一株粘质沙雷氏菌的分离和产红色素初步研究

从小麦叶表分离到一株产红色素的菌株y2。用16S rDNA序列分析的方法对这株菌进行菌种鉴定,确定为Serratia marcescens y2,产生色素属灵菌红素类色素。PA培养基中添加2%蔗糖和乳糖,0.5%的葡萄糖能促进其色素产生,但4%葡萄糖显著抑制色素产生;培养温度为28℃产色素量最多,38℃不产色素。     

不同光照、氮源对Serratia marcescens y2生长、产色素的影响

为研究Serratia marcescens y2产生灵菌红素的条件,用固体培养和分光光度法研究不同光照(白光照、黑暗;红、黄、蓝和绿光)、氮源(氯化铵、甘氨酸、硝酸钾、尿素、水解乳蛋白和酵母膏)对细菌生长量和色素产生的影响。结果表明：黑暗培养有利于细菌生长和色素产生;单色光中绿光照射细菌生长量最小,伴有较多色素溢出胞外,色素被氧化程度高,反之红光对生长量影响最小,色素溢出率最低,色素被氧化程度低,说明该菌产红色素吸收绿光最多,光氧化损伤细胞导致色素外溢。氮源中有机氮源均促进细菌生长,除酵母膏外有机氮均增加了细菌色素生产量,其中甘氨酸效果最好,与无机氮源相比,甘氨酸还促使该菌产生不同色素成分,说明甘氨酸能改变色素合成途径,促进色素产量和不同结构色素积累。     

DeoR家族转录因子PsrB调控黏质沙雷氏菌合成灵菌红素

灵菌红素（prodigiosin,PG）,一种由粘质沙雷氏菌产生的次级代谢产物,因其具有抗细菌、抗疟疾、抗肿瘤和免疫抑制等重要功能而备受关注,然而,对黏质沙雷氏菌合成灵菌红素的调控机制的了解依然有限。作者以黏质沙雷氏菌JNB5-1为出发菌株,通过构建Tn5G转座子插入突变文库,发现并解析了DeoR家族转录调控因子BVG90_04085（PsrB）正调控黏质沙雷氏菌合成灵菌红素的分子机制。结果发现,LB培养基中psrB突变株SK8-61和ΔPsrB产灵菌红素能力仅为出发菌株JNB5-1的0.22倍和0.26倍。RT-qPCR分析菌株JNB5-1及ΔPsrB中pig基因簇的表达水平发现,相比于出发菌株JNB5-1,在psrB缺失突变株ΔPsrB中,灵菌红素合成途径关键基因pigABCDEFGHIJKLMN的表达水平下调了5.81~22.93倍。凝胶阻滞EMSA等实验证实转录因子PsrB可直接与pig基因簇启动子区域结合,表明转录因子PsrB正调控黏质沙雷氏菌合成灵菌红素的分子机制可能为：PsrB与灵菌红素合成基因簇启动子区域直接结合,正向调控pig基因簇的转录水平,进而影响黏质沙雷氏菌合成灵菌红素。最后,发酵培养基中psrB过表达菌株JNB5-1/pXW1906可合成8.61 g/L的灵菌红素,为出发菌株JNB5-1（5.53 g/L）的1.56倍。     

复合诱变在红曲色素高产菌株选育中的应用

采用物理与化学复合诱变处理As3．972，经筛选后得到一株产色素能力较出发菌株高的突变株MP60 4，实验证明该菌具有比较稳定的产色素遗传性。     

凯里腌韭菜根中腐败细菌的生长特性研究

为探究凯里腌韭菜根中的5株优势腐败菌巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）、莴苣不动杆菌（Acinetobacfer lactucae）、解淀粉芽孢杆菌（Paenibacillus amylolyticus）、土杨芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）、蜡样芽胞杆菌（Bacillus cereus）的生长特性,研究了5株供试菌在不同温度、pH值、装样量、防腐剂含量以及不同杀菌温度和杀菌时间下的生长状况。结果表明,5株供试菌的最适生长温度为37 ℃,在15 ℃和50 ℃时生长微弱,4 ℃时几乎不生长;最适生长pH值为6.0～6.5;5株腐败菌均为兼性厌氧菌;高温杀菌时,100 ℃灭菌20 min以上才能达到较好的灭菌效果;单一防腐剂苯甲酸钠、乳链菌肽对初始浓度约为500 CFU/mL的供试菌具有良好的抑制效果,其添加的最佳质量浓度为0.2～0.3 g/kg。     

