Die gaschromatographische Bestimmung von Sorbins?ure in Futtermitteln

Zusammenfassung Es wird eine Methode zur gaschromatographischen Bestimmung von Sorbinsäure in Futtermitteln beschrieben. Nach Extraktion wird die Sorbinsäure ohne weitere Reinigung des Extraktes mit N,O-Bis-Trimethylsilyl-acetamid silyliert. Die mittlere Wiederfindung lag bei 96%, für 0,1% Sorbinsäure errechnete sich aus 11 Bestimmungen eine Standardabweichung von 0,0038.

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Gaschromatographic determination of sorbic acid in feed-stuffs

Summary A method for gaschromatographic determination of sorbic acid in feed-stuffs is described. After extraction the sorbic acid is silylated by N,O-Bis-Trimethysilylacetamid without any clean-up. The mean recovery was 96%, the standard deviation 0,0038 for a content of 0,1% sorbic acid.[/p]

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Die Arbeit wurde mit Unterstützung der Deutschen Forschungsgemeinschaft durchgeführt.     

Die Wirkung von Sorbins?ure auf Saccharomyces cerevisiae

Zusammenfassung Zellen vonSaccharomyces cerevisiae adsorbieren innerhalb kurzer Zeit Sorbinsäure. Die Menge der adsorbierten Säure ist abhängig von der Hefemasse und der Sorbinsäurekonzentration. Da bei pH 3 wesentlich mehr Sorbinsäure adsorbiert wird als bei pH 7, kann angenommen werden, daß die undissozüerten Moleküle adsorbiert werden. Es kommt jedoch nicht zu einer Anreicherung von Sorbinsäure in den Hefezellen, denn sofern kein Abbau erfolgt, kann die Säure nach einigen Tagen quantitativ im Medium wiedergefunden werden. Durch die Adsorption wird die Sorbinsäurekonzentration im Bereich der Zellen erhöht, was wahrscheinlich für die Hemmwirkung von Bedeutung ist. Unabhängig vom pH-Wert des Mediums wird von Hefen ein Teil der Sorbinsäure abgebaut bzw. so verändert, daß ein analytischer Nachweis auf Grund der UV-Absorption nicht mehr möglich ist. —Bei Gegenwart von Sorbinsäure (100 mg/l) wachsende Hefezellen neigen zur Pseudomycelbildung. Es wird die Möglichkeit diskutiert, daß die Störung des Sproßvorganges durch Reaktion der Sorbinsäure mit Thiolgruppen der Zelloberfläche bewirkt wird. In Übereinstimmung mit dieser Vorstellung stehen Versuche, bei denen die Hemmung des Hefewachstums durch Sorbinsäure bei Gegenwart von Cystein oder Glutathion vermindert wird.

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The action of sorbic acid on Saccharomyces cerevisiaeII. Adsorption, Desorption and Metabolism of Sorbic Acid

Summary Cells ofSaccharomyces cerevisiae adsorb sorbic acid within a brief period. The amount of acid adsorbed depends on the yeast cell mass and sorbic acid concentration. As much more sorbic acid is adsorbed at pH 3 than at pH 7 it may be assumed that it is the undissoziated molecules that are adsorbed by the yeast cells. However, no accumulation of sorbic acid is observed with in the yeast cells, for the acid is quantitatively present in the medium after an incubation of several days, if no degradation has occurred. The concentration of sorbic acid is greatly increased within the space surrounding the cells by adsorption; this is most likely of importance for the inhibition of cell growth. A small part of the sorbic acid is decomposed by the yeast cells, independent of the pH of the medium. The mode of degradation is unknown, but this part of sorbic acid is converted into a form that cannot be analyzed by UV-absorption. Yeast cells growing in the presence of sorbic acid (100 mg/l) tend to produce pseudomycelium. It is theorized that the disturbance of cell growth may be caused by a reaction of sorbic acid with thiol groups of the surface of the yeast cell.

