部分烟草核心种质过氧化物同工酶标记分析

对40个不同类型烟草核心种质进行了过氧化物同工酶标记分析，结果表明，种问遗传差异是比较明显的，但多数品种间遗传差异不明显，这与过氧化物酶本身所能表达的遗传多样性有关，但也与实验环境控制及实验技术的掌握有关。40个种质的酶带可划分为13个种群，其中种群A、B和J包括较多的种质，3个野生种具有特异的谱型，种质问的遗传差异与栽培类型并无必然联系，主要取决于种质间演化关系。采用信息聚类法进一步将40个种质划分为3大聚类群，3个野生种分属3个不同聚类群，反映了与其它种质的亲缘关系。类群Ⅰ包含种群A、C、D、M共17个种质；类群Ⅱ包含种群B、E、F共9个种质；类群Ⅲ包含种群G、H、I、J、K、L共14个种质。其聚类群的遗传差异以类群Ⅱ最大，其次是类群Ⅰ，类群Ⅲ最小。     

部分烟草种质主要病害抗性分析

通过频率分布及多样性评价,对1000多份种质的7个主要病害抗性进行了分析.结果表明,我国烟草种质资源大部分均为感病以上品种.TMV抗性资源相对较丰富,高抗或免疫种质达17%.其余病害抗病资源中,多为抗病或中抗,高抗种质很少,不到2%.我国主要病害抗性种质较为匮乏.     

烟草青枯病抗性基因的遗传分析及RAPD标记

选用高感青枯病品种"红花大金元"与高抗青枯病品种"Ti448A"配制杂交组合,采用温室苗期叶片人工注射法接种鉴定两亲本及其杂交后代F₁、F₂、BC₁P₁代的青枯病抗性表现,结果表明抗病亲本材料Ti448A的抗病性由一对显性基因控制。依据混合群体分组分析法(BSA)建立抗青枯病基因池和感青枯病基因池,通过RAPD试验,从近200个随机引物中筛选出一个在两池间具有多态性的引物S503,用双亲、F₁、F₂单株DNA进行RAPD试验证明了该引物扩增出的特异性片段S503-750是一个与抗青枯病基因连锁的RAPD标记,利用JOINMAP (version 1.4)软件计算得此标记与抗青枯病基因间的重组率为5.984%,连锁距离为6.261 cM。      

部分烤烟种质遗传多样性与亲缘关系的RAPD分析

以22份烤烟材料为供试材料,应用RAPD(随即扩增多态性DNA)分子标记技术研究22份烤烟材料之间遗传多样性和亲缘关系.结果表明,第一等级划分(D=0.30)可以将22份材料划分为三大类群.第二等级划分(D=0.23)可以将22份材料划分为六个小类群,其中,一个是由云烟系列与亲本是特字401系选的品种及其杂交后代组成的类群;一个是由多数美国来源品种组成的类群;一个由9804、岩烟97和Coker176三个品种组成的类群;一个由CF965和K07两个品种组成的类群;红花大金元和C2分别独立成类.说明分子标记多态性基本上反映了品种间的遗传变异.本结果为烟草品种改良和杂交种选配,提高育种效率提供了理论依据.     

烟草黑胫病菌全基因组DNA遗传多态性RAPD标记

应用ＲＡＰＤ分子标记技术,从８０个随机引物中筛选出１０个分别为ＯＰＡ０２、ＯＰＡ０１３、ＯＰＡ０１４、ＯＰＡ０１６、ＯＰＡ０１８、ＯＰＢ０４、ＯＰＢ０５、ＯＰＤ０２、ＯＰＤ０３、ＯＰＤ０１１,对来自云南省６大主产烟区的２４个烟草黑胫病菌株全基因组ＤＮＡ进行随机扩增。结果表明：１０个引物共标记出８９条ＲＡＰＤ图带,其中多态性图带６３条,多态率７０．７％。引物ＯＰＤ０１１、ＯＰＤ０２、ＯＰＡ０１６、ＯＰＢ０４对每个受试样品均可标记出分子量为０．８７Ｋｂ和１．１Ｋｂ的ＤＮＡ片段,此４个引物对受试样品全基因组ＤＮＡ具有特征性分子标记的特性,利用核酸分子杂交技术对田间寄主体内的黑胫病菌的有无进行分子检测。被标记出的分子量为０．８７Ｋｂ和１．１Ｋｂ的特征性ＤＮＡ片段,可用来制备特异性探针,对田间烟草黑胫病菌发生动态进行检测和预报。     