筛选用于四川泡菜生物保鲜的产细菌素乳酸菌

从8 种中国传统四川泡菜中筛选产细菌素的乳酸菌,以用于四川泡菜的生物保鲜。从四川泡菜样品中共分离出227 株乳酸菌,并筛选出8 株能够产生细菌素类化合物抑制英诺克李斯特氏菌（Listeria innocua）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）生长的乳酸菌。其中Lactobacillus harbinensis B22、屎肠球菌E6（Enterococcus faecium E6）和植物乳杆菌E11（Lb. plantarumE11）能够产生抑制革兰氏阴性菌大肠杆菌（Escherichia coli）生长的细菌素类化合物。进一步研究表明,这3 株乳酸菌耐酸、耐高盐,能够在四川泡菜模拟培养基中生长并产生耐酸耐高温的细菌素类化合物。结果表明,Lactobacillus harbinensis B22、屎肠球菌E6和植物乳杆菌E11可用于四川泡菜的生物保鲜。     

高产舍雷肽酶的粘质沙雷氏菌诱变选育

舍雷肽酶是一种来自粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的碱性蛋白酶,具有良好的抗炎和抗肿胀作用,应用于临床疾病的治疗已有多年。为了获得产酶活力高、传代稳定且不产灵菌红素的舍雷肽酶发酵生产菌株,以1株分离自家蚕(Bombyx mori)肠道,产舍雷肽酶的粘质沙雷氏菌LL-413为出发菌株,用紫外线和微波连续诱变,经过筛选,获得了2株产酶能力高,不产灵菌红素,且传代稳定的突变株MW-9和MW-14菌株,产酶活力分别达到982 U/mL和956 U/mL,是原始菌株的1.98倍和1.92倍。     

细菌ZY-H产灵菌红素发酵参数优化

通过正交实验,考察了培养基组成和发酵条件对细菌ZY-H产灵菌红素的影响。结果表明,ZY-H菌最优培养基和发酵条件为:蔗糖10g/L、蛋白胨15g/L,氯化钙0.025mol/L;发酵液初始pH6,接种量为4%,装液量30mL/250mL三角瓶,在温度为28℃,180r/min培养48h时,发酵液中灵菌红素的含量达到28.37g/L,分别是PDA培养基和牛肉膏蛋白胨培养基的19.57、43.11倍,且差异极显著（p<0.01）。研究结果得到了细菌ZY-H高效表达灵菌红素的培养条件,为灵菌红素的工业化生产提供技术资料。      

南京板鸭中产细菌素乳酸菌菌株的筛选鉴定及理化特性研究

试验从5种发酵肉中筛选出1株产细菌素类似物的乳酸菌。这株乳酸菌经16SrRNA鉴定与Weissella hellenica的相似度达99.4%。这株菌产生的细菌素类似物对胰蛋白酶敏感证明其蛋白特性,在121℃加热20min抑菌活性降低26.6%,在p H值2~12均有较好的抑菌效果,对革兰氏阳性菌有明显的抑制作用。经过以上实验表明,这株菌株有作为生物防腐剂的潜力加入到低温杀菌食品中抑制有害微生物生长。     

1株产灵菌红素家族红色色素细菌的分离鉴定及其色素性质研究

对分离自重庆酉阳喀斯特槽谷石漠化地区土壤的1株产红色色素的细菌进行了形态学、生理生化特性和16S rRNA序列鉴定,进一步对该色素的溶解性、抑菌性和稳定性行进了研究,测定了其最大紫外吸收波长;同时,采用硅胶色谱柱对色素进行了纯化,通过薄层层析、质谱和光谱扫描对色素成分进行分析。结果显示,该菌在30℃培养时,色素产量较高。该色素在无水乙醇中的溶解性优于其他有机溶剂,在530 nm处有最大紫外吸收峰;该红色素对大肠杆菌(Escherichia coli)及耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)无抑菌作用;对极端pH值较敏感,尤其是强碱性pH值。且其光和热稳定性良好,耐氧化能力较强,耐还原能力较弱;金属离子对该色素有不同程度的消色作用,Cu~(2+)的消色作用最明显。16S rRNA序列分析结果显示,该菌与多株黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的16S rRNA序列一致。质谱分析结果显示,该色素的分子质量为324.2,与灵菌红素的分子质量非常接近,但光谱扫描结果与其不一致。     

