提取条件对大豆11S 球蛋白得率及纯度的影响

以低脂质含量豆粕为原料,探讨大豆11S球蛋白分级分离过程中提取条件(pH值、还原剂和冷沉时间)对蛋白得率及纯度的影响。结果表明：将浸提液pH值由6.2调至6.6时,大豆11s球蛋白的得率降低了16.71%,而纯度提高了4.60%。随着浸提pH值的提高,蛋白质的巯基与二硫键含量增加。与二硫苏糖醇(DTT)或β-巯基乙醇(ME)相比,在pH6.4的浸提液中添加亚硫酸氢钠(SBS),大豆11s球蛋白的得率最高。而DTT、ME和SBS还原剂中,使用DTT时的11S球蛋白组分得率与纯度最低。在蛋白沉淀阶段,当冷沉时间为10h时,蛋白的得率与纯度最佳,随着冷沉时间的延长(12～16h)巯基与二硫键总量并无显著差异(P≥0.05),而部分巯基发生氧化形成二硫键,大豆11S球蛋白游离巯基含量降低。     

等电点冷沉法分离大豆11S的研究

研究等电点冷沉法提取与分离低温脱脂大豆粕中11S的方法,优化11S冷沉条件,并利用SDS-PAGE凝胶电泳来评定不同条件下分离大豆11S的纯度。通过试验确定的最佳工艺条件是:pH 6.2、冷沉时间10 h、加酸搅拌速度30r/min。11S纯度达76.14%,得率40.8%。     

中国水牛乳中α-乳白蛋白活性分离方法比较

以水牛乳为原料,离心分离脂肪,再采用等电点缓慢酸沉去除酪蛋白,结合铁盐沉淀法和钙盐沉淀法两种方法分别对乳清蛋白中α-乳白蛋白进行活性分离,在保证α-乳白蛋白分离纯度的同时,对其活性和得率分析检测.结果显示,铁盐沉淀法分离α-乳白蛋白时,在pH4.5～4.7的酸性条件下采用质量分数0.04％的铁盐分离α-乳白蛋白保证α-乳白蛋白纯度达到电泳纯的同时,其活性比例和得率分别达到44.68％和21.06％;而在pH7.0的中性条件下采用质量分数0.005％的铁盐分离α-乳白蛋白也可保证α-乳白蛋白的纯度达到电泳纯,此时,其活性比例和得率分别达到64.00％和13.23％.钙盐沉淀法可很好地保持α-乳白蛋白的活性,但分离纯度过低.     

7S和11S大豆球蛋白的分离研究

本研究选择低温脱脂大豆粕为原料,提出并采用碱提酸沉膜分离法来分离7S和11S大豆球蛋白,通过SDS-PAGE电泳鉴定分离纯度,并与传统的几种方法比较分离效果.结果表明,碱提酸沉膜分离法的分离效果明显优于传统的方法,所得的7S和11S大豆球蛋白的纯度可以分别达到75.5%和84.7%.     

冷沉法制备花生球蛋白及伴花生球蛋白工艺研究

以花生球蛋白提取率为指标,对冷沉法提取花生球蛋白及伴花生球蛋白进行工艺优化。在单因素的基础上,经2次提取,通过L9(43)正交试验设计确定最佳提取工艺,结果表明,影响花生球蛋白提取率的各因素显著程度:冷沉时间料液比磷酸缓冲溶液浓度溶液pH。最佳提取条件为:料液比5∶10、溶液pH7.1、磷酸缓冲溶液浓度0.4 mol/L、冷沉时间4 h。在此条件下花生球蛋白的提取率为53.60%。花生球蛋白提取后的上清,即为伴花生球蛋白。研究发现,不同冷沉次数对花生球蛋白组分纯度影响不显著,直接干燥上清比上清酸沉后制备的伴花生球蛋白蛋白含量要低,但是组分纯度无显著差异。真空冷冻干燥制备的花生球蛋白组分纯度76.40%,伴花生球蛋白组分纯度64.10%;喷雾干燥制备的花生球蛋白组分纯度74.30%,伴花生球蛋白组分纯度62.73%,不同干燥方式对花生蛋白组分纯度影响显著(P0.01)。     

大豆过敏原β-伴大豆球蛋白提取纯化工艺研究

大豆蛋白具有丰富的营养价值,而其致敏性却给大豆敏感人群带来了极大的危害。其中7S伴大豆球蛋白是一种主要过敏原。本实验采用碱溶酸沉法从大豆中分离纯化出β-伴大豆球蛋白(7S伴大豆球蛋白)。通过设置浓度、料液比、pH、提取液的单因素对比实验,研究对大豆球蛋白提取的影响,并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对提取的7S伴大豆球蛋白进行了纯度分析。结果显示,使用pH9.0、浓度为0.10 mol/L的Tris-HCl缓冲液在料液比1︰18的条件下,7S伴大豆球蛋白提取率为47%。     