用SRAP标记研究烟草种质资源的遗传多样性

用15对SRAP引物组合对46个普通栽培烟草品种,包括30个普通烟草栽培种和16个黄花烟草进行了多态性分析,共获得3036条带,其中多态性条带为636条,每对引物平均提供42个多态性标记信息。基于UPMGA方法得到的聚类分析结果表明46个烟草品种间的遗传相似系数为0.67～0.98,聚类分析可将这46个品种划分为2个大类群,同种类型的烟草基本聚合在同一种类群中,表明SRAP标记是适合烟草种质资源遗传多样性研究的。     

烟草种质资源遗传多样性与群体结构分析

发掘优良基因,为改良烟草品种提供理论依据。采用ABI-3500xl遗传分析仪对87份烟草种质材料进行多态性检测。在87份烟草种质中,41对SSR引物共检测出241条多态性位点,平均为5.88个位点。遗传相似系数为0.47~0.91,PIC值为0.23~0.91,平均为0.63。群体结构分析表明,当K=2时,△K值最大,即87份烟草材料可划分为2个类群P1和P2,P1类群又可划分为5个亚类,P2类群可划分为2个亚类。烟草种质资源遗传多样性丰富,群体结构划分与种质类型不完全相关。     

RAPD标记在烟草研究中的应用

随机扩增多态DNA(Randomly Amplified Polymorphic DNAs,RAPD)分子标记技术的诞生,为分子生物学技术在农业研究中的应用注入了新的活力,并为传统农业研究向分子水平发展提供了捷径。本文重点综述了RAPD分子标记技术在烟草群体分离分析和鉴定、标记辅助选择、遗传变异的识别、烤烟品种分子指纹分析、黑胚病菌全基因组DNA多态性标记、根结线虫种类鉴定、赤星病菌的分类地位等方面的研究进展,以及这些领域的研究发展和应用前景。      

烟草青枯菌遗传多样性分析

【目的】阐明中国主要产烟省区烟草青枯菌的种内遗传多样性,揭示烟草青枯菌种内遗传多样性与烟草品种、地理来源等的关系,为指导烟草青枯病抗病育种及综合防治等提供理论依据。【方法】采用多位点序列分型（Multilocus Sequence Typing, MLST）研究方法对采自我国11个主要产烟省区的93株烟草青枯菌进行种内遗传多样性分析。【结果】93株供试菌株被分为51个序列型（Sequence Type, ST）,运用eBURST V3软件共享5/7基因标准可将所有供试菌株划分为4个亚群(group)与4个单一群（singleton）。【结论】实验结果表明,我国烟草青枯菌地理分布广泛,存在丰富的种内遗传多样性,但烟草青枯菌的组群划分与菌株的地理区域和烟草品种没有明显的相关性。      

广东省烟草种质资源特征分析

为更好地了解和利用所保存的烟草种质资源,2007年对86份烤烟种质资源的主要性状进行了研究,试验设两次重复,每小区种植22株,各小区随机调查5株.结果表明,主要性状差异表现在株高、茎围、节距、叶数、叶长、叶宽等性状,其变幅分别为110.4～326.2 cm、6.3～12.9 cm、2.5～8.8 cm、15.2～59.0片,42.3～77.2 cm、16.0～38.0cm,变异系数分别为13.5%,9.4%,21.2%,17.1%,10.3%,13.6%,Shannon指数分别达到2.090,2.133,2.167,1.916,2.172和2.189.说明广东省烤烟种质资源在主要性状方面具有丰富的遗传多样性,大部分资源的主要性状可供育种工作者选择利用.     