     

Die Wirkung von Sorbins?ure auf Saccharomyces cerevisiae

Zusammenfassung Sorbinsäure at sowohl wachstumshemmende als auch abtötende Wirkung auf Hefezellen. Der Umfang der Hemmung ist abhängig von der Sorbinsäurekonzentration und den Kulturbedingungen sowie von der Keimzahl. Das Wachstum und der Stoffwechsel werden verschieden stark beeinflußt. Bei geringen Sorbinsäurekonzentrationen (50–100 mg/1) ist die Zellvermehrung weniger Hefezellen deutlich beeinträchtigt, während das Gärvermögen dieser Zellen noch nicht verändert ist. Hefezellen, die eine bestimmte Zeit 500 oder 1500 mg/1 Sorbinsäure ausgesetzt waren, keimen auf Glucoseagar ohne Sorbinsäure nicht mehr aus. Gärungs- und Atmungsvorgänge intakter Hefezellen werden durch Sorbinsäure viel weniger beeinträchtigt als das Zellwachstum. So konnte nachgewiesen werden, daß die Gesamt-CO₂- und Alkoholbildung bei pH 4 bis zu einer Konzentration von 500 mg/l Sorbinsäure nicht verändert wurden. Da die CO₂-Bildung aus Glucose von zellfreien Extrakten auch durch hohe Sorbinsäurekonzentrationen nicht gehemmt wird und auch einige Enzyme der Glykolyse, (Aldolase, Enolase und Pyruvatdecarboxylase) durch Sorbinsäure nicht gehemmt werden, wird angenommen, daß Sorbinsäure vor allem durch Beeinflussung der Zellmembran und der Aufnahme von Substrat auf die Hefezellen wirkt.

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The action of sorbic acid on saccharomyces cerevisiaeI. Effect on growth and the aerobic and anaerobic metabolism of glucose

Summary Sorbic acid inhibits the growth of yeasts and leads to the death of the cells. The degree of effect of sorbic acid depends on its concentration, the culture condition, and the number of yeast cells present. Growth and metabolism of yeast are influenced to varying degrees. Low concentrations of sorbic acid (50–100 mg/1) cause a significant inhibition of the growth and multiplication of yeast cells, without showing an influence on fermentation. Yeast cells that have been exposed for a short time to concentrations of 500 to 1500 mg/1 sorbic acid are killed and therefore unable to form colonies on sorbic acid free growth media. The fermentation and respiration of resting yeast cells is much less influenced by sorbic acid than cell growth. It was demonstrated that the total amounts of CO₂ and ethanol produced by yeast cells were not affected by concentrations of up to 500 mg/l sorbic acid at pH 4.0. The formation of CO₂ from glucose by cell free extracts ofSaccharomyces cerevisiae was not inhibited by 3 000 mg/l sorbic acid. Similarly the enzymes aldolase, enolase and pyruvate decarboxylase were not inhibited by high concentrations of sorbic acid. Therefore it is assumed that sorbic acid acts on the yeast cell mainly by influencing its cell membrane and its permeability.

     

Analyse von Konservierungsstoffen in fetthaltigen Lebensmitteln mittels HPLC

Zusammenfassung Es wird eine Methode beschrieben, die die gleichzeitige Bestimmung von Benzoe- und Sorbinsäure sowie der Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-und Heptylester der p-Hydroxybenzoesäure (PHB-Ester) in fetthaltigen Lebensmitteln gestattet. In einigen günstigen Fällen kann auch o-Phenylphenol im gleichen Chromatogramm mit bestimmt werden. Die Methode besteht aus einer aufeinander abgestimmten Kombination von Extraktionsschritten und einer isokratischen HPLC auf Kieselgelsäulen mit UV-Detektion. Der Vorteil der Methode besteht darin, daß die beiden Säuren und die PHB-Ester in Gegenwart von Fett gemeinsam bestimmt werden können. Lösungsmittelgradienten und zusätzliche Probenaufarbeitungsschritte für fetthaltige Lebensmittel wie z. B. die Abtrennung der Konservierungsstoffe vom Fett und/oder die Vortrennung der Säuren von den PHB-Estern werden nicht benötigt.

