碎米荠硒肽的制备及其体外抗氧化活性分析

本文以恩施碎米荠为原料,采用酶法制备具有抗氧化活性的碎米荠硒肽.以蛋白提取率为指标,通过单因素实验和正交试验优化了碎米荠蛋白的提取条件;以DPPH·、ABTS+·清除率为考察指标,优化了碎米荠蛋白的酶解参数,利用超滤设备对碎米荠蛋白酶解液进行分级分离,确定了碎米荠硒肽制备的最佳方案;考察了碎米荠硒肽的还原力、Fe2+螯...     

酶法制备家蝇幼虫抗氧化肽条件的优化

以家蝇幼虫为原料,Alcalase碱性蛋白酶为水解酶,采用五因子二次旋转正交组合设计优化水解条件,用清除DPPH.活性的方法测定水解所得家蝇幼虫肽的抗氧化活性。结果表明,制备家蝇幼虫抗氧化肽的最佳酶解条件为:[E]/[S]=3.62%、温度62.17℃、pH8.20、底物浓度11.71%、时间3.05h。在该水解条件下家蝇幼虫抗氧化肽对DPPH.有很强的清除作用,清除率为86.387%。      

蛴螬酶法制备抗氧化活性肽

建立蛴螬多肽的制备工艺,探究多肽的抗氧化活性。采用酶法将蛴螬制备成蛴螬蛋白水解肽,以蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力为衡量指标,通过单因素试验确定了酶种类、酶虫比、底物浓度、水解体系pH值、酶解温度和时间对蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力的影响。通过正交试验优化蛴螬多肽提取率及其总抗氧化能力,获得最佳酶解工艺,即底物浓度5%、水解体系p H 7、酶解温度40℃。在此试验条件下,蛴螬多肽的提取率为14.21%,总抗氧化能力为0.752 mmol/L。     

酶法制备鸡血抗氧化肽及其抗氧化活性

以新鲜鸡血为原料,采用碱性蛋白酶酶解制备鸡血抗氧化肽。在单因素试验的基础上,以酶解液的还原能力为指标,研究pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对鸡血酶解液抗氧化活性的影响,并运用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法优化制备鸡血抗氧化肽的酶解工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶酶解鸡血的最佳工艺条件为:p H 11.3,加酶量10 335 U/g,酶解温度46℃,酶解时间78 min。在该条件下,鸡血酶解物具有良好的抗氧化活性, 15.0mg/m L的鸡血酶解物DPPH自由基清除率和羟自由基的清除率分别为64.58%和99.2%。     

绿豆抗氧化肽的酶法制备及其抗氧化活性

为提高绿豆淀粉生产过程中产生的废弃物绿豆蛋白的资源利用率,研究了酶法制备绿豆抗氧化肽的最佳条件,并探究其抗氧化活性。通过选用不同蛋白酶及其复合酶,对绿豆蛋白进行水解,综合考虑反应时间、加酶量等因素,对酶解反应进行优化。通过体外抗氧化实验对水解制得的多肽溶液进行抗氧化能力检测,最终确立了最佳的反应条件,具体如下：选用中性蛋白酶进行酶解,底物质量分数3%,酶解时间3 h,加酶量质量分数2%,pH 7,温度50 ℃。按照该条件所制得的绿豆多肽溶液,质量浓度为5 mg/mL时,DPPH自由基清除率可达（91.58±2.44）%,同时还具有较强的还原能力。经凝胶层析柱分离纯化后得到5个分离组分,其中小分子肽段组分5的抗氧化能力最强,高于其他大分子肽段以及未分离多肽。     

双酶法制备银杏抗氧化肽工艺研究

为获得制备银杏抗氧化肽的最佳工艺,采用2709碱性蛋白酶和胃蛋白酶分步水解银杏种仁蛋白,以总还原能力为指标,考察酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间这4个因素对银杏种仁蛋白酶解效果的影响。通过响应面试验得出2709碱性蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为6976U/g、酶解温度为55℃、pH值为8.9、酶解时间为5h,此时银杏种仁蛋白酶解液的总还原能力(A700nm)为1.278;通过正交试验,得到胃蛋白酶的最佳酶解工艺为：酶用量为9000U/g、pH值为3.0、酶解温度为50℃、酶解时间为2h,此时银杏种仁蛋白酶解液的A700nm为1.636。     

碎米蛋白ACE抑制肽制备工艺的研究

研究了以碎米为原料,酶法制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的工艺。采用不同的蛋白酶对碎米蛋白进行水解,以水解液对ACE抑制率为评价指标,结果得出风味蛋白酶为最佳水解酶;通过单因素和正交试验,确定最佳的酶解工艺条件:pH为7.0,酶解温度为55℃,料液比为3%,酶解时间3h,风味蛋白酶酶添加量4000U/g。在此条件下ACE抑制肽的抑制率为85.4%。     