烟草RAPD分析影响因子初探和优化程序

以烤烟品种Hicks和Speight G-28为材料,针对烟草RAPD分析中PCR过程的Taq酶浓度、Mg∧2 浓度、退火温度、循环数、Primer浓度、dNTP浓度等因素进行了研究。结果表明,体系中含0.8U Taq酶,40mmol/L MgCl2,10μmol/L引物,3.0mmol/L dNTP,循环数为40,退火温度36℃效果较好,从而确立适合烤烟RAPD分析的PCR程序主要条件,为RAPD技术应用于烟草的品种鉴定与品种资源研究奠定了基础。     

烤烟品种的RAPD分析

利用RAPD标记研究了29个烤烟品种的分子指纹和遗传关系。100个随机引物经10个品种筛选,选出18个随机引物对29个品种基因组DNA进行扩增,得到了29个烤烟品种的分子指纹图谱,参照这些图谱,可对不同烤烟品种进行真实性鉴定。以扩增到的79条多态性DNA片段为基础计算29个品种间遗传相似系数,利用UPGMA法作聚类图,可将参试品种分为3个类群。云南省主栽品种K326与近年选育的品种V2、云烟85、云烟317等被归为一类,遗传基础过于狭窄,建议选用一些遗传关系较远的品种进行亲本选配、品种布局;北方烟区主栽品种NC89、地方品种净叶黄及G140等则归为另一类。      

烟草RAPD反应体系优化及品种多态性标记研究

利用鲜烟叶材料对RAPD反应体系进行了优化,建立了一个适合烟草的比较稳定的RAPD反应体系,并对影响RAPD反应的主要因素进行了探讨.利用该稳定体系,对具有两对相对性状差异的两个烤烟品种进行了多态性标记研究,从500个引物中筛选到4个有多态性的引物,这4个引物扩出的多态性片段可作为鉴定两个品种的分子标记.初步分析认为,两个品种的多态性标记可能与香气性状和抗病性状连锁.     

复烤烟叶RAPD反应体系优化研究

以复烤烟叶为实验材料,对烟草RAPD分析过程中的主要影响因素进行研究,获得了清晰的DNA条带.确立了最适RAPD反应体系,即20μL反应体系中,模板40 ng,Mg2+1.5 mM,dNTP0.13 mM,引物0.30 μM,Taq DNA聚合酶1.25 U;37℃退火30 s.该反应体系为烟叶品种的合理利用及分子标记研究提供了可靠的理论依据和技术支持.     

烤烟品种的RAPD引物筛选

本试验筛选出了45个引物,可产生遗传多样性,其中OPA-08、OPA-16、OPC-10、OPC-12、GENMES'S 36号、78号、112号、181号引物其扩增结果稳定性好、多态性强。这些引物的RAPD扩增结果都可作为烟草烤烟品种的遗传多样性分析、基因定位及分子标记等。经凝胶电泳比较,GENMED'S 36号引物可作为烟草品种的最适宜的引物;1.8kb条带被初步认为与抗黑胫病基因相关。这些结果为以后对烟草烤烟品种在分子水平上的研究奠定了基础,加速烟草烤烟品种分子水平上的研究进程      

木霉的RAPD分析

运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对18个木霉菌株进行基因组DNA多态性分析.扩增结果表明,18个引物均反映出18个菌株间的遗传多态性,供试18个木霉菌株的RAPD分析与其生防效果之间不存在相关性.引物OPA-04与OPA-13对木霉菌全基因组DNA具有特征性分子标记.聚类分析结果表明,种间的聚类分析结果与形态鉴定的结果趋于一致.以欧氏距离5.0～5.5为适宜的阀值范围,RAPD遗传标记木霉菌可以作为该菌分类的有效手段之一.     

几株酱油米曲霉的分离和RAPD分析

从不同来源的酱油曲中分离出6株形态有差异的米曲霉,分别测定所产蛋白酶酶活,并与沪酿3.042进行了RAPD分析,探讨其系统发育的亲缘关系。结果表明,从RAPD扩增图谱可以区分形态上难以分辨的不同米曲霉。聚类分析结果表明,各菌株遗传分化不大,具有相近的亲缘关系。初步探讨了RAPD在曲霉分类上应用的可行性,认为RAPD分析结果可作为曲霉分类参考的依据。