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Analysis of preservatives in fatty foods by HPLC

Summary A method is described that permits the simultaneous determination of benzoic and sorbic acid and the methyl, ethyl, propyl, butyl and heptyl esters of p-hydroxybenzoic acid. In a few favourable cases orthophenylphenol can also be determined by the same chromatogram. Isocratic HPLC equipment is used.The advantage of this method is that the two acids and the PHB esters can be determined together in the presence of fat. Gradients and additional sample preparation steps involving the separation of the preservatives from fat and/or the separation of the acids from the esters or vice versa are not required.

     

Zur quantitativen Bestimmung von Konservierungss?uren in Lebensmitteln

Zusammenfassung Eine rasche Bestimmungsmethode der Konservierungssäuren Sorbinsäure, Benzoesäure und Dehydracetsäure wird beschrieben. Die Konservierungssäuren werden zusammen mit Adamantan-1-carbonsäure als inneren Standard mit Methylisobutylketon aus einer wässrigen Suspension bzw. Lösung des Lebensmittels extrahiert. Nach dem Abtrennen der Säuren aus dem org. Lösungsmittel als Alkalisalze werden diese in Ameisensäure aufgenommen und gaschromatographisch bestimmt. Ein modifiziertes Säulenfüllmaterial wird verwendet.

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On the quantitive determination of acids in food preservation

Summary A rapid method is described for the determination of the food preservatives sorbic acid, benzoic acid and dehydroacetic acid. These acids are extracted together with adamanthin-l-carboxylic acid as internal standard with MIBK from the aqueous suspension resp. solution of the food. After separation of the acids from the organic solvent as their alkali salts, they are disolved in formic acid and determined by gas liquid chromatography. A modified g.c.-packing is used.

     

M?glichkeiten der analytischen Erfassung von Konservierungsstoffen in Lebensmitteln

Zusammenfassung Die in der Bundesrepublik Deutschland zugelassenen Konservierungsstoffe Ameisen-, Propion-, Benzoe- und Sorbinsäure sowie die p-Hydroxybenzoesäureester werden aus dem Lebensmittel nach Ansäuern durch Perforation mit Ather vollständig abgetrennt und in einer alkalischen Vorlage gebunden. Dieser alkalische Extrakt kann direkt für die beschriebenen photometrischen (Teil I) oder chromatographischen (Teil II) Bestimmungsverfahren eingesetzt werden.Für Ameisen-, Sorbin- und Benzoesäure und die PHB-Ester werden z. T. neue Farbreaktionen aufgezeigt, die eine spezifische und schnelle photometrische Bestimmung ermöglichen. Ausgehend vom alkalischen Extrakt läßt sich nach dünnschichtchromatographischer Trennung auf Kieselgel der Gehalt an, Benzoe-, Sorbin- und p-Hydroxybenzoesäureester (als freie Säure) direkt auf der Platte durch Messung der Demission bei 232 nm und 260 nm sowie durch Messung der Fluorescenzminderung ermitteln.

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Various methods for the determination of preservatives in foodI. Extraction and spectrophotometric determinations

Summary In the Federal Republik of Germany formic acid, benzoic acid, propionic acid, sorbic acid and the esters of p-hydroxybenzoic acid ware permitted as food-additives. They can be extracted together from acidified materials by means of perforation with ether. During distillation the preservatives are fixed by sodium hydroxide. The alkaline extract can then be used directly for various photometric (Part I) and chromatographic (Part II) determinations. All preservatives except propionic acid can be identified and determined by simple and specific color reaction. From the alkaline extract, benzoic acid, sorbic acid and the esters of p-hydroxybenzoic acid can be separated as the free acid by thin-layer chromatography on silica gel. Determination of the remission at 232 nm and 260 nm and of the reduction in fluorescence are employed for the photometric in situ evaluation of the thin-layer chromatograms.

     

Analysis of acesulfame-K, saccharin and preservatives in beverages and jams by HPLC

Summary A method is described that permits the simultaneous determination of acesulfame-K, saccharin and benzoic and sorbic acid in beverages and jams. The results of the HPLC analysis, using an RP-C 18 separation system with UV detection at 227 nm are reported.