红曲液态发酵生产橙、黄色素及其色调研究

从大量红曲菌中初选出了10株菌落颜色偏黄的菌株,并对其摇瓶发酵所得到的色素提取液进行了分析,探究了其色素的特性。对色素提取液做了全波长扫描,测定了各发酵液色素的吸收峰所对应的波长和OD值,并计算了色价和色调。通过发酵条件的控制,这10株红曲菌的发酵液中主要色素是黄色素、橙色素或橙黄二者所组成的混合色素,而没有红色素。从中挑选出高产黄色素和橙色素的红曲菌株Monascus sp.961和Monascus sp.W1,其发酵液色价分别为200U/mL(黄色素)和436U/mL(橙色素),并对其色素提取液做了硅胶薄层层析分离,进一步明确了这2株红曲菌所产色素的类型。此研究为红曲黄、橙色素的大规模生产开发及应用奠定基础。      

淀粉挤压法焦糖色素生产工艺研究

在以蔗糖为原料采用挤压法生产焦糖色素的基础上,采用正交实验的方法,对以淀粉为原料挤压法生产焦糖色素的工艺进行研究,重点考察了焦糖色素色率、水溶性等指标,确定挤压法焦糖色素的生产条件。     

一株绿色素产生菌的筛选及鉴定

目的:从土壤中筛选绿色素产生菌株并对该菌株进行鉴定。方法:采用平板法分离产绿色素菌株,利用形态、生理生化及分子生物学的方法对菌株进行菌种鉴定。结果:从四川理工学院校园土壤中分离得到一株产绿色素的放线菌t9,在高氏一号培养基上,气生菌丝为灰白色,基内菌丝为绿色。该菌株基因序列与鼠灰链霉菌Streptomyces_murinus_NBRC₁2799（T）相似度为99%,以Neighbor-Joining（N-J）法构建的系统发育树。结论:菌株t9的16S r DNA序列分析结果结合形态学特征及生理生化鉴定,确定该菌株为鼠灰链霉菌属（Streptomyces_murinu）,并将其命名为Streptomyces_murinus t9。      

WD02菌株产红色素的稳定性研究

从温度、pH值、光照、氧化剂及还原剂、金属离子等方面研究WD02菌株所产红色素的稳定性.结果表明,该红色素在低于40℃条件下较为稳定;对光照较为稳定;在pHS～7环境下保存率较高,适用于微酸性食品的着色;该红色素对还原剂很稳定性,而对氧化剂非常不稳定;Cu2+、Zn2+、M2+、K+、Na+等金属离子对红色素有增色效应,而Fe3+、Fe2+和Ca2+等金属离子能破坏WD02菌株红色素水溶液稳定性并造成红色素损失.     

海洋链霉菌M259高产蓝色素理化性质研究

在青岛胶州湾沿海采集样品,对样品进行分离、纯化后获得300株海洋链霉菌,从中检测到一株高产蓝色素的海洋链霉菌M259。本文主要探讨该菌产生的蓝色素的理化性质,研究发现该蓝色素对八株受试菌无抑菌活性,在590nm处有最大吸收峰,水溶性好,光热稳定性强,而且具有耐糖、耐还原性,酸性条件下为红色,碱性条件下为蓝色,对大部分金属离子和食品添加剂稳定,经急性毒理实验证实为实际无毒物质。     