酶法水解荞麦球蛋白制备抗氧化活性肽的研究

分别采用3 种蛋白酶水解荞麦球蛋白,以酶解液水解度和对O2·的清除率为指标,研究酶解荞麦球蛋白的最佳工艺。并进一步对酶解产物进行Sephadex G-25 凝胶柱层析分离,然后对其各分离组分清除O2·、·OH 和DPPH·的能力及分子量分布进行研究。结果显示：采用碱性蛋白酶水解荞麦球蛋白效果优于胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,最佳酶解工艺条件为：加酶量20000U/g,温度55℃,pH9,底物浓度5%,反应时间2h;经柱层析分离得到的分子量小于1000D 的组分Ⅲ显示了较强的抗氧化能力。其清除O2·、·OH 与DPPH·的IC50 分别为0.75、0.897、0.38mg/ml,高于分子量较大的组分Ⅰ和未经分离的荞麦球蛋白酶解液。     

酶法制备鸡肺抗氧化肽及其序列分析

在家禽屠宰工业中鸡肺一般用作低值饲料,为了增加鸡肺的附加值,本文测定了鸡肺的基本化学成分,并通过酶解的方式制备了抗氧化肽.首先以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和肽含量为指标,利用单因素实验探索了酶的种类、pH、酶添加量、酶解时间对鸡肺抗氧化肽活性的...     

高温压榨花生饼粕酶法制备抗氧化肽的研究

以从高温压榨花生饼粕中提取的花生蛋白为原料通过酶解抗氧化肽.研究表明,碱性蛋白酶2709适宜制备花生抗氧化肽.以抗氧化能力为考察指标,采用响应面优化酶解温度、酶解时间、pH和加酶量,获得的最佳酶解工艺为:温度45℃,加酶量为7 885 U/g蛋白,pH 9.40,酶解时间取1.98 h,在此条件获得的抗氧化能力为(70.2±0.63)％.分析水解度和抗氧化活性的关系发现,当水解度控制在18％以下时,增加水解度有利于提高抗氧化活性,但水解度继续上升,抗氧化活性反而有所下降.     

酶法水解碎米制取碎米小分子多肽

以碎米为原料,对蛋白酶水解碎米制取小分子多肽的工艺条件进行了研究。首先采用单因素实验确定影响多肽产率的主要因素及其取值范围。以此为基础,应用响应面法对加酶量、酶解温度、pH三因素进行优化,建立了以多肽产率为响应值的二次回归方程,获得了酸性蛋白水解碎米制取小分子多肽的最佳工艺参数:加酶量5272U/g,酶解温度54℃,pH4.26。在料液比1∶20,酶解2h条件下,多肽产率达到18.92%,接近理论预测值,表明预测模型可靠性较高,可为酶法制取碎米多肽的实际生产提供理论依据。      

酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的研究

为优化Alcalase蛋白酶酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以DPPH自由基清除率作为指标,通过单因素试验考察酶解温度、底物浓度、酶与底物浓度比（[E]/[S]）、酶解pH和时间对DPPH自由基清除率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,建立并分析各因素与清除率之间关系的数学模型;并对酸枣仁蛋白酶解产物的氨基酸组成及含量进行分析。结果表明:酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解温度51.2℃、酶解pH8.1、底物浓度4.7%,在此条件下DPPH自由基清除率的最大理论值为91.59%,该回归模型具有较好的预测性能,可用于指导生产实践。酸枣仁蛋白酶解产物共含有17种氨基酸,富含脯氨酸、甘氨酸和谷氨酸。      

二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

复合酶解裂壶藻渣制备抗氧化肽的工艺研究

以提取油脂后的裂壶藻渣为原料采用蛋白酶进行酶解,以水解度、蛋白回收率及产物抗氧化活性为指标,确定最佳复合酶解工艺。结果表明,在p H为7.5,水解温度为50℃,料水比为1∶12(w/w),加酶量为0.5%(E/S,w/w)条件下,采用复合蛋白酶与Alcalase 2.4 L复配方式(1∶1,w/w)酶解裂壶藻渣6 h后的产物水解效果与抗氧化活性均优于其他单酶或复合酶解产物。在此条件下,酶解产物的水解度为11.15%,蛋白回收率为70.82%,羟自由基半抑制浓度IC50为1.656 mg/m L,还原力为1.417(浓度3 mg/m L),具有较好抗氧化活性。      

酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

本文研究了酶法水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,通过水解度与羟自由基（·OH）清除率来综合评价水解产物的抗氧化能力。以·OH清除率为指标,从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶中筛选最适酶。在单因素实验研究酶浓度、底物浓度与水解时间对酶解产物·OH清除率和水解度影响的基础上,通过L₉（4³）正交实验对水解工艺进行优化。结果得出,碱性蛋白酶活力高于其他4种蛋白酶,能使蛋白质充分水解,正交实验各因素对水解产物·OH清除率的影响程度依次为底物浓度>酶浓度>水解时间。其中,碱性蛋白酶的最佳水解工艺条件为:底物浓度3.0%、酶浓度3500 U/g、p H9.0、温度55℃、水解时间3.5 h。在此条件下,水解产物的·OH清除率可达82.7%,水解度为23.1%。碱性蛋白酶水解滑菇蛋白制备抗氧化肽的工艺可行,为滑菇蛋白高附加值产品的开发提供技术参考。      