文冠果油渣中蛋白质的提取工艺研究

分析了文冠果蛋白的氨基酸组成,并以文冠果压榨油渣为原料,采用单因素实验和正交实验优化了碱溶酸沉法提取文冠果蛋白的工艺条件。结果表明：文冠果蛋白含有18种氨基酸,其中谷氨酸(14.25%)、精氨酸(6.00%)和天门冬氨酸(5.08%)的含量较高;采用碱溶酸沉法提取文冠果蛋白的最佳工艺条件为料液比1∶30、提取pH 9、提取时间150 min、提取温度60℃,在此条件下提取2次,蛋白质得率为22.58%;酸沉分离蛋白质的最佳pH为4.6,此条件下蛋白质沉降率为94.67%;通过碱溶酸沉法可使文冠果蛋白的纯度从38.46%提高到84.03%。     

从花生蛋白粉中提取花生分离蛋白的条件优化

采用碱提酸沉法从脱脂花生蛋白粉中提取花生分离蛋白,通过单因素试验和正交试验优化了提取工艺条件,确定最佳工艺条件为:浸提温度60℃,料液比1∶9,pH 9.0,浸提时间90 min,酸沉pH 4.5.在此条件下,蛋白质提取率达42.5%,产品纯度为95.65%.所得花生分离蛋白具有良好的功能特性.     

超声-酶-碱法提取啤酒废酵母β-1，3-葡聚糖的研究

采用超声-酶-碱法从啤酒废酵母中提取β-1,3-葡聚糖,在超声波预处理和酶解最佳条件的同时,利用响应曲面法研究分析NaOH浓度、温度、用量和时间对β-1,3-葡聚糖得率、纯度和蛋白质含量的影响.试验结果表明,超声波处理后破壁率为94.22%;酶解后蛋白质去除率为62.82%;当加入2.05%的NaOH 30.50 mL,74℃处理5.7 h,β-1,3-葡聚糖的得率为10-21%,纯度为88.14%,蛋白质含量为1.19%.超声-酶-碱法处理工艺具有β-1,3-葡聚糖得率、纯度高、蛋白质含量低及提取时间短的特点.     

燕麦麸中β-葡聚糖的提取与纯化工艺研究

以燕麦麸为原料提取β-葡聚糖,系统研究了原料处理、去除淀粉、蛋白质及醇析等关键步骤对β-葡聚糖得率和纯度的影响,通过单因素实验及正交实验优化了β-葡聚糖提取工艺,料水比110,提取温度65℃,pH 9.0,提取时间2 h;提取中加入耐热α-淀粉酶去除淀粉,pH 4.5静置4 h去蛋白,60%的乙醇溶液醇析,时间9 h.采用该工艺条件下得到β-葡聚糖的得率和纯度分别为6.52%、75.56%,经过硫酸铵分级法进一步纯化,其产品纯度可达到90.66%.     

3 种有机酸在不同pH值条件下酸沉处理对米糠蛋白结构的影响

以传统碱溶酸沉制备米糠蛋白所用的盐酸为对照,采用酒石酸、苹果酸、柠檬酸3?种有机酸分别在pH?4.0、3.5、3.0、2.0条件下酸沉制备米糠蛋白,研究有机酸酸沉对米糠蛋白结构的影响。结果表明,同种有机酸在不同pH值条件下酸沉,当酸沉pH值下降时,米糠蛋白总巯基含量和α-螺旋相对含量无显著变化,游离巯基含量和无规卷曲相对含量上升,β-折叠和β-转角相对含量下降,内源荧光强度和表面疏水性先增加后下降。相比盐酸酸沉,有机酸在相同pH值条件下酸沉制备米糠蛋白的总巯基、二级结构组成和表面疏水性无显著差异,但游离巯基含量下降、内源荧光强度升高。分子质量分布、粒径分布及电泳结果表明,较低pH值条件下的酸沉可导致米糠蛋白结构发生部分解离和聚集,但没有形成新的亚基和高分子质量聚集体。     

大豆膳食纤维及其各组分连续分离工艺研究

对大豆膳食纤维的提取及其各组分的连续分离工艺进行研究。获得酶-化学法提取膳食纤维的最佳工艺条件为:木瓜蛋白酶用量0.012∶1(g/g)、碱提液pH12.03、碱提温度68℃,所得膳食纤维样品中总膳食纤维含量为95.57%,其中可溶性膳食纤维17.44%,不溶性膳食纤维78.13%。碱提酸沉法分离半纤维素的最佳工艺条件为:液固比21∶1、提取温度35.5℃、提取时间5.3h。该工艺条件下半纤维素的得率为30.15%,纯度为92.34%。酸性次氯酸钠法分离纤维素的最佳反应条件为:次氯酸钠浓度为16%、pH4.0~4.5、提取温度65℃。纤维素样品的得率为37.24%,产品中纤维素含量91.14%。     