体外评估乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响

该研究以商业菌株鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）LGG为阳性对照菌,体外评估实验室保藏的5株乳杆菌对巨噬细胞RAW264.7细胞活性、吞噬活性及免疫活性分子NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-10（IL-10）分泌水平的影响,以期从中筛选出具良好免疫调节作用的菌株。结果表明,鼠李糖乳杆菌260具有更优的免疫调节作用,在特定乳杆菌活菌浓度时,能显著提高巨噬细胞RAW264.7的细胞活性、吞噬活性及NO、TNF-α和IL-10的分泌水平（P＜0.05）。最高细胞增殖率为196.62%;最低乳酸脱氢酶（LDH）释放量为554.36 U/100 mL;最高吞噬活性为136.86%;最高NO分泌量为5.70 μmol/L;最高IL-10分泌量为15.56 pg/mL,最高TNF-α分泌量为50.98 pg/mL。     

精制氢氧化铝在高品质纸与纸板中的应用

介绍了无机颜料精致氢氧化铝（ATH）的结构特点及性能，以及ATH作为颜料及填料在高品质纸张及特种纸与纸板中替代部分TiO2对纸张性能的影响；介绍了用ATH作新型环保阻燃填料生产阻燃纸张的工艺技术。     

The effect of red pigment on the amyloidization of yeast proteins

The intensity of amyloid-bound thioflavine T fluorescence was studied in crude lysates of yeast strains carrying mutations in the ADE1 or ADE2 genes and accumulating the red pigment (a result of polymerization of aminoimidazoleribotide), and in white isogenic strains--either adenine prototrophs or carrying mutations at the first stages of purine biosynthesis. We found that the red pigment leads to a drop of amyloid content. This result, along with the data on separation of protein polymers of white and red strains in PAGE, suggests that the red pigment inhibits amyloid fibril formation. The differences in transmission of the thioflavine T fluorescence pattern by cytoduction and in blot-hybridization of pellet proteins of red and white [PSI(+) ] strains with Sup35p antibodies confirmed this conclusion. Purified red pigment treatment also led to a decrease of fluorescence intensity of thioflavine T bound to insulin fibrils and to yeast pellet protein aggregates from [PSI(+) ] strains. This suggests red pigment interaction with amyloid fibrils. Comparison of pellet proteins from red and white isogenic strains separated by 2D-electrophoresis followed by MALDI analysis has allowed us to identify 48 pigment-dependent proteins. These proteins mostly belong to functional classes of chaperones and proteins involved in glucose metabolism, closely corresponding to prion-dependent proteins that we characterized previously. Also present were some proteins involved in stress response and proteolysis. We suppose that the red pigment acts by blocking certain sites on amyloid fibrils that, in some cases, can lead in vivo to interfere with their contacts with chaperones and the generation of prion seeds.     

红曲色素高产菌株的高通量选育

该文结合24深孔板微型化培养和酶标仪检测,建立了红曲色素高产菌株的高通量筛选方法,此法简单、快速、准确且自动化水平较高.确定最佳培养条件为装液量1.2mL/孔(每孔体积为10mL),接种量9％;找出红曲色素最大吸收峰值,确定酶标仪检测波长为530nm;通过紫外-氯化锂复合诱变处理,经过高通量筛选获得9株正突变株,其中菌株D39微孔板发酵色价达42.7U/mL,比出发菌株提高了46.2％;将D39分离纯化并用摇瓶验证,得到纯菌株D39-4的摇瓶发酵色价为206.5U/mL,比出发菌株提高了51.1％,具有很好的工业应用前景.     

一株产黄色素海洋真菌的分离、鉴定及黄色素特性的研究

海洋真菌可代谢生成丰富的色素,其中部分色素具有应用于医药或开发为食品添加剂的潜力。本研究从海州湾海域的海泥样品中筛选产黄色素真菌,获得黄色素高产真菌菌株MP-16。通过对该菌株的形态观察和ITS基因序列比对分析,鉴定菌株MP-16为Penicillium citreonigrum。该菌株所产黄色素在330 nm波长处有最大吸收峰,具有良好的光热稳定性,在紫外及自然光下放置36 h,黄色素光吸收值无显著变化;在p H6¹0,20¹00℃下较稳定;该色素对大部分金属离子稳定。本研究结果为Penicillium citreonigrum黄色素的应用提供了理论基础。