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Analyse von Acesulfam-K, Saccharin und Konservierungsstoffen in Getränken und Marmelade mittels HPLC

Zusammenfassung Es wird eine Methode beschrieben, die die gleichzeitige Bestimmung von Acesulfam-K, Saccharin und Benzoe- und Sorbinsäure in Getränken und Marmelade. Die HPLC-Analyse erfolgt mit Hilfe eines RP-C18-Trennsystems und der UV-Detektion bei 227 nm.

     

The influence of wine additives on colour and colour quality of young red wine

Summary Zweigelt 1987, a typical Austrian wine treated with wine additives such as sulphur dioxide,l-ascorbic acid and sorbic acid was stored for 77 days. All characteristic wine components were analysed during the storage period. Only changes in colour could be detected. The changes in the amount of anthocyanins and anthocyanidin chlorides were analysed. The results show that Zweigelt 1987 mixed with wine additives such asl-ascorbic acid or sorbic acid resulted in a larger loss in colour than untreated wine. The changes could be measured photometrically but they were invisible to the naked eye. Appropriate use of wine additives did not appear to deterioriate the ruby colour of young red wine during the period tested.

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Der Einfluß von Wein-Zusatzstoffen auf Farbe und Farbqualität von jungem Rotwein

Zusammenfassung Österreichischer Wein Zweigelt 1987, welcher für die Versuchsreihe unter authentischen Bedingungen hergestellt worden war, wurde mit Weinbehandlungsmitteln wie Schwefeldioxid, Sorbinsäure undl-Ascorbinsäure versetzt. Die Wechselwirkungen der Farbe des Rotweines mit den zugesetzten Chemikalien wurden während einer Lagerzeit von 77 Tagen studiert. Die Anthocyane und Anthocyanidinchloridmengen wurden bestimmt. Die Ergebnisse zeigen, daß Zweigelt 1987, der mitl-Ascorbinsäure bzw. Sorbinsäure versetzt worden war, etwas größere Farbverluste zeigte als unbehandelter Wein. Abschließend wurde festgestellt, daß die Farbveränderungen zwar photometrisch meßbar sind, aber mit freiem Auge nicht erkannt werden. Eine Verwendung dieser Weinbehandlungsmittel in richtiger Dosierung führt zu keiner Verschlechterung der Farbqualität bei jungem Rotwein über den untersuchten Zeitraum.

     

Isotachophoretische Bestimmung von Konservierungsstoffen

Zusammenfassung Die Konservierungsstoffe Sorbinsäure, Benzoesäure, PHB-Ester und Propionsäure können nebeneinander in einem Analysengang nach einer isotachophoretischen Trennung auf Grund ihrer unterschiedlichen Beweglichkeiten quantitativ bestimmt werden. Störende Lebensmittelinhaltsstoffe (Lipide) werden vor der eigentlichen Bestimmung durch Äther-Extraktion unter Verwendung von Extrelut-Säulen entfernt. Der hier mitgeteilte Analysengang zeichnet sich nach unserer Erfahrung durch einen geringen zeitlichen Aufwand bei gleichzeitig hohen Wiederfindungsraten aus. Zumindest bei den von uns untersuchten Lebensmittelgruppen konnte eine Störung der quantitativen Bestimmung durch Begleitsubstanzen nicht beobachtet werden. Der erfaßte Bereich ist groß und bestreicht praktisch das ganze Konzentrationsgebiet, in dem Konservierungsstoffe üblicherweise angewendet werden.

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Isotachophoretic determination of preservatives

Summary The preservatives sorbic acid, benzoic acid, methyl-, ethyl-, propylester of p-hydroxybenzoic acid and propionic acid can be determined quantitatively in one step by isotachophoretic separation based on the different electrophoretic mobilities of these compounds. The determination involves a direct extraction step in the so called Extrelut-columns, where the preservatives are separated from the food sample, mainly from the lipid phase. The whole analysis procedure is short and recoveries for the preservatives in the samples tested are very good. There is no interference by other substances and the range of concentrations for which a determination is possible is large and encompasses virtually all concentrations used in commercial practices.