

以美大灵芝和信州灵芝为出发菌株,采用化学融合法将两种灵芝原生质体进行融合,利用生化方法进行检测。结果表明:融合子胞外多糖含量与美大和信芝两亲本相比分别增加了332.80%和22.86%,胞内三萜含量与美大和信芝相比分别增加了36.21%和113.16%,胞外三萜含量与美大和信芝相比分别增加了23.17%和46.31%;采用琼脂糖凝胶电泳实验对融合子及亲本DNA进行检测,融合子DNA移动速度比亲本慢,说明融合子分子量大于两亲本,两亲本遗传物质发生重组。     

以薏苡仁为基质的灵芝液体发酵——Ⅱ.主要活性成分分析

分析了主要活性物质(薏苡仁酯、粗灵芝酸等)在灵芝发酵前后的变化,结果表明:以薏苡仁为基质进行灵芝发酵后的发酵产物,其粗脂肪的总量有所下降,但亚油酸的含量升高;经HPLC分析,与以清液进行的灵芝发酵相比,以薏苡仁为基质进行的灵芝发酵在粗灵芝酸组成上是有差异的,合成的种类也更为丰富。     

热水与超声波提取鹿角灵芝多糖工艺比较研究

为比较超声波和热水提取鹿角灵芝多糖的得率,为工业化生产提供依据,以鹿角灵芝为材料,采用热水和超声波法提取其中的灵芝多糖,并通过单因素和正交试验研究提取温度、提取时间、超声波功率、料液比对多糖提取效果的影响,确定热水与超声波提取鹿角灵芝中多糖的最佳提取条件,并且比较最佳提前条件下两种提取方法的多糖得率。结果表明,热水提取鹿角灵芝多糖的最佳条件为温度90℃,时间2h,料液比1：30,多糖提取率为0.63％;超声波提取鹿角灵芝多糖的最佳条件为温度80℃,时间1.5h,功率360W,料液比l：25,多糖提取率为0.87％;超声波提取率是热水提取率的1.37倍。超声波辅助可以提高鹿角灵芝多糖的提取率。     

优化发酵条件提高灵芝多糖产率的研究

通过不同的灵芝菌种、培养基的组成和不同的培养条件对灵芝进行深层发酵试验,利用优化实验条件确定灵芝深层发酵的最佳培养条件。在此条件下灵芝菌丝体干质量可达15.2g/L,胞外多糖含量为3.7g/L,为灵芝多糖的工业化发酵生产奠定了基础。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分,近年来以其独特的保健功能成为研究的热点。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等,对其活性影响很大,本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实,灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面,由于固态栽培灵芝有诸多因素的制约,液体发酵培养成为获取灵芝多糖的主要手段,而液态发酵条件的优化研究主要集中于种子的培养、碳源氮源的选择及微量微量元素的添加。传统提取灵芝多糖的方法如热水浸提法、碱提取法,有提取时间长、提取效率不高的缺点,而利用超声波辅助提取多糖受到人们的关注,并和传统提取方法做了比较,显示了这种方法的广阔应用前景。     

灵芝液体发酵产胞内多糖的培养基优化

以菌丝生物量及菌丝胞内多糖为指标,用液体发酵方法培养灵芝菌丝并获得菌丝胞内多糖,通过单因素及正交试验,研究了碳源、氮源、微量元素对灵芝菌丝生长及多糖产量的影响。结果表明:灵芝液体发酵生产菌丝多糖最适合培养基组合为:麦芽糖2.0%、酵母提取粉2.0%、ZnSO40.015%、VB10.10%、KH2PO40.2%、MgSO40.05%、pH 6.0,菌丝多糖产量高达6.64%。     

灵芝多糖对人肺癌A549细胞增殖凋亡的作用

本研究了灵芝多糖对人肺癌A549细胞增殖凋亡的作用。将肺癌A549细胞分为空白组、药物对照组、低、中、高浓度组,对各组细胞分别进行干预,检测其凋亡、增殖能力变化情况,对细胞凋亡蛋白Bcl-2、PI3K、Akt表达进行检测。结果显示,相比其他各组,高浓度组细胞增殖率较低,且随着使用灵芝多糖干预时间延长,高浓度组细胞增殖率自44.37%下降至20.11%。相比其他各组,高浓度组细胞凋亡率较高,且随着使用灵芝多糖干预时间延长,高浓度组细胞凋亡率自46.52%上升至77.93%。相比其他各组,高浓度组细胞Bcl-2、PI3K、Akt相对表达量较低。使用灵芝多糖进行干预,能够抑制肺癌A549细胞增殖,促进肺癌A549细胞凋亡,其能力与自身细胞毒性无关,可能与调控细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、PI3K、Akt表达有关,说明灵芝多糖能够抑制肺癌A549细胞发展和扩散,对人肺癌A549细胞增殖凋亡起到调控。