寇氏隐甲藻不同破壁方法的研究

寇氏隐甲藻是海洋微藻的一种,在寇氏隐甲藻的细胞油脂中,二十二碳六烯酸的含量高达30%～50%。但长期以来,因为微藻的细胞壁很难破碎,导致油脂的提取率不高。运用超声波法、生物酶法,反复冻溶法等方法,对寇氏隐甲藻进行了破壁研究。结果表明,这些方法都对寇氏隐甲藻都具有一定的破壁作用,破壁后油脂的提取率也有了不同程度的提高,把酶法破壁和超声波法破壁结合起来,在酶解5 h后,再超声波1 h,破壁率可高达91.7%,油脂提取率提高了21.7%,破壁效果更为理想。     

寇氏隐甲藻突变株发酵条件的响应面优化

为了得到寇氏隐甲藻突变株的最佳发酵条件.先通过单因素试验考察接种量、培养时间、培养温度、装液量、培养基初始pH值等因素对二十二碳六烯酸产量的影响,在此基础上选择接种量、培养基初始pH、装液量为主要影响因素,通过Box-Behnken设计,得到最优发酵条件为接种量9.2％,初始pH值为6.9,装液量为65 mL/500 mL时,DHA产量最大为5.81 g/L,优化后DHA的产量比优化前提高了13.28％.     

隐甲藻发酵产DHA最佳无机盐浓度的确定

探讨了在摇瓶条件下 ,NaCl、Mg2 、PO4 3 对隐甲藻生长、油脂和DHA积累的影响 ,确定了它们的最适浓度。NaCl的最适浓度为 0 9g/L ,KH2 PO4 的最适浓度为 0 8g/L ,Mg2 的最适浓度为12mmol/L ,此时 ,单位体积DHA产率较高     

响应面法优化隐甲藻产DHA的培养基

利用响应面法优化隐甲藻产DHA的培养基,在8种因素的单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计筛选出葡萄糖和胰蛋白粉为显著影响因子,维持其他组分浓度在低水平不变,对以上2因子爬坡逼近最大响应区域后利用中心组合设计和响应面分析得到最高点和主要因子的浓度。优化后的培养基组成为:葡萄糖30.54g/L,胰蛋白粉5.03g/L,酵母粉4g/L,甘油20g/L,不添加MgCl2和维生素溶液,其他组分同460培养基,在此培养基条件下,DHA产量达(907.54±1.02)mg/L,是优化前产量的2.48倍。     

寇氏隐甲藻突变株的糖、氮代谢对产油的影响

为了探索在寇氏隐甲藻(crypthecodinium cohnii)突变株的营养生长和油脂积累过程中对碳源和氮源的需求及其影响。通过对照组和5个不同的补糖试验组进行研究,各组经发酵7 d收获,并测定生物量、含油量、DHA含量和DHA产量。结果显示各组在发酵培养24 h时,碳消耗量约为22.5%,氮耗约为50%。随着不同时间的补糖,测定碳耗和氮耗虽有小幅度升降,但在144~168 h时碳耗、氮耗和碳/氮比基本稳定,各组间差异较小。研究表明,前72 h是寇氏隐甲藻生长的重要时期,当碳/氮比在15∶1左右时补糖最佳;当氮源耗尽时补糖不仅可以促进油脂的产生,而且对DHA的形成也是有利的。     

稀土元素对隐甲藻生长和产DHA的影响

利用稀土元素对隐甲藻的生长和产DHA的影响进行研究。结果表明:低浓度时,La3+、Nd3+对隐甲藻的生物量和DHA产量均有显著提高,细胞增大;Ce3+提高了脂质DHA含量;Sm3+影响不大;高浓度时均抑制生长和DHA合成。La3+、Ce3+配合使用明显提高DHA产量,培养基中添加Ce3+、La3+分别为6mg/L和24mg/L时,可使DHA含量达到(1194.17±1.09)mg/L,提高了33.35%±0.09%。     

稀土元素对隐甲藻生长和产DHA的影响

利用稀土元素对隐甲藻的生长和产DHA的影响进行研究。结果表明:低浓度时,La3+、Nd3+对隐甲藻的生物量和DHA产量均有显著提高,细胞增大;Ce3+提高了脂质DHA含量;Sm3+影响不大;高浓度时均抑制生长和DHA合成。La3+、Ce3+配合使用明显提高DHA产量,培养基中添加Ce3+、La3+分别为6mg/L和24mg/L时,可使DHA含量达到（1194.17±1.09）mg/L,提高了33.35%±0.09%。      

