酪蛋白酶解液的脱盐纯化方法研究

研究了DA201-C，NKA-Ⅱ，AB-8，XAD1180，XAD16和HZ-816六种大孔吸附树脂在酪蛋白酶解液吸附和解吸附过程中的脱盐作用。在了解树脂物理参数的基础上，通过静态吸附实验，筛选出脱盐效果最佳的树脂和洗脱液，然后进行动态吸附实验研究。结果表明，DA201C对酪蛋白酶解液的脱盐是最佳的，而且采用70％乙醇溶液为洗脱剂时洗脱率和脱盐率均较高。     

芸豆蛋白酶解工艺的研究

以芸豆蛋白为原料研究芸豆抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以DPPH.清除率和水解度为评价指标筛选最适用酶,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解工艺条件为底物浓度4.0%,温度55℃,加酶量2000u.g-1,pH9.0,时间6h,该条件下水解度和DPPH.清除率分别为16.16%和74.10%,比优化前分别提高4.95%和7.63%;芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。      

芸豆蛋白酶解工艺的研究

以芸豆蛋白为原料研究芸豆抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以DPPH.清除率和水解度为评价指标筛选最适用酶,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解工艺条件为底物浓度4.0%,温度55℃,加酶量2000u.g-1,pH9.0,时间6h,该条件下水解度和DPPH.清除率分别为16.16%和74.10%,比优化前分别提高4.95%和7.63%;芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。     

大孔吸附树脂对酪蛋白酶解液的脱盐作用研究

本文研究了DA201-C、NKA-II、AB-8、XAD1180、XAD16和HZ-816六种大孔吸附树脂在酪蛋白酶解液吸附和解吸附过程中的脱盐作用。在了解树脂物理参数的基础上,通过静态吸附实验,筛选出脱盐效果最佳的树脂和洗脱液,然后进行动态吸附实验研究。结果表明:DA201C对酪蛋白酶解液的脱盐是最佳的,而且采用70%乙醇溶液为洗脱剂时洗脱率和脱盐率均较高。     

采用大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐

通过测定7种树脂对癞葡萄蛋白酶解物的吸附率和解吸率,选择DA201-C型大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐。结果表明,在酶解物以60 mg/mL、0.5 BV/h流速上样,采用75%乙醇解吸的条件下,酶解物的脱盐率为92.49%,回收率为78.38%;酶解物中蛋白的含量从脱盐前的76.67%提高至脱盐后的85.69%。脱盐后的酶解物仍有显著的降血糖作用,且降血糖作用较脱盐前稍有提高。     

葛根蛋白酶解物大孔树脂吸附工艺优化及其体外抗氧化活性研究

目的：优化大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物工艺及其抗氧化活性研究。方法：采用Box-Behnken响应面法确定大孔树脂吸附葛根蛋白酶解物最佳工艺。以维生素C为对照,测定最佳工艺下纯化前后葛根蛋白酶解物的抗氧化活性。结果：大孔树脂的最佳吸附—解吸工艺为上样液质量浓度10.0 mg/mL,洗脱液流速2.6 mL/min,洗脱液乙醇体积分数74%,纯化后葛根蛋白酶解物含量提升至37.19%。大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物对DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基的清除率均强于吸附前的。结论：大孔树脂纯化后的葛根蛋白酶解物抗氧化效果良好,可以作为一种潜在的蛋白多肽应用于食品中。     

离子交换树脂分离谷胱甘肽洗脱液的脱盐研究

为提高离子交换树脂法分离纯化谷胱甘肽的产品质量,采用大孔吸附树脂SP-207 对732 强酸性离子交换树脂分离酵母提取液中谷胱甘肽的洗脱液进行脱盐效果研究。在优化的条件下,脱盐率达到99.86%、谷胱甘肽回收率65.71%,说明大孔树脂SP-207 用于脱盐效果非常理想。     

大孔吸附树脂分离纯化麦胚蛋白酶解物中的抗氧化寡肽

采用DA201-C型大孔吸附树脂对麦胚蛋白酶解物(WGPHs)进行乙醇分步洗脱,不同浓度乙醇洗脱组分的疏水性氨基酸的摩尔百分比和疏水性Q值的分析结果表明:洗脱是按照疏水性递增的方式进行的,说明利用不同浓度乙醇将WGPHs按疏水性大小初步分离纯化是可行的,含疏水性氨基酸肽段的富集显著提高了WGPHs梯度洗脱组分的体外抗氧化活性。     

