氯化锂诱变黑曲霉原生质体选育高产植酸酶菌株

采用氯化锂诱变黑曲霉原生质体,筛选高产植酸酶菌株。获得制备黑曲霉原生质体的最适条件:纤维素酶1.0%,蜗牛酶0.5%,菌龄24 h,酶解温度30℃,酶解时间2 h,渗透压稳定剂0.7 mol/L NaCl。采用氯化锂对制得的原生质体进行诱变,结果表明:经0.15%LiCl诱变后,原生质体存活率为23.37%,此时,获得一株植酸酶活最高的突变株,为19.24 U/mL,比出发菌株提高54.41%,该菌株具有良好的遗传稳定性。     

6328A He-Ne激光对黑曲霉的作用

本文报道了6328AHe-Ne激光对黑曲霉作用的对照实验研究。实验结果表明,照射剂量为2×10~(-3)～2×10~(-2)J/cm~2时,He-Ne激光对黑曲霉孢子有提高存活率的趋势;照射剂量为3.5×10~(-2)～8×10~(-2)J/cm~2时,He-Ne激光对黑曲霉孢子有抑制作用。     

采用He-Ne激光诱变选育速生高产茯苓菌

采用He- Ne激光对茯苓菌F9进行了 2次照射诱变处理 ,选育到 2株生长速率和产量均有较大提高的二次激光诱变株F2 . 10及F2 . 9。它们在PDA平板上培养 4d ,生长速率分别比原始菌株F9提高了 91 .1%和86 .8%。摇瓶发酵周期缩短了 2d左右 ,摇瓶发酵 5d后 ,它们的生物量最高 ,分别达到 39. 1g/ 10 .0mL和 37 .7g/ 10. 0mL ,比原始菌株F9培养 7d的最高生物量 2 .4 g/ 10. 0mL分别提高了 6 2 . 9%和 5 7 .1%。经传代培养分析 ,诱变株的产量性状稳定。表明激光诱变是获得高产茯苓菌的有效途径。     

果胶酶高产菌株的激光选育及发酵条件的优化

利用氦氖激光诱变原生质体筛选到了一株产果胶酶性能稳定且酶活明显提高的突变株ZH-2。其最适发酵条件为：以2％桔皮粉＋1％乳糖作碳源，以1％（NH4）2SO4＋0．3％酵母膏作氮源，在起始pH7．0，33℃摇床发酵32h左右达产酶高峰。分析ZH-2所产果胶酶的性质得出，酶作用最适条件为：pH6．5，50℃，以聚半乳糖醛酸为底物，酶的热稳定性实验显示，50℃保温60min后，酶活力基本不变。     

He-Ne激光诱变选育果胶酶高产菌株

以黑曲霉（Aspergillusniger）为出发菌株,He-Ne激光为诱变剂,在功率为11.2mW,照射时间为30min的条件下对黑曲霉进行激光诱变,经初筛、复筛最后获得一株果胶酶高产菌株。该酶的活力为1618.4个酶活单位,比出发菌株提高了100%,而且该菌株产酶较稳定。      

产植酸酶菌株的筛选

从土壤样品筛选出24株发酵液植酸酶活力超过301U／mL的胞外植酸酶产生菌。经过复筛，发现产植酸酶活力大于1001U／mL的菌株8株，包括霉菌(pH5．5处测定)4株，酵母(pH5．5处测定)4株。霉菌MP004的发酵液酶活力最高达1851U／mL，酵母YP001、YP007、YP010发酵液活力分别达到284、251、2321U／mL。通过pH2．5和pH5．5处酶活力比较确定，酵母分泌的植酸酶为phyB型，霉菌分泌的植酶为phyA型。     

He-Ne激光对啤酒酵母的影响

用He-Ne激光对啤酒酵母进行照射,发现照射5min时,活菌数最高,并且分解糖的能力最强,随着照射时间的延长,活菌数和分解糖的能力也随着下降.另外在计数时,发现平板上出现了大小不均一的菌落,可能有诱变株产生.     

固态发酵生产植酸酶的研究

阐述以AS3.4309为出发菌株,采用紫外线和EB的复合诱变获得植酸酶高产菌AS3.4309-12作为发酵菌株.确定液体种子最佳发酵条件为:发酵温度30℃,摇瓶速度为210 r/rain,装液量为50 mL/250 mL三角瓶,pH5.5,培养基为5%的玉米淀粉和0.5%(NH4)2SO4,孢子接种量2%.确定最佳固态发酵条件:发酵温度30℃,玉米面和麸皮比例4:6,最初pH5.培养基水分51.3%,液体种子接种量5%,发酵时间108 h.     