海蜇胶原蛋白肽的酶解制备工艺

以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,以还原力(RP)和水解度(DH)为指标,采用响应面法研究了酶解温度、酶解时间、pH、料液比、酶添加量对还原力和水解度的影响,得到最佳酶解胶原蛋白的工艺条件;并进一步与复合酶水解工艺进行比较,确定海蜇胶原蛋白肽的最优制备工艺。结果表明:胰蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH8.5、料液比0.50 g/mL、酶添加量3.0%和酶解时间4 h;风味蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH7.5、料液比0.56 g/mL、酶添加量4.0%和酶解时间4 h;进一步进行复合酶实验,结果表明采用风味蛋白酶和胰蛋白酶分别在其最适条件下进行先后酶解获得的酶解液的DH和RP最高,分别为(71.56%±0.0076%)和(0.341±0.0101)。     

模拟酶解海参蛋白制备抗氧化肽及其抗疲劳活性研究

目的：采用虚拟酶解和传统酶法联用制备海参抗氧化肽,并进一步考察其抗疲劳功效。方法：以海参为原料,借助在线数据库进行虚拟酶解,对水溶性、生物毒性、致敏性等特性预测,筛选制备抗氧化肽最佳的蛋白酶,通过单因素和响应面试验考察反应温度、时间、加酶量、pH、底物浓度对海参蛋白水解度、DPPH清除率的影响,并确定最佳的抗氧化肽制备工艺参数,进一步采用负重游泳试验小鼠模型探讨其抗疲劳功效。结果：经过多轮筛选最终确定蛋白酶K为最佳蛋白酶,在反应时间2 h,加酶量350 U/g的条件下,最佳的优化工艺参数为温度50 ℃、pH 6.4、底物浓度1%,此条件得到的DPPH清除率为64.2±1.1%,与理想值接近,表明该工艺可行性良好。抗疲劳功效研究表明海参抗氧化肽对小鼠体重影响不大,能够明显延长负重游泳时间(P<0.05),显著降低血清尿素氮、乳酸含量,并增加肝糖原、肌糖原储备量(P<0.05),提升运动耐力。结论：本研究通过虚拟酶解和酶法制备了海参抗氧化肽,并通过进一步的研究表明其具有一定的抗疲劳作用。     

大米蛋白抗氧化肽的活性以及组成鉴定研究

采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白制备大米蛋白抗氧化肽。研究表明大米蛋白酶解产物具有螯合金属铁离子、清除H2O2、羟自由基、DPPH自由基、抑制亚油酸自然氧化的作用。通过应用高解析离子淌度质谱（HD-MS）分析鉴定米蛋白抗氧化肽的序列主要为Met-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-His（376.68u）,Leu-Ala-Gly-Pro-Lys-Phe-Ala-Leu（408.75u）和Met-Pro-Arg-His-Asp-Pro-Gln（440.70u）。      

双酶法制备米糠蛋白抗氧化肽

以提取的米糠蛋白为原料,研究其酶解工艺及其水解物的抗氧化活性。选取木瓜蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解制备米糠蛋白抗氧化肽。结果表明,木瓜蛋白酶与风味蛋白酶酶活力之比为1∶1时,清除自由基的效果较佳。选取五个不同的影响因素,进行了酶解工艺的单因素及正交实验。实验结果得出较佳酶解参数为:底物浓度([S])1.5%,加酶量4500U/g,pH6.5,温度45℃,时间3h,在此条件下米糠蛋白水解物对DPPH自由基清除率为58.82%,对羟自由基的清除率为34.78%。      

逆流超声辅助酶解法制备大米ACE抑制肽

研究逆流超声预处理大米蛋白对其碱性蛋白酶酶解制备血管紧张素转换酶(Angiotensin-I Converting Enzyme,ACE)抑制肽的影响。首先从米渣中提取大米蛋白,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、时间、温度、加酶量和pH进行参数优化,在此基础上筛选逆流超声模式的最佳超声参数。结果表明最佳酶解参数为底物浓度30 g/L、加酶量(E/S)7.5%、温度50 ℃、pH8.5和酶解时间60 min,此时酶解产物ACE抑制率为45.59%,水解度为21.49%。最佳超声参数为超声频率20 kHz、功率密度170 W/L、时间12.5 min。此时酶解液ACE抑制率达72.24%,水解度为21.64%,相较于未超声组ACE抑制率提高了57.42%,相较于传统超声组,ACE抑制率提高了11.36%。结果表明逆流超声波辅助酶解法能有效提高酶解效率、减少能耗、促进ACE抑制肽制备。