超滤对芸豆蛋白酶解物抗氧化活性的影响

采用超滤法从芸豆蛋白酶解物中初步分离纯化抗氧化活性肽。研究超滤系统主要参数对膜通量的影响,确定最优的超滤条件和膜清洗方法,并对超滤前后酶解物的相对分子质量分布、氨基酸组成及抗氧化活性进行比较。结果表明：采用改性聚醚砜平板超滤膜在室温,酶解液质量分数2.5%,pH6.5 和压力0.25MPa 条件下的分离纯化效果较好;超滤能有效去除酶解液中相对分子质量较大的组分,相对分子质量2000～1000D 及1000D 以下的组分分别从11.38% 和12.64% 提高到32.83% 和 45.91%,其抗氧化活性也得到明显提高。     

大孔吸附树脂对酪蛋白酶解物的吸附特性研究

比较了6种大孔吸附树脂对酪蛋白酶解物的吸附特性。结果表明,DA201-C大孔吸附树脂较适合酪蛋白酶解物的分离,其对酪蛋白酶解物的动态吸附条件为:样品浓度:10mg/mL;洗脱剂:50%乙醇溶液;洗脱剂流速:1.5BV/h。      

芸豆蛋白的理化功能特性研究

选取4个芸豆品种,以大豆蛋白为对照,采用碱提酸沉法提取芸豆蛋白并分析其理化功能特性。结果表明:芸豆蛋白含有9种必需氨基酸,且必需氨基酸占总氨基酸的比例(57%~62%)高于大豆蛋白(47%),黑芸豆的限制性氨基酸比例(2.59%)高于其他参试品种及大豆蛋白(1.53%~1.89%)。不同品种芸豆蛋白亚基主要分布在47 ku左右,由2个或3个亚基组成,次要条带间存在一定差异,大豆蛋白的条带与芸豆蛋白条带显著不同。芸豆蛋白的溶解性和吸水性略低于大豆蛋白,乳化性及乳化稳定性、发泡性及泡沫稳定性、吸油性和最小凝胶浓度均接近或高于大豆蛋白,红芸豆和白芸豆蛋白的功能特性高于黄芸豆和黑芸豆蛋白。     

Use of macroporous adsorption resin for simultaneous desalting and debittering of whey protein hydrolysates

Whey protein isolate (WPI) was hydrolysed to whey protein hydrolysates (WPH) of degree of hydrolysis equal to 15% using Protease N ‘Amano’ G (IUB 3.4.24.28) in a batch reactor at 55 °C and pH 7.0 according to the pH‐stat procedure. Ash was removed by adsorbing WPH onto macroporous adsorption resins (MAR). Following rinsing with deionised water, desorption was achieved by washing with 20%, 40% and 75% alcohol (v v^?1) to obtain the three fractions HS20, HS40 and HS75. Ash reduced from 15.71% (WPH) to 4.38% (HS20), 2.02% (HS40) and 2.38% (HS75). Similarly, the protein content was enriched from a low of 64.89% (WPH) to 94.74% (HS20), 95.32% (HS40) and 92.00% (HS75). The fractions were analysed for surface hydrophobicity (SH_o), angiotensin‐I converting enzyme (ACE) inhibition, emulsifying activity index, total amino acids composition and molecular weight distribution. Fraction HS75 was objectionably bitter, showed superior ACE inhibition (lowest IC₅₀), had the highest content of hydrophobic and essential amino acids and contained about 71% of <600 Da with no fractions exceeding 4142 Da. Desorption with alcohol weakened the hydrophobic interaction forces between the peptides and resins and hence eluted the peptides, with the bitter HS75 being extracted.     