产复合酶枯草芽孢杆菌QLB6的激光诱变育种

以产复合酶枯草芽孢杆菌QLB6为出发菌株,利用氦-氖(He-Ne)激光进行诱变育种。通过计算存活率和正突变率,确定激光诱变育种的照射剂量。通过透明圈筛选和酶活力测定,筛选获得1株编号为QLB6F的菌株,其纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶酶活力相对于出发菌株分别提高219%、38%和71%。进行30代遗传稳定性实验,证明它具有良好的遗传稳定性,无回复突变。     

黑曲霉原生质体诱变及其产纤维素酶条件研究

采用紫外、硫酸二乙酯及复合诱变3种方法对黑曲霉原生质体进行诱变育种,以提高其酶活。结果表明,采用复合诱变效果最好,复合诱变所得菌株的酶活比出发菌株大幅度提高;应用单因素实验优化突变菌株的产酶条件,其最佳产酶条件培养基为:5%蔗糖、1.4%蛋白胨、0.2%磷酸二氢钾、0.05%硫酸镁,在250 mL摇瓶中装液60 mL,10%接种量、29℃下200 r/min培养96 h,酶活达到最大。     

Production of phytase by Aspergillus ficuum and reduction of phytic acid content in canola meal

Production of the phytase (EC 3.1.3.8) from Aspergillus ficuum in a submerged batch process was inhibited by high concentrations of glucose. The inhibition was overcome by applying a fed batch technique in the production of the enzyme. Tests carried out at different oxygen concentrations revealed that aeration had a beneficial effect on the production of the enzyme. The enzyme showed an optimum pH and temperature of 5·0 and 60°C, respectively. Preincubation of the enzyme preparation at 60°C resulted in relatively fast denaturation of the enzyme. Upon storage at 4°C it lost only 15% of its activity in 5 weeks. Aspergillus ficuum also produced phytase when grown on canola meal by a solid state technique. The enzyme catalysed degradation of the phytic acid present in the meal and completely eliminated it, rendering the commodity more suitable for animal feed. An apparent 10% increase in protein content of the canola meal was noted as a result of the growth of the microorganism.     

超高压对洛伐他汀生产菌株的诱变研究

为了选育出生产用的高产洛伐他汀菌种,利用超高压对土曲霉出发菌株进行诱变处理,并基于粗糙脉胞菌对洛伐他汀的生物敏感性,对菌株进行初筛,再通过HPLC法检测进行复筛.研究表明,培养3d的菌株处于对数生长期,适宜于试验;压力值为200MPa时能获得最大的诱变率.成功的选育出一株高产洛伐他汀的突变菌株,其抑菌圈直径达25.5mm,比对照高出37.8%;洛伐他汀产量达2.89mg/g,比对照高出18.9%,这一突变菌株具有挖掘潜力,并用于工业生产.     

紫外线和硫酸二乙酯诱变高产凝乳酶地衣芽孢杆菌的研究

以产凝乳酶地衣芽孢杆菌为出发菌株,通过紫外线诱变和硫酸二乙酯诱变,提高菌株的凝乳活力。经反复诱变筛选获得一株凝乳活力较高且水解活力较低的突变株DES-6,其凝乳活力为184.65SU/mL,比原菌株增加了15.41%,水解活力为23.35U/mL,比原菌株降低了64.80%。传代实验表明,突变株DES-6具有稳定的遗传性。     

不同发芽条件对大麦中植酸含量及植酸酶活力的影响

大麦发芽过程中,发芽温度、浸麦水pH值及浸麦水中金属离子的种类和含量是影响大麦中植酸含量及植酸酶活力的重要因素。实验发现,当发芽温度为16℃时,植酸酶较高温和低温发芽更早的被激活,其活力达到4.032 8U/g(绝干),更加有利于植酸的分解;在浸麦水为中性条件下浸麦,植酸酶活力上升较快,植酸含量迅速下降;在浸麦期间添加Ca2+、Mg2和Fe3+等金属离子对植酸酶的活力有较大抑制作用。     

高蛋白酶酶活酱油发酵用米曲霉的复合诱变选育

以市售曲精分离菌株米曲霉CS3.03为出发菌株,经UV—DES复合诱变处理,采用酪素平板法及琼脂块法进行初筛,结合Folin—酚法复筛结果对比其初筛效果,低盐固态发酵试验测试高蛋白酶酶活突变株的发酵性能,传代试验测试其遗传稳定性。结果表明:琼脂块法的初筛效率明显高于酪素平板法;对初筛菌株进行制曲复筛,获得5株有生产潜力的高蛋白酶酶活突变株,酱油发酵试验结果证明突变株氨态氮含量、全氮利用率均高于出发菌,其中突变株P7、Y5发酵制得酱油氨态氮含量分别提高14.56%,11.26%,全氮利用率分别提高3.83%,4.09%;遗传稳定性测试证明P7具有良好工业应用价值且遗传稳定性好,其蛋白酶酶活平均为4 994.18U/g干基,比出发菌株提高173.92%。