酪蛋白组分分离技术及消化性测定

本研究以牦牛乳干酪素为原料，分离得到纯度为74．2％的α-酪蛋白组分和纯度为75．0％的B．酪蛋白组分，其得率分别为69．5％和26．5％。通过酸凝性实验观察到在37℃，pH4．0条件下，α-酪蛋白组分形成了颗粒较大的凝块，而β-酪蛋白组分形成的是松软的絮凝物。体外消化实验结果亦显示β-酪蛋白组分的消化性要明显好于α-酪蛋白组分和牛乳酸沉酪蛋白。因而分离得到的β-酪蛋白组分可作为生产利于婴儿消化的新式配方乳粉的基料。     

pH调节法提取牡蛎蛋白及氨基酸、蛋白组成分析

以牡蛎全脏器为原料,采用pH调节法(pH-shifting)分离提取牡蛎分离蛋白并对其氨基酸组成及蛋白组成进行分析。试验结果表明,牡蛎分离蛋白提取最佳碱溶条件为pH 12~13,最佳酸沉条件为pH 4.5~5.1。在最佳提取条件下获得的牡蛎分离蛋白得率为66.7%,蛋白纯度达92.5%(干基计)。牡蛎分离蛋白各种必需氨基酸均高于FAO/WHO推荐值,约占总氨基酸的42.44%,风味氨基酸和支链氨基酸含量也较高。SDS-PAGE电泳图谱显示牡蛎分离蛋白在200,97,44 ku处均出现比较明显的蛋白条带。本研究结果将为进一步开发利用牡蛎蛋白资源提供理论依据。     

花生分离蛋白制备工艺研究

采用碱提酸沉法从低变性脱脂花生粕中提取花生分离蛋白。探讨了碱提温度、碱提时间、碱提固液比等因素对产品蛋白质含量和得率的影响。通过正交试验优化制备花生分离蛋白的最佳工艺条件为:碱提温度55℃,碱提2次,每次1.5 h,碱提固液比1∶9,碱提pH 9.0,酸沉pH 4.5。在此条件下产品的蛋白质含量为90.87%(N×6.25,干基),得率最高可达38.65%。该产品的氮溶解指数为68.46%,持水性2.3 g/g,吸油性1.3 mL/g,乳化性50.4%,乳化稳定性56.55%。     

两种分离β-乳球蛋白方法的比较

以乳清粉为原料,比较研究了硫酸铵沉淀加凝胶层析法和高盐低pH加透析法两种技术路线分离纯化β-乳球蛋白的得率与纯度.实验结果表明,高盐低pH加透析法所得β-乳球蛋白浓度为11ms/mL、SDS-PAGE检测纯度达90%以上;硫酸铵沉淀加凝胶层析法所得β-乳球蛋白浓度为1mg/mL、纯度>90%.     

工业大麻分离蛋白的制备研究

以工业大麻为原料,采用碱溶酸沉法提取工业大麻分离蛋白(IHPI),结合响应面法优化蛋白最佳提取条件.研究结果表明:最优提取条件为温度39.58℃、pH9.27、料液比1∶24.22、提取时间0.5h,酸沉最佳等电点为pH5.0,在此优化条件下进行验证实验,工业大麻分离蛋白提取率达到52.27%,蛋白质纯度83.8%.     

青钱柳愈伤组织总黄酮碱溶酸沉提取工艺

目的:研究以碱溶酸沉法提取青钱柳愈伤组织中的总黄酮。方法:采用碱溶酸沉法,对影响青钱柳愈伤组织中总黄酮提取的pH值、固液比、提取时间、硼砂用量等因素进行系统研究。结果:青钱柳愈伤组织中总黄酮碱提酸沉的最佳提取工艺为:采用固液比1:20,碱提液pH9,硼砂含量2.5%,提取时间60min,酸沉pH4.5。结论:在最佳提取工艺下,青钱柳愈伤组织中总黄酮得率达到4.01%。     

豆制品废水中蛋白质提取与纯化工艺研究

用碱溶酸沉法纯化蛋白质粗品,通过单因素试验和正交试验优化提取工艺。试验得到:在碱溶pH9.0,料液比1∶20(g/mL),提取温度40℃,提取时间1.5h,酸沉pH为3.7的条件下,以10 000 r/min离心蛋白质沉淀率达到89.8%。蛋白质得率为75.5%,纯化后蛋白质纯度达到90.5%,灰分含量为3.76%。     

微波辅助碱液提取花生壳黄酮工艺

采用微波辅助碱液提取花生（Arachis hypogaea L.）壳黄酮,通过酸沉技术得到黄酮粗品。以黄酮提取得率作评价指标,利用单因素实验探索各因素对黄酮提取得率的影响,继以正交实验优化工艺参数。得到最适工艺条件：提取溶剂pH12.0、液料比30∶1 mL/g、提取温度80℃、酸沉pH4.0和提取时间17 min。在优化后的工艺中,黄酮提取得率达（1.113±0.010）%,纯度为（16.90±0.13）%。该工艺操作简单、便捷,可用于花生壳黄酮的提取。