酰化对芸豆分离蛋白热学特性的影响研究

从参与酰化反应基团的视角,运用热分析(DSC)技术,研究了不同酰化阶段芸豆分离蛋白热学性质的变化规律。芸豆分离蛋白(KPI)的酰化过程存在两个主要的酰化阶段,酸酐-蛋白比为0～0.1(乙酰化)和0～0.2(琥珀酰化)g/g,为ε-氨基(Lys)酰化阶段(N-酰化);再增加酸酐与蛋白比,ε-氨基酰化基本完成,反应进入羟基(Thr,Ser)酰化阶段(O-酰化)。在N-酰化阶段,琥珀酰化诱导KPI的热稳定性增加,而焓变(ΔH)略有降低,乙酰化不影响KPI的热稳定性和焓变(ΔH);羟基酰化阶段,酰化导致KPI变性温度(Td)降低,伴随焓变(ΔH)急剧下降。     

反胶束法提取红芸豆蛋白的前萃工艺优化

采用二-（2-乙基已基）琥珀酸酯磺酸钠（AOT）-异辛烷-氯化钾组成的反胶束体系萃取红芸豆蛋白（RKBP）。采用电导法考察AOT浓度对AOT-异辛烷-水反胶束体系含水量和临界增溶水量的影响,确定反胶束体系稳定的AOT浓度范围。采用单因素实验分别研究了AOT浓度、缓冲液pH、KCI浓度和萃取时间等因素对RKBP前萃率的影响,通过正交实验优化前萃条件。结果表明,不同AOT浓度对应的反胶束体系的临界含水量值（Wc）基本一致,反胶束体系能够增溶的水的体积随AOT浓度的增加而明显增大,反胶束体系稳定的AOT浓度上限值为2mol/L。正交优化获得反胶束法萃取RKBP的最佳前萃条件为:AOT浓度1.25mol/L,缓冲溶液pH7.5,KCl浓度0.05mol/L,萃取时间90min。在该最优工艺条件下,RKBP前萃率达到43.57%。      

英国红芸豆蛋白抗氧化肽酶解工艺的研究

以英国红芸豆为原料,研究芸豆蛋白质抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以水解度和总抗氧化能力为评价指标进行酶的筛选,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解条件为底物浓度5.0%,温度55℃,加酶量4000 u/m L,p H10,时间2 h,该条件下总抗氧化能力高达186.97 U/mg pro,英国红芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。      

Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白规律及其产物清除DPPH活性研究

研究了Alcalase降解水不溶性鸡肉蛋白的规律及其产物清除DPPH自由基活性。结果表明,随酶解时间延长,可溶性蛋白质、氨基酸含量不断增加,而肽含量则在水解前8h达到最大,随后不断降低;肽的分子量分布趋势总体表现为大分子量的肽逐渐减少,小分子量肽的含量逐渐增多,肽分子量分布图中肽峰值不断向后推移;Alcalase对分子量在3000～15000Da间的肽段降解能力较弱,水解24h后,这部分肽占总肽量的比值仍为89.93%。水不溶性鸡肉蛋白Alcalase酶解产物有明显的清除DPPH活性,其清除DPPH活性在酶解4h时达到最大,随后不断下降;对于同一酶解时间的产物,浓度越大,其清除DPPH活性越强,但其清除DPPH能力并不与酶解液浓度成倍数关系。      

四棱豆蛋白质提取工艺研究

以四棱豆为原料,采用碱溶酸析法,通过正交试验,以凯氏定氮法测得四棱豆蛋白质含量和提取率,对碱溶pH值、酸析pH值、提取温度、料液比4个因素进行优化研究,以寻求四棱豆蛋白质提取的最佳提取方法.结果表明,四棱豆蛋白质提取的最优工艺条件为碱溶pH值10.0,酸析pH值4.0,提取温度35 ℃,料液比1:15( m:v).     

3种还原糖对芸豆清蛋白糖基化改性产物乳化性及结构的影响

将葡萄糖、乳糖、果糖与紫花芸豆清蛋白(kidney bean protein,KPI)进行美拉德反应,并分析美拉德反应产物的乳化性及结构变化。结果表明,可通过与葡萄糖、果糖和乳糖发生美拉德反应来改善芸豆蛋白的乳化活性及乳化稳定性,其中果糖改善效果最好,芸豆蛋白的乳化性由原来的37.52m2/g增加为98.69m2/g,乳化稳定性由16.88min增加到28.68min;芸豆蛋白与还原糖发生美拉德反应后,蛋白空间结构发生变化,表现为表面疏水性增强,表面巯基和总游离巯基含量降低,紫外吸收增加,内部荧光强度降低且发生红移,更利于蛋白吸附到油水界面,增强其乳化性。