响应面法优化寇氏隐甲藻突变株的发酵培养基

对寇氏隐甲藻突变株产DHA的发酵培养基进行响应面优化。首先用Plackett-Burman试验筛选出影响显著的3个因素,再利用最陡爬坡试验和响应面试验对培养基进行优化并建立二次多元回归模型,最后用优化后的发酵培养基在50 L发酵罐上进行放大试验。结果表明在最佳培养基葡萄糖121.41 g/L,谷氨酸钠11.54 g/L,硫酸镁7.25 g/L时,DHA的产量为5.65 g/L发酵液,比优化前提高了10.35%。在50 L发酵罐上发酵培养,DHA产量为9.50 g/L发酵液,为摇瓶培养时的1.68倍。     

植物油对隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)生长和DHA产量的影响

研究了植物油对隐甲藻 (CrypthecodiniumcohniiATCC30 5 5 6 )生长及DHA产量的影响。结果表明 :培养基中添加 1% - 2 %橄榄油或大豆油均可促进隐甲藻生长及增加DHA产量 ;添加 1%- 5 %花生油对隐甲藻生长及DHA产量影响不大。以获得DHA为目的 ,则培养基中添加 1%的橄榄油或大豆油即可     

隐甲藻(Crypthecodium cohnii)悬浮培养生产DHA

研究了培养温度、初始 pH、碳源及氮源等对隐甲藻 (CrypthecodiniumcohniiATCC3 0 5 5 6)悬浮培养生产DHA影响 .通过正交试验得到的优化培养基组成为 (g/L) :葡萄糖 2 0 ,甘油 2 0 ,蛋白胨 5 ,KNO3 5 ,NaCl6,MgSO41 .6,KH2 PO41 .0 ,VH 0 .0 0 6,VB12 0 .0 0 1 ,另外添加 1mL/L橄榄油 ,6mL/L丙酮酸 .优化培养条件为 :5 %接种量 ,初始 pH 7.0 .黑暗条件培养 ,装液量为 5 0 0mL三角瓶装 5 0mL培养基 ,3 0℃培养 3 2h后转到 2 0℃培养直至收获 .在优化培养基配方和培养条件下 ,隐甲藻悬浮培养 64h后 ,生物量和DHA产量分别为 1 0 .78g/L和 1 .2 1 g/L .     

利用Crypthecodinium cohnii高密度发酵生产DHA的流加策略研究

利用流加策略实现了隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)生产DHA的高密度发酵。根据隐甲藻间歇式发酵的特性,探讨最佳补料时间及流加液中最佳碳氮比,结果表明,在葡萄糖浓度降至4g/L左右时流加碳氮比为30∶1的营养液对隐甲藻的生长和脂肪酸积累最有利。根据以上结果,初始葡萄糖浓度25g/L,采用5d连续发酵多次流加策略,细胞干重达6.37%,DHA产量为4.08g/L。     

生防菌枯草芽孢杆菌BS-Z的分批发酵动力学初探

对分离得到的一株对柑橘采后绿霉病、青霉病有良好生防作用的枯草芽孢杆菌(BS-Z)进行了70-L发酵罐分批发酵实验,在分批发酵实验中,分别采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程和Luedeking-Piret-like方程,研究了该菌株的菌体生长、抑菌物质形成以及底物消耗等特性,得到了描述分批发酵过程的动力学模型和模型参数,模型计算值与实验数据拟合度分别为0．9934、0．8312、0．9455。模型基本反映了该生防菌株分批发酵过程的动力学特征。     

低温淀粉酶发酵动力学模型的研究

本实验分别利用 Logistic 方程和Luedeking-Piret 方程描述低温淀粉酶产生菌LA7 的发酵过程,建立菌体生长、低温淀粉酶生成和底物消耗的动力学模型,对模型预测值与实验值进行比较。结果表明,模型能较好地拟合发酵过程,具有良好的适用性。     

微生物发酵法生产DHA的研究

DHA是一种人体必需多不饱和脂肪酸。对人体健康有重要意义，微生物发酵法生产DHA具有稳定性好、易于分离纯化和工业化等优点，是近年来研究的热点。本文通过对破囊壶菌ATCC34304等四株菌的发酵液的分析，发现ATCC34304易于培养且DHA含量高。对ATCC34304的发酵培养基组分和发酵条件进行进一步研究后得出。在以淀粉为碳源的培养基中，28℃ 170r／min摇床光照培养6d。DHA含量达320．